化学工程
概述基因克隆的基本步骤。
题目
概述基因克隆的基本步骤。
参考答案和解析
正确答案:
基因克隆的基本步骤有：
①用相互配套的1～2种限制酶切割含目的基因的DNA和载体DNA（切）；
②连接目的基因和载体DNA得到重组载体（接）；
③将重组载体导入宿主细胞（转），若使用的是质粒载体，称转化，噬菌体载体称转导，病毒载体称转染；
④将经过转化（或转导，转染）的细菌或细胞稀释，在加有选择性培养基的平皿培养基或细胞培养板上培养，选择含目的基因的阳性克隆，并用其它方法进一步鉴定（筛）；
⑤扩大培养选出的阳性克隆（扩）。随后可分离目的基因，或在一定的条件下表达目的基因。
①用相互配套的1～2种限制酶切割含目的基因的DNA和载体DNA（切）；
②连接目的基因和载体DNA得到重组载体（接）；
③将重组载体导入宿主细胞（转），若使用的是质粒载体，称转化，噬菌体载体称转导，病毒载体称转染；
④将经过转化（或转导，转染）的细菌或细胞稀释，在加有选择性培养基的平皿培养基或细胞培养板上培养，选择含目的基因的阳性克隆，并用其它方法进一步鉴定（筛）；
⑤扩大培养选出的阳性克隆（扩）。随后可分离目的基因，或在一定的条件下表达目的基因。
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相似问题和答案
第1题：
DNA克隆过程不包括以下步骤
A.获取目的基因
B.选择与构建载体
C.筛选转化子
D.载体基因DNA测序
B.选择与构建载体
C.筛选转化子
D.载体基因DNA测序
答案：D
解析：
第2题：
在遗传研究中，常用信使RNA进行基因的克隆（即形成许多完全相同的DNA），这种快速克隆基因的步骤依次是（） ①DNA复制 ②转录 ③逆转录 ④翻译
- A、③②①
- B、③①
- C、②①④
- D、③①④
正确答案:B
第3题：
重组DNA技术的基本步骤包括
A、选择载体和获取目的基因
B、目的基因与载体酶切后连接
C、重组DNA导入受体细胞
D、筛选阳性克隆
E、分、切、接、转、筛
参考答案：ABCDE
第4题：
基因工程操作的基本步骤？
正确答案: ①分离或合成目的基因；
②把带有目的基因的DNA片段与载体DNA体外重组；
③将重组体转入到受体细胞；
④重组体克隆的筛选和鉴定。
第5题：
链霉菌基因克隆的基本步骤有哪些？
正确答案: 链霉菌基因克隆的基本步骤：
（1）制备供体DNA片段；
（2）制备载体DNA；
（3）连接载体和供体DNA片段；
（4）将受体菌制成原生质体；
（5）将连接了供体DNA片段的载体对受体菌的原生质体进行转化；
（6）让原生质体再生细胞壁，随后对转化的细胞进行选择。
第6题：
利用定位克隆策略首先克隆的基因是（）。
- A、DMD基因
- B、CF基因
- C、c-myc基因
- D、p53基因
正确答案:A
第7题：
下列哪项不是分子克隆的主要步骤（）
- A、目的基因的表达
- B、基因文库的建立
- C、目的基因的筛选
- D、目的基因的分析
正确答案:A
第8题：
DNA克隆过程的步骤中不包括
A．获取目的基因
B．选择与构建载体
C．目的基因与载体的拼接
D．载体基因DNA测序
E．筛选转化子
正确答案：D
第9题：
基因工程的基本步骤
正确答案: （1）目的基因的获取
（2）目的基因与载体的连接
（3）重组体导入受体细胞
（4）外源基因的表达和产物的分离
第10题：
请简述基因工程的基本步骤
正确答案: A.分离、提纯载体和目的基因，并加以鉴定B.用限制性核酸内切酶将载体切开以便插入目的基因C.将载体和目的基因结合成重组体D.将重组体转化为宿主细胞E.将含目的基因的细胞筛出并鉴定F.克隆基因表达.