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什么是基因重组？构建基因工程菌的一般流程是什么？

题目

什么是基因重组？构建基因工程菌的一般流程是什么？

参考答案和解析
正确答案:根据人们预先设想，利用酶学的方法，将目的基因重组到一个适宜的载体上，组成重组子，将重组子转化到适当受体细胞中进行扩增表达，以达到改造生物细胞目的的技术。
流程：
目的基因片段的产生和分离；
目的基因片段共价连接到载体上，即体外重组；
体外重组的杂合分子转入合适的宿主；筛选和检测。
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第1题：

基因工程菌


正确答案: 将目的基因导入细菌体内使其表达，产生所需要的蛋白的细菌称为基因工程菌，如：大肠杆菌

第2题：

基因工程菌的构建包括（）、（）、（）三个主要环节。


正确答案:目标基因的获得；最佳表达载体的构建；工程菌构建

第3题：

重组DNA基本过程包括


A.目的基因的获取
B.克隆载体的构建
C.目的基因与载体的拼接
D.重组分子导入受体菌

答案：A,B,C,D
解析：

第4题：

下列有关基因工程技术的应用中，对人类不利的是（）

  • A、制造“工程菌”用于药品生产
  • B、创造“超级菌”分解石油、DDT
  • C、重组DNA诱发受体细胞基因突变
  • D、导人外源基因替换缺陷基因

正确答案:C

第5题：

什么是基因工程菌，工程菌构建的基本过程和各阶段的主要任务是什么，所涉及基因工程原理是什么？ 


正确答案: 将目的基因导入细菌体内使其表达，产生所需要的蛋白的细菌称为基因工程菌。
工程菌构建的基本过程如下：目标基因克隆（PCR、文库筛选、化学合成）→表达载体构建（酶切、链接）→遗传转化与筛选（外源基因导入与培养）→工程菌（获得新形状、功能、产生物质）
酶切：在特异位点上催化双链DNA分子的断裂，产生相应的限制性片段。（DNA+缓冲液+限制性内切酶；37℃，1小时；加热、加EDTA终止；电泳检查酶切完整性）
链接：DNA双链上相邻的3’羟基和5’磷酸基团共价结合形成3’-5’磷酸二酯键，使原来断开的DNA缺口重新连接起来。（载体片段和基因片段，缓冲液，连接酶；16-26℃，数小时；70℃加热10min终止反应）
转化：把外源基因导入宿主细胞的过程。（氯化钙法向大肠杆菌导入外源基因）

第6题：

简述基因工程菌的构建过程？


正确答案:1.目的基因的获取
获取目的基因是实施基因工程的第一步。
目的基因的获取方法主要有两种：
①从自然界中已有的物种中分离出来
②用人工的方法合成。
2.PCR技术扩增目的基因
3. 基因表达载体的构建
基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因
4.将目的基因导入受体细胞
5.目的基因的监测与鉴定

第7题：

简述构建基因工程菌的一般过程。


正确答案: 1、目的基因的获取
2、PCR技术扩增目的基因
3、基因表达载体的构建
4、将目的基因导入受体细胞
5、目的基因的检测与鉴定

第8题：

重组DNA技术中，目的基因的获取方法不包括（）

  • A、通过PCR合成
  • B、化学直接合成
  • C、构建cDNA文库
  • D、构建基因组文库
  • E、从基因组DNA中直接提取

正确答案:E

第9题：

DNA重组技术是将目的DNA在体外重组于载体DNA分子上，构建成重组DNA分子，然后将重组DNA导入宿主细胞中进行大量扩增，最终获得大量同一目的DNA片段。DNA重组技术的应用不包括（）

  • A、基因诊断
  • B、基因治疗
  • C、转基因和基因敲除
  • D、单克隆抗体制备
  • E、基因工程药物、疫苗和抗体

正确答案:D

第10题：

外源基因表达的基本流程是（）。 ①重组表达载体导入宿主细胞； ②目的基因的获得； ③重组表达载体的筛选与认； ④目的基因与载体的重组； ⑤目的基因的表达。

  • A、②④①③⑤
  • B、①②④③⑤
  • C、②④③①⑤
  • D、④②①③⑤

正确答案:A

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