生物工程
简述SDS－PAGE电泳测定未知蛋白分子量的方法。
题目
简述SDS－PAGE电泳测定未知蛋白分子量的方法。
参考答案和解析
正确答案:以不同的标准分子量蛋白MARK，与未知蛋白样品一同进行SDS－PAGE电泳。染色后分别计算未知蛋白、标准分子量蛋白MARK的迁移率，然后根据标准分子量蛋白MARK迁移率与其分子量的对数值作图，可得一标准曲线并拟合方程。将未知蛋白迁移率代入拟合方程，求出未知蛋白的分子量。
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相似问题和答案
第1题：
特别适用于分子量相同而电荷不同的蛋白质分离的电泳技术为
A、醋酸纤维薄膜电泳
B、琼脂糖凝胶电泳
C、等点聚焦电泳
D、转移电泳
E、SDS-PAGE
参考答案：C
第2题：
SDS-PAGE测定蛋白分子量的原理是什么？
正确答案:原理：SDS与蛋白质的结合是按重量成比例的，因此在进行电泳时，蛋白质分子的迁移速度取决于分子大小。当相对分子质量在1.5*104～2*105之间时，蛋白质的迁移率和相对分子质量的对数呈线性关系。
第3题：
能测定蛋白质分子量的电泳技术为
A、醋酸纤维薄膜电泳
B、琼脂糖凝胶电泳
C、滤纸电泳
D、等点聚焦电泳
E、SDS-PAGE
正确答案：E
答案解析：能测定蛋白质分子量的电泳技术为SDS-PAGE
答案解析：能测定蛋白质分子量的电泳技术为SDS-PAGE
第4题：
测定一个蛋白质分子量时，不常用的方法是（）。
- A、超速离心
- B、电泳
- C、层析
- D、X-光衍射
正确答案:D
第5题：
可用于测定蛋白质分子量的电泳是（）
- A、醋纤膜电泳
- B、PAGE
- C、SDS-PAGE
- D、等电聚焦电泳
- E、琼脂糖电泳
正确答案:C
第6题：
能测定蛋白质分子量的电泳技术是
A:醋酸纤维薄膜电泳
B:琼脂糖凝胶电泳
C:火箭免疫电泳
D:免疫固定电泳
E:SDS-PAGE
B:琼脂糖凝胶电泳
C:火箭免疫电泳
D:免疫固定电泳
E:SDS-PAGE
答案：E
解析：
在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS)，大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合，蛋白质结合SDS复合物都带上相同密度的负电荷，它的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而消除了蛋白质原有的电荷差别，使蛋白质分子电泳的迁移率主要取决于本身的分子量，而与蛋白质所带的电荷无关，在一定条件下，蛋白质的分子量的对数与电泳迁移率间呈负相关。
第7题：
下列测定蛋白质分子量的方法中，哪一种不常用（）。
- A、SDS-PAGE法
- B、渗透压法
- C、超离心法
- D、凝胶过滤（分子筛）法
正确答案:B
第8题：
用于测定蛋白质分子量的电泳法是（ ）。
正确答案：E
本组题考查电泳法在蛋白质分析中的应用。电泳法中，纸电泳法、醋酸纤维素薄膜电泳法、琼脂糖凝胶电泳法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法用来测定含量，其中醋酸纤维素薄膜电泳法主要用来测量相对百分含量，SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法则用来测定蛋白质分子量。
本组题考查电泳法在蛋白质分析中的应用。电泳法中，纸电泳法、醋酸纤维素薄膜电泳法、琼脂糖凝胶电泳法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法用来测定含量，其中醋酸纤维素薄膜电泳法主要用来测量相对百分含量，SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法则用来测定蛋白质分子量。
第9题：
可用来测定蛋白质分子量的方法是（）
- A、双缩脲比色法
- B、SDS-PAGE电泳法
- C、考马斯亮蓝比色法
- D、邻苯三酚红比色法
- E、磺柳酸比浊法
正确答案:B
第10题：
结合SDSPAGE电泳的分离原理说明未知蛋白质分子量的测定方法。
正确答案: 1.SDS-PAGE的原理：SDS是一种阴离子去污剂，作为变性剂和助溶性试剂，能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二级、三级结构；而强还原剂，如二硫苏糖醇、β-巯基乙醇能使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂。因此，在样品和凝胶中加入SDS和还原剂后，蛋白质分子被解聚为组成它们的多肽链，解聚后的氨基酸侧链与SDS结合后，形成带负电的蛋白质-SDS胶束，所带电荷远远超过了蛋白质原有的电荷量，消除了不同分子间的电荷差异；同时，蛋白质-SDS聚合体的形状也基本相同，这就消除了在电泳过程中分子形状对迁移率的影响。
2.未知蛋白质分子量的测定：基于上述SDS-PAGE的原理介绍，我们可以利用SDS-PAGE电泳进行未知蛋白质的分子量测定；以不同分子量的标准蛋白进行SDS-PAGE电泳得到不同标准蛋白的电泳迁移率，制作标准校正曲线，然后对未知蛋白在相同条件下进行SDS-PAGE电泳，测定迁移率，从标准曲线得到相应的分子量；