军队文职招聘考试
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相似问题和答案
第1题：
简述固定化酶、固定化细胞制备方法及特点。
正确答案: 固定化酶与固定化细胞都是以酶的应用为目的，所以两者的制备法基本相同，均包括下面的四种方法：
包埋法、吸附法、共价偶联、非共价结合法
一、
包埋法的优点：反应条件温和，很少改变酶结构但是又较牢固的固定化方法。
包埋法的缺点：只有小分子底物和产物可以通过高聚物网架扩散，对那些底物和产物是大分子的酶并不适合。
二、
吸附法的优点：操作简单，可供选择的载体类型多，吸附过程可同时达到纯化和固化的目的，固定化酶使用失活后可以重新活化和再生。
吸附法的缺点：酶和载体的结合力不强，易脱落， 会导致催化活力的丧失和沾污反应产物。
三、
共价偶联法的优点：得到的固定化酶结合牢固，稳定性好，利于连续使用。
共价偶联法的缺点：载体活化的操作复杂，反应条件激烈，同时共价结合会影响到酶的空间构象，从而对酶的催化活性产生影响。
四、
非共价结合法的优点：载体是酶蛋白本身，结合力强，能提高非常高的酶浓度
非共价结合法的优点：难制备，不能再生，固定化费用高。
第2题：
什么是固定化酶？简述特点与方法。
正确答案:固定化酶即限制或固定于特定空间位置的酶，具体来说，是指经物理或化学方法处理，使酶变成不易随水流失即运动受到限制，而又能发挥催化作用的酶制剂。
固定化酶特点是可以多次使用，提高了酶的稳定性，反应后，易于分离产物，反应条件易于控制，酶的利用效率高，更适合于多酶反应。酶固定化方法有吸附法、共价结合法、包埋法及交联法。
第3题：
酶固定化后（）、（）、（）等性质发生改变。
正确答案:底物专一性、pH-活性曲线和最适pH、动力学常数
第4题：
简述固定化对酶性质的影响（固定化酶的性质）。
正确答案:（1）稳定性大多数酶固定化后，稳定性都增强，操作寿命和保存寿命也延长。
（2）固定化酶的最适温度和最适pH固定化后，大多数酶的热稳定性提高，所以最适温度也随之提高。酶固定化后，对底物作用的最适pH和酶活力－pH曲线常常会发生偏移。带负电荷的载体固定化的酶的最适pH向碱性偏移，带正电荷的载体固定化的酶的最适pH向酸性偏移。
（3）固定化酶的动力学特征固定化酶的表观米氏常数Km随载体的带电性能变化。
（4）固定化酶的专一性酶固定化后，一般不会改变其专一性。但也有少数情况酶固定化后专一性会发生改变。
第5题：
酶固定化后，性质会发生哪些改变，其原因是什么？
正确答案:（1）固定化对酶活性的影响：
固定化以后，酶活性下降，反映速率下降。原因是固定化以后，酶结构、构象的变化会导致活性中心的变化，空间位阻、内扩散阻力都会增大
（2）最适pH的改变：
酶经固定化后，pH活性曲线及最适pH有时会发生变化.由带负电载体制备的固定化酶的最适pH比游离酶的最适pH为高；而用带正电载体制备的则情况相反；而用不带电的载体，最适PH不变。
（3）底物特异性的改变：
固定化酶的活力，一般比天然酶低.其底物特异性也可能发生变化.一般认为酶被固定到载体后可引起立体障碍，使高分子底物与酶分子表面的接近受到干扰，从而显著降低了酶的活性，而低分子底物则受到立体障碍的影响较小，底物分子容易接近酶分子，因而与原酶活力无显著差别.由此看来改变了高分子底物的特异性。
（4）最适温度的变化：
酶固定化后，由于热稳定性提高，最适温度一般随之提高。
（5）动力学常数的变化：载体与底物带相反电荷：由于静电相吸，固定化酶与游离酶相比，表观米氏常数往往减小；载体与底物带相同电荷，固定化酶的表观Km米氏常数往往比游离酶的米氏常数高；若载体与底物有一方不带电，则往住表现米氏常数不变.表观米氏常数的减少，对固定化酶的实际应用是有利的，可使反应更为完全。
（6）稳定性普遍增加：主要表现在对热的稳定性；对各种有机溶剂及蛋白质变性剂尿素、盐酸胍的稳定性增加；对蛋白水解酶；贮藏的稳定性也有所提高。稳定性增加有利于酶的应用。
第6题：
简述固定化酶的形状。
正确答案: （1）颗粒状固定化酶；
（2）纤维状固定化酶；
（3）膜状固定化酶；
（4）管状固定化酶；
（5）微囊状固定化酶。
第7题：
与游离酶相比较，固定化酶的性质有哪些变化？
正确答案:（1）酶活性的影响：酶活性下降，反应速率下降；
（2）酶稳定性的影响：操作稳定性提高，贮存稳定性比游离酶大多数提高，热稳定性大多数提高但有些反而降低，对分解酶的稳定性提高，pH稳定性提高明显优于游离酶，对有机溶剂的稳定性提高；
（3）pH的变化：改变酶的空间构象，影响酶的催化基团的解离，影响酶的结合基团的解离，改变底物的解离状态（酶与底物不能结合或结合后不能生成产物）；
（4）最适温度变化：随热稳定性的提高，最适温度随之提高，少数例外最适温度下降，活性或其他因素会改善；
（5）底物特异性变化：专一性会发生不同程度的变化，作用于小分子底物的酶特异性没有明显变化，既可作用于小分子底物又可作用于大分子底物的酶特异性往往会变化；
（6）米氏常数Km的变化，Km值随载体性质变化：Km升高，酶与底物的亲和力降低，带电载体与底物之间的静电作用会引起底物分子在扩散层和整个溶液之间不均一分布。
第8题：
简述固定化酶有哪些优点？
正确答案:（1）可以多次使用，而且在多数情况下，酶的稳定性提高。
（2）反应后，酶和底物和产物易于分开，产物中无残留酶，易于纯化，产品质量高。
（3）反应条件易于控制，可实现转化反应的连续化和自动控制。
（4）酶的利用效率高，单位酶催化的底物量增加，用酶量减少。
（5）比水溶性酶更适合于多酶反应。
第9题：
酶固定化后其性质会发生什么变化？
正确答案:1.酶结构的改变：固定化导致酶的活性中心或调节中心的构象发生变化。
2.微环境的改变：微环境是指在固定化酶附近的局部环境，而把主体溶液称为宏观环境。
3.位阻效应：指载体的遮蔽作用。
4.分配效应：由于载体的亲水和疏水性质使酶的底物、产物或其它效应物在载体和溶液间发生不等分配，改变酶反应系统的组成平衡，从而影响酶反应速度：A.如果载体与底物带相同电荷，则酶的Km值将因固定化而增大；如果带相反电荷，则Km值减小；B.当载体带正电荷时，酶活性-pH曲线向酸性方向偏移；当载体带负电荷时，酶活性-pH曲线向碱性方向偏移；C.如载体是疏水性，底物为极性物质或电荷物质，则酶的Km值将因固定化而降低。
5.扩散限制效应：是指底物或其它效应物的迁移和运转受到限制。
（1）外扩散限制：指底物或其它效应物从溶液穿过包围在固定化酶周围近于停滞的液膜层到固定化酶表面所受到的限制。可通过充分搅拌或混合予以减轻或消除。
（2）内扩散限制：指底物或其它效应物从固定化酶颗粒表面进入颗粒内部酶活性位点的限制。
第10题：
简述固定化细胞发酵产酶的特点。
正确答案:固定化细胞发酵产酶的特点：
A.提高产酶率（细胞密度大）
B.可以反复使用或连续使用较长时间（细胞不易脱落流失）
C.发酵稳定性好（载体的保护）
D.缩短发酵周期，提高设备利用率（预培养）
E.产品容易分离纯化（细胞不溶于水）
F.适用于胞外酶等胞外产物的生产（载体的扩散抑制）