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简述酶分子定向进化的主要方法

题目

简述酶分子定向进化的主要方法

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相似问题和答案

第1题:

酶分子修饰的主要方法有哪些?


正确答案: (1)化学修饰:利用化学手段将某些化学物质或基团结合到酶分子上,或将酶分子的某些部分删除或置换,改变酶的理化性质,最终达到改变酶催化性质的目的。
①大分子结合修饰;
②肽链有限水解修饰;
③侧链基团修饰;
④分子内或分子间交联:使用双功能试剂交联,更稳定;
⑤氨基酸置换修饰:改变活力中心的氨基酸;
⑥金属离子置换修饰:如将酰基化氨基酸水解酶的活力中心的Zn2+置换为Co2+。
(2)物理修饰:通过物理方法,不改变酶的组成单位及基团,只使酶分子的空间构象发生改变(副键变化或重排),而改变酶的某些特性和功能。
①高压处理:酶活提高;最适条件改变;
②适当变性改变空间构象:稳定性适当提高

第2题:

酶分子定向进化的主要方法有哪些?


正确答案:(1)易错PCR(error-pronePCR)可以用Mn2+来替代Mg2+,使PCR时发生突变。
(2)DNA重组(改组)(DNAshuffling)
重组可以在同一基因的不同突变体之间进行,也可以在不同物种的同源基因间进行。因此,DNA重组就是把不同来源的同源基因断裂成不同大小的片段,然后对这些片段进行重新组合。
(3)随机引物体外重组
(4)交错延伸法(Staggeredextensionprocess)

第3题:

下列哪一项不属于酶改性的内容?

A、酶失活

B、酶分子修饰

C、酶固定化

D、酶定向进化


参考答案:A

第4题:

简述酶分子定向进化的一般步骤。


正确答案:酶定向进化通常分3步进行:首先通过随机突变或基因体外重组创造基因多样性;然后导入适当载体后构建突变文库;最后通过灵敏的筛选方法,选择阳性突变子。这个过程可重复循环,直至得到预期性状的酶。

第5题:

酶分子定向进化的基本方法有哪些?


正确答案:①易错PCR
可以用Mn2+来替代Mg2+,使PCR时发生突变。
②DNA重组(改组)(DNAshuffling)
重组可以在同一基因的不同突变体之间进行,也可以在不同物种的同源基因间进行。因此,DNA重组就是把不同来源的同源基因断裂成不同大小的片段,然后对这些片段进行重新组合。
③外显子改组;与DNA改组相似,都是在各自含突变的片段进行交换。
④随机引物体外重组
⑤交错延伸法
⑥临时模板随机嵌合法

第6题:

举例说明酶定向进化技术的应用。


正确答案:(1)提高酶的催化效率;
(2)增加酶的稳定性;
(3)改变酶的底物特异性。(枯草杆菌蛋白酶E.

第7题:

酶分子定向进化


正确答案:是从一个或多个已经存在的亲本酶出发经过基因的突变和重组,构建一个人工突变酶库,通过筛选最终获得预先期望的具体某些特征的进化酶。

第8题:

简述常用的酶分子表面化学修饰方法。


正确答案: (1)聚乙二醇对酶的修饰,该类修饰剂是既能溶于水,又可以溶于绝大多数有机溶剂的两亲分子,且在没有免疫原性和毒性,在体内不残留。
(2)右旋糖酐及右旋糖酐硫酸酯对酶的修饰:
○1溴化氰法;
○2高碘酸法。
(3)糖肽对酶的修饰:糖肽一般是通过纤维蛋白酶或蛋白水解酶降解纤维蛋白或γ—球蛋白而得。糖肽结构上有氨基,这些氨基经合适的方法活化后能与酶分子中的氨基发生反应而以共价键结合实现对酶的修饰。

第9题:

酶分子的定向进化


正确答案:是指在分子水平上,人为地创造特殊的进化条件,模拟自然进化机制(随机突变、基因重组和自然选择),对酶基因进行改造,并进行定向选择,筛选出所需性质的酶蛋白.

第10题:

结合酶制剂的应用论述酶分子定向进化的酶工程意义


正确答案:⑴提高酶分子的催化活力;
⑵改善酶蛋白的稳定性;
⑶改善酶蛋白的底物专一性;
⑷通过酶蛋白分子对应用环境的适应能力。