分子诊断学
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相似问题和答案
第1题：
载体的功能是（）。
- A、外源基因进入受体的搭载工具
- B、不能为外源基因提供整合能力
- C、不能提供复制能力
- D、不能为外源基因提供表达能力
正确答案:D
第2题：
提高外源基因在大肠杆菌中表达水平的措施有（）。
- A、调整SD序列与ATG之间的距离
- B、用点突变的方法改变起始密码子下游的几个密码子
- C、增加mRNA的稳定性
- D、使细菌的生长与外源基因的表达分开
- E、提高表达蛋白的稳定性
正确答案:A,B,C,D,E
第3题：
为了减轻工程菌代谢负荷,提高外源基因表达水平可采取什么措施?
参考答案：将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段。
第4题：
如何提高转基因的表达水平。
正确答案: 实现外源基因高效表达的种种途径包括：启动子的选择和改造；目的基因的改造；构建含有核基质结合区的表达载体；建立位点特异重组体系；利用细胞器定位信号和采用叶绿体进行转化等。
1.启动子是决定外源基因转录效率的关键因素，选择合适的启动子对于增强外源基因的表达量至关重要。
2.对于微生物或动物来源的基因由于表达机制的不同，在高等植物中往往表达效果不理想，这时如果在不改变氨基酸序列的前提下通过人工改造或重新合成，使之适于在植物体内表达，就可以大大提高有效蛋白的表达量。
3.目前，采用基因枪或农杆菌法导入的外源基因在宿主染色体上的整合大多是随机发生的，如外源基因整合在转录活跃的常染色质可能得到较好的表达。但高等植物的绝大多数细胞在特定阶段有90%以上的基因在转录上是不活跃的，插入到这部分染色质区的转基因其表达活性则会大大下降，甚至出现沉默。这时如果我们能建立位点特异的重组系统则可克服这一难题。
外源基因在植物组织细胞中表达时，其表达产物受细胞中大量蛋白酶的作用而降解，造成外源蛋白积累量的减少。因此，采取措施保护外源蛋白不受降解是实现转基因成功的重要一环。以植物抗虫基因工程为例，增加外源抗虫物质在植物细胞内的稳定性可有效提高转基因植物的抗虫效果。
4.叶绿体基因拷贝数大，为实现外源基因的超量表达提供了前提；可以定点整合方式导入外源基因从而消除位置效应和转基因沉默；具原核表达方式，可直接表达来自于原核生物的基因，且能以多顺反子的形式表达多个基因。这些都使叶绿体转化系统极具提高转基因表达的潜能。
第5题：
利用基因动物作为外源基因的表达系统与体外细胞表达系统相比有什么优点？
正确答案: 在体外细胞表达系统中基因产物的产量通常较低，特别是跨膜蛋白，因为它在转染细胞的膜上积累，从而妨碍蛋白的进一步积累，而在乳液分泌中，乳腺细胞中合成的脂被质膜包在囊内，然后一起以球状颗粒的形式分泌到乳液中。利用这一原理，蛋白质的产量提高，而且浓缩纯化也更加容易。
第6题：
转基因植物中外源基因的存在问题：外源基因在后代中的遗传多样性和外源基因在后代中表达的（）。
正确答案:不确定性
第7题：
真核细胞表达外源基因的条件是什么？
正确答案: 1、首先必须具备哺乳动物细胞表达的功能元件。要求哺乳动物细胞表达载体带有能在真核细胞中表达外源基因的真核转录调控元件；
2、注意选择转染的受体细胞，不同类型的细胞具有不同的特性；
3、注意选择适当的选择标记。
第8题：
外源基因的瞬时表达
正确答案:外源基因的瞬时表达是指转化的外源基因通常在数小时后就能检测到其表达的产物，即检测到新合成的蛋白质或酶的活性，并在1～2天内达到最高价，随后又逐渐降低，到十多天后完全消失。
第9题：
为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有（）
- A、将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段。
- B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达。
- C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的复制。
- D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制
正确答案:A,C
第10题：
如何有效地提高外源基因的表达效率？
正确答案: ⑴提高启动子强度
⑵缩短启动子同克隆基因间距离
⑶高效的翻译起始序列
⑷高效的转录终止区
⑸提高质粒拷贝数及稳定性
⑹用以下方法提高翻译水平：
①调整SD序列与AUG间的距离
②用点突变的方法改变某些碱基
③增加mRNA的稳定性的
⑺减轻细胞的代谢负荷：
①诱导表达
②表达载体的诱导复制
⑻提高表达蛋白的稳定性，防止其降解：
①克隆一段原核序列，表达融合蛋白
②采用某种突变菌株
③表达分泌蛋白质