生物学

比较蛋白质的分离纯化技术中凝胶过滤和超过滤方法的原理。

题目

比较蛋白质的分离纯化技术中凝胶过滤和超过滤方法的原理。

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第1题:

凝胶过滤色谱中,适合于分离糖、蛋白质、苷类成分的葡聚糖凝胶G(Sephadex G),其分离原理是

A、吸附性能

B、分配比

C、离子交换

D、分子大小

E、水溶性大小


参考答案:D

第2题:

经典的蛋白质抗原纯化分离方法为()。

  • A、盐析沉淀法
  • B、有机溶剂沉淀法
  • C、凝胶过滤
  • D、离子交换层析
  • E、亲合层析

正确答案:A

第3题:

可用于分离亚细胞成分和蛋白质,是可溶性抗原纯化的第一次过筛的方法是

A、选择沉淀法

B、亲和层析法

C、凝胶过滤法

D、离子交换层析法

E、超速离心分离法


参考答案:E

第4题:

常用的纯化多糖的方法有(),(),(),(),凝胶过滤法,还有()和()适用于粘多糖的纯化。


正确答案:乙醇沉淀法;分级沉淀发;季铵盐络合法;离子交换层析法;乙醇分级沉淀法;电泳法

第5题:

在生物大分子的分离纯化过程中,能将生物大分子与无机盐及有机小分子分离的方法是以下哪些?()

  • A、离子交换层析
  • B、凝胶过滤层析
  • C、滤纸过滤
  • D、透析
  • E、离心

正确答案:B,D

第6题:

蛋白质分离分析技术常用的有哪几种?简述凝胶过滤、电泳基本原理。


正确答案: 常见分离技术:离心、盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、电泳、柱层析、透析等。
凝胶过滤原理:多聚糖具有大小不一的孔径,大分子在孔径中运动距离短,洗脱快,小分子路径长,洗脱时间长。
电泳原理:凝胶中存在电场效应和分子筛效应:电荷多,运动快;分子小运动快。

第7题:

纯化标记物的方法中利用分子筛效应与电荷效应的是()

  • A、PAGE法
  • B、HPLC法
  • C、凝胶过滤法
  • D、离子交换层析法
  • E、柱层析分离纯化

正确答案:A

第8题:

经典的蛋白质抗原纯化分离方法为

A.盐析沉淀法

B.有机溶剂沉淀法

C.凝胶过滤

D.离子交换层析

E.亲合层析


参考答案:A

第9题:

由于目的蛋白质和杂蛋白分子量差别较大,拟根据分子量大小分离纯化并获得目的蛋白质,可采用()

  • A、SDS凝胶电泳
  • B、盐析法
  • C、凝胶过滤
  • D、吸附层析

正确答案:C

第10题:

试回答蛋白质串联亲和纯化分离原理、方法及步骤。


正确答案: 串联亲和纯化(TAP),用于研究蛋白质在生理条件下的相互作用,通过嵌入一段蛋白质标记,在目的蛋白的一端或中部导入蛋白质标记,这样便在没有破坏目的蛋白调控序列的基础上,使得被标记的目标蛋白其表达量与其在细胞中自然表达水平相当,避免了由于过量表达的导致非自然条件下的蛋白质相互作用。经过特异性的两步亲和纯化,在生理条件下与目标蛋白发生真实作用的蛋白便可被一起洗脱下来,这样得到的蛋白质复合体接着可以用质谱技术或Edman降解法进行鉴定。
方法及步骤:
(1)蛋白质标记:由蛋白A的IgG结合区(ProtA)和钙调蛋白结合区(CBP)构成,中间被一个TEV蛋白酶的酶切位点隔开;
(2)构建表达标记蛋白的细胞或组织:将编码蛋白质标记的基因片段导入目标蛋白质编码基因的特定部位;
(3)细胞抽提物的准备;
(4)串联亲和纯化;
(5)蛋白质复合体的鉴定。

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