工学
问答题试述凝胶层析、亲和层析、离子交换层析的原理和操作要点。
题目
参考答案和解析
①随着溶液流动而进行的垂直向下的移动
②无定向的分子扩散运动（布朗运动）。大分子物质由于直径大，不能进入凝胶的微孔，只能分布于凝胶颗粒的间隙中，以较快的速度流过凝胶柱。较小的分子能进入凝胶微孔内，使小分子物质向下移动的速度比大分子的慢，从而使混合液中各组分按照相对分子质量由大到小的顺序先后流出层析柱，达到分离的目的。操作过程一般包括装柱、上柱、洗脱等过程。
（2）亲和层析：原理：亲和层析是利用生物分子与配基之间所具有的的可逆的亲和力，使生物分子分离纯化的层析技术。当酶液流经亲和层析试剂时，酶分子与其配基分子结合留在柱内，而其他杂质不与配基结合，可洗涤流出，然后用适当的洗脱液进行洗脱，达到酶的分离纯化。方法：分子对亲和层析、免疫亲和层析、共价亲和层析、疏水层析、金属离子亲和层析、染料亲和层析、凝集素亲和层析。
（3）离子交换层析：原理：离子交换层析是用离子交换剂上的可解离基团（活性基团）对各种离子的亲和力不同而达到分离目的的一种层析方法。离子交换剂是含有若干活性基因的不溶性高分子物质，通过在不溶性高分子物质（母体）上引入若干可解离基团（活性基团）而制成。带电量小，亲和力小的先被洗脱下来，带电量多，亲和力大的后被洗脱下来。操作过程一般包括：装柱、上柱、洗脱和收集、再生。
相似问题和答案
第1题：
目前，分析氨基酸的常用的方法有自动分析法、化学分析法、酶法测定、纸层析和薄层色谱等。用于蛋白质中氨基酸组分的分析方法是A、凝胶层析
B、离子交换层析
C、亲和层析
D、圆二色性技术
E、免疫比浊法
可用于蛋白质分子量测定的是A、凝胶层析
B、离子交换层析
C、亲和层析
D、圆二色性技术
E、免疫比浊法
蛋白质经浓盐酸水解后，可测定其氨基酸顺序的方法是A、凝胶层析
B、离子交换层析
C、亲和层析
D、圆二色性技术
E、免疫比浊法
问题 2 答案：C
问题 3 答案：E
第2题：
γ球蛋白粗提的最简便方法是
A、盐析法
B、有机溶剂沉淀法
C、凝胶层析法
D、离子交换层析法
E、亲和层析法
第3题：
粗提免疫球蛋白的技术是A.选择性沉淀（盐析）
B.凝胶过滤层析
C.离子交换层析
D.亲和层析
E.超速离心
应用DEAE纤维素提取IgG属于A.选择性沉淀（盐析）
B.凝胶过滤层析
C.离子交换层析
D.亲和层析
E.超速离心
应用SPA-sepharose4B提取IgG属于A.选择性沉淀（盐析）
B.凝胶过滤层析
C.离子交换层析
D.亲和层析
E.超速离心
请帮忙给出每个问题的正确答案和分析，谢谢！
饱和硫酸铵盐析可用于粗提免疫球蛋白。
问题 2 答案解析：C
DEAE为离子交换树脂，提取IgG属于离子交换层析。
问题 3 答案解析：D
SPA可与IgG结合，用于提取IgG属于亲和层析。
第4题：
B.离子交换层析
C.亲和层析
D.元二色性技术
E.免疫浊度法
第5题：
抗AFP-sepharose4B提取AFP的技术属于A.选择性沉淀(盐析)
B.凝胶过滤层析
C.离子交换层析
D.亲和层析
E.超速离心
粗提免疫球蛋白的技术属于A.选择性沉淀(盐析)
B.凝胶过滤层析
C.离子交换层析
D.亲和层析
E.超速离心
应用DEAE纤维素提取IgG的技术属于A.选择性沉淀(盐析)
B.凝胶过滤层析
C.离子交换层析
D.亲和层析
E.超速离心
应用SPA-sepharose4B提取IgG的技术属于A.选择性沉淀(盐析)
B.凝胶过滤层析
C.离子交换层析
D.亲和层析
E.超速离心
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问题 2 答案解析：A
问题 3 答案解析：C
问题 4 答案解析：D
第6题：
依据分子大小不同而进行的层析法是
A、吸附层析
B、分配层析
C、离子交换层析
D、凝胶过滤层析
E、亲和层析
第7题：
用于纯化酶和受体蛋白的最好方法是 ( )
A、盐析法
B、亲和层析
C、凝胶层析
D、离子交换层析
E、有机溶剂沉淀法
第8题：
最有效的McAb纯化方法是
A、盐析法
B、有机溶剂沉淀法
C、凝胶层析法
D、亲和层析法
E、离子交换层析法
第9题：
层析技术按原理分为
A、凝胶层析
B、离子交换层析
C、高效液相层析
D、气相层析
E、亲和层析
第10题：
B.阳离子交换层析
C.凝胶过滤
D.亲和层析
E.透析