生物工程

凝胶色谱的()是指,能为凝胶阻滞并且相互之间可以得到分离的溶质的相对分子质量范围。

题目

凝胶色谱的()是指,能为凝胶阻滞并且相互之间可以得到分离的溶质的相对分子质量范围。

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第1题:

对凝胶色谱的叙述不正确的是

A、凝胶色谱又称作分子筛

B、适合分离蛋白质

C、常以吸水量大小决定凝胶分离范围

D、凝胶吸水量小时,用于分离分子量较小的物质

E、大分子被阻滞,流动慢;小分子化合物阻滞小,流动快,故先于大分子被洗脱流出


参考答案:E

第2题:

简答凝胶色谱柱分离主要步骤及操作。


正确答案: (1)凝胶的预处理
市售凝胶必须经过充分溶涨后才能使用,在烧杯中将干燥凝胶加水或缓冲液,搅拌、静置、倾去上层混悬液、除去过细的粒子。如此反复多次,直至上层澄清为止。
(2)层析柱的选择
层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度。
(3)凝胶柱的装填
进胶过程必须连续、均匀,不要中断,并在不断搅拌下使胶均匀沉降。
(4)样品处理和加样
分离蛋白质样品的体积为凝胶床的1-4%一般约0.5-2ml,在蛋白质溶液除盐时,样品可达凝胶床的20-30%;分级分离样品体积要小,使样品层尽可能窄,洗脱出的峰形较好。加样时尽量减少样品的稀释及凝胶床面的搅动。
(5)洗脱与收集
整个洗脱过程中始终保持一定的操作压。流速不宜太快且要稳定。

第3题:

凝胶层是利用分离物质的分子大小进行分离,较快通过凝胶柱的是

A.大的溶质分子

B.带电荷的分子

C.形态不规则的分子

D.小的溶质分子

E.亲和力较小的分子


正确答案:A
凝胶层析又称凝胶过滤,是一种按分子量大小分离物质的层析方法。该方法是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中,然后用缓冲液洗脱。大分子不能进入凝胶颗粒中的静止相中,只留在凝胶颗粒之间的流动相中,因此以较快的速度首先流出层析柱,而小分子则能自由出入凝胶颗粒中,并很快在流动相和静止相之间形成动态平衡,因此就要花费较长的时间流经柱床,从而使不同大小的分子得以分离。

第4题:

吸简述附色谱、离子交换色谱、凝胶色谱的分离原理。


正确答案:吸附色谱:吸附能,氢键
离子交换色谱:库仑力 凝
胶色谱:溶质分子大小

第5题:

对于凝胶柱色谱法,下列说法正确的是()

  • A、凡是多孔性物质都可用于凝胶柱色谱作固定相
  • B、凝胶柱色谱法的分离效果取决于凝胶孔径的大小和被分离组分分子的大小
  • C、被分离组分分子越小,越容易通过凝胶柱,柱内保留时间越短
  • D、凝胶色谱法按分离原理不同可分为凝胶渗透色谱法和凝胶过滤色谱法

正确答案:B

第6题:

凝胶过滤层析是利用被分离物质的分子大小进行分离。通过凝胶柱较慢的是

A、大的溶质分子

B、小的溶质分子

C、带电荷的分子

D、形态不规则的分子

E、形态规则的分子


参考答案:B

第7题:

各种色谱分离(共价、聚焦色层分离、凝胶过滤、亲和)的机理是什么?


正确答案:(1)共价作用色层分离法:是利用溶质分子与层析剂凝胶之间的共价吸附作用将目的产物与其他溶质分子分离开来的一种层析方法。首先要制备层析剂,具有共价反应活性的二硫键层析剂可用葡聚糖凝胶或琼脂糖胶作材料制得,有谷胱甘型二硫键层析剂和巯基丙基型二硫键层析剂等。
(2)聚焦色层分离法:利用蛋白质分子或其他两性分子等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性的pH梯度中进行蛋白质的分离纯化。两性物质如蛋白质等混合物上好样后,用洗脱缓冲液淋洗,蛋白质随其下移至各自的等电点聚焦,移动速度明显减缓,最后按等电点顺序流出柱外。
(3)凝胶色谱:以凝胶为固定相,根据各物质分子大小不同而进行分离的色谱技术,因而又称为分子筛色谱、空间排阻色谱或尺寸排阻色谱。凝胶是一种不带电荷的具有三维空间的多孔网状结构的物质,凝胶每个颗粒的微细结构如一个筛子。
(4)亲和色谱作为色谱分离的一个分支,对生物大分子化合物的分离纯化具有特别重要的意义。众所周知,生物体中许多大分子化合物具有与其结构相对应的专一分子可逆结合的特性。把与目的产物有特异亲和力的生物分子固定化后作为固定相,当含有目的产物的混合物(流动相)流经此固定相时,即可把目的产物从混合物中分离出来。

第8题:

凝胶层析是利用被分离物质的分子大小进行分离。较快通过凝胶柱的是

A.大的溶质分子

B.带电荷的分子

C.形态不规则的分子

D.小的溶质分子

E.亲和力较小的分子


正确答案:A
[答案] A

第9题:

分离在水中可以离子化的化合物可采用()

  • A、吸附色谱
  • B、离子交换色谱
  • C、正相分配色谱
  • D、聚酰胺色谱
  • E、凝胶色谱

正确答案:B

第10题:

凝胶色谱的分离原理及分类。


正确答案: 1.葡聚糖凝胶
2.琼脂糖凝胶

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