生物学

基因敲除的基本程序是什么?

题目

基因敲除的基本程序是什么?

参考答案和解析
正确答案: 通过DNA同源重组,使得胚胎干细胞特定的内源基因被破坏而造成功能丧失,然后通过胚胎干细胞介导得到该基因丧失的小鼠模型的过程称为基因敲除。
1、打靶载体的构建:同源序列要足够长,要含有筛选用的标志基因。
2、胚胎干细胞的体外培养
3、打靶载体导入胚胎干细胞
4、同源重组胚胎干细胞的筛选
5、基因敲除胚胎干细胞注射入胚泡
6、胚泡植入假孕小鼠的子宫中
7、杂交育种获得纯合的基因敲除动物
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相似问题和答案

第1题:

下列哪种方法不属于基因治疗( )

A、基因矫正

B、基因置换

C、基因失活

D、基因增补

E、基因敲除


参考答案:E

第2题:

基因敲除技术涉及的变异类型是

A、基因重组

B、基因突变

C、人工诱变

D、染色体片段缺失

E、基因转座


参考答案:A

第3题:

(16分)小鼠基因敲除技术获得2007年诺贝尔奖,该技术采用基因工程、细胞工程、杂交等手段使小鼠体内的某一基因失去功能,以研究基因在生物个体发育和病理过程中的作用。例如现有基因型为BB的小鼠,要敲除基因B,可先用体外合成的突变基因b取代正常基因B,使BB细胞改变为Bb细胞,最终培育成为基因敲除小鼠。

(1)基因敲除过程中外源基因是否导入受体细胞,可利用重组质粒上的______________检测。如果被敲除的是小鼠抑癌基因,则可能导致细胞内的_________________被激活,使小鼠细胞发生癌变。


正确答案:

标记基因;原癌基因

解析:

(1)

作为质粒的一个条件之一就是要具有标记基因,以检测外源基因是否导入受体细胞。

癌变的产生就是原癌基因由抑制态变激活态。

第4题:

科学家将单瓣花改造为重瓣花,可以通过敲除()实现。

  • A、A类基因
  • B、B类基因
  • C、C类基因
  • D、B类和C类基因

正确答案:C

第5题:

目前研究最多、最深入的基因敲除动物模型是基因敲除小鼠。


正确答案:正确

第6题:

重组DNA技术中,可用于获取目的基因的方法有:

A.化学合成法

B.PCR

C.Western blotting

D.基因敲除


正确答案:AB

第7题:

基因敲除技术的原理是基于

A.基因同源重组
B.基因突变
C.基因扩增
D.基因易位

答案:A
解析:

第8题:

最常用作转基因和基因敲除动物模型的生物是( )

A、大鼠

B、小鼠

C、果蝇

D、线虫

E、家兔


参考答案:B

第9题:

基因敲除主要是应用DNA同源重组原理,将同源DNA片段导入受体细胞,使同源DNA片段在原有位置替代了靶基因片段,达到基因敲除的目的。由此可推测()

  • A、基因敲除实际上是删除某个基因,达到使该基因“沉默”的目的
  • B、利用基因敲除技术不能修复细胞中的病变基因
  • C、基因敲除可定向改变生物体的某一基因
  • D、基因敲除技术可治疗先天性愚型

正确答案:C

第10题:

PCR克隆目的基因的基本程序是什么?


正确答案:由TaqDNA聚合酶扩增的PCR产物中,其3’末端总是会带有一个非模板依赖型的突出碱基,而且这个碱基几乎总是A,因为TaqDNA聚合酶对dATP具有优先聚合活性。由于该突出碱基的存在,克隆时即可以采取TdT末端加同聚尾的方法与载体拼接,也可以使用专门的T载体克隆。