工学
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相似问题和答案
第1题：
简述沉淀法测定高密度脂蛋白胆固醇的原理。
正确答案: 运用沉淀法将高密度脂蛋白（HDL）与低密度脂蛋白（LDL）和极低密度脂蛋白（VLDL）分开，然后测定HDL中的胆固醇含量。其原理是根据LDL及VLDL中的载脂蛋白B（ApoB.含有较多的碱性氨基酸，在二价阳离子存在下可与多聚阴离子形成复合物。目前多聚阴离子和二价阳离子用于分离沉淀LDL和VLDL的试剂种类较多，其中有肝素-锰（Mn2+）、肝素-钙（Ca2+）、肝素-Ca-镍（Ni2+）、硫酸葡聚糖-镁（Mg2+）、硫酸葡聚糖-Ca2+等。也有用聚乙烯醇（PEG）及伴刀豆球蛋白（ConA.作为LDL和VLDL的分离沉淀剂。现在的自动分析仪多采用不需沉淀的直接一步法。
第2题：
简述有机溶剂沉淀法中有机溶剂的选择要求。
正确答案: 1.溶剂的选择要求：
（1）介电常数小。
（2）对生物分子变性小。
（3）毒性小、挥发性适中。
（4）能与水无限混溶。
2.常用的溶剂：
乙醇：具有上述的特点；
丙酮：沉淀作用大于乙醇，时可减少1／4～1／3，但是沸点比乙醇低，对肝脏有一定的毒害作用。着火点低；
甲醇：沉淀作用与乙醇相当，但对蛋白质的变性作用比乙醇、丙酮小，由于口服毒性大，限制其使用；
其他：二甲基亚砜、乙睛、二甲基甲酰胺。
第3题：
蛋白质免疫原所用的沉淀法包括 ( )
A、盐析法
B、高分子聚合物沉淀法
C、有机溶剂沉淀法
D、核酸沉淀法
E、醋酸沉淀法
参考答案：ABCD
第4题：
有机溶剂沉淀法原理是什么？
正确答案: 加入有机溶剂于蛋白质溶液中可产生多种效应，这些效应结合起来，使蛋白质沉淀。
①有机溶剂，使溶液介电常数降低，蛋白质、核酸、多糖等带溶质间静电引力增大，从而相互吸引、聚集而沉淀。
②有机溶剂减小水的极性，使两性溶质在溶液中的溶解度降低。
③由于有机溶剂的水合作用，降低了自由水的浓度，从而降低了亲水溶质表面水化层的厚度和溶质的亲水性，导致脱水凝聚。
④极性有机溶剂破坏溶质的某种键（如氢键），使其空间结构发生变形，使原来包在内部的疏水基团结合形成疏水层。
第5题：
简述有机溶剂沉淀的原理。
正确答案: 有机溶剂沉淀的原理：
①亲水性有机溶剂加入溶液后降低了介质的介电常数，使溶质分子之间的静电引力增加，聚集形成沉淀；
②水溶性有机溶剂的水合作用降低了自由水的浓度，压缩了亲水溶质分子表面原有水化层的厚度，降低了它的亲水性，导致脱水凝集。
第6题：
什么是沉淀法，简述沉淀蛋白质的几种主要方法的原理及应用。
正确答案:沉淀法：利用某种试剂使生物大分子沉淀，但不影响大分子结构的方法。
主要方法：
（1）中性盐沉淀（盐析法）：中性盐的亲水性大于蛋白质和酶分子的亲水性，所以在加入大量中性盐后，其夺走了水分子，破坏了水膜。同时又中和了电荷，破坏亲水胶体，蛋白质分子即形成沉淀。
应用：除了蛋白质和酶以外，多肽、多糖和核酸等都可以用盐析法进行沉淀分离。盐析法应用最广的还是在蛋白质领域。
（2）有机溶剂沉淀法：降低了水溶液的介电常数，减小了溶剂的极性。同时削弱了溶剂分子与蛋白质分子间的相互作用，从而导致蛋白质溶解度降低而沉淀。除此以外，使带电溶质分子更易互相吸引而凝集，破坏了蛋白质的水化膜，从而发生沉淀。
应用：生化制备。
（3）选择性变性沉淀法：利用蛋白质、酶与核酸等生物大分子与非目的生物大分子在物理化学性质等方面的差异，选择一定的条件使杂蛋白等非目的物质变性沉淀而得到提纯，称为选择性变性沉淀法。
应用：通常用于生物大分子分离纯化的初期，是分离纯化流程中附带进行的一个分离纯化步骤。
（4）等电点沉淀法：等电点沉淀法是利用具有不同等电点的两性电解质在达到电中性时溶解度最低，易发生沉淀，从而实现分离的方法。
应用：此法主要用于在分离纯化流程中去除杂蛋白，而不用于沉淀目的物。
（5）有机聚合物沉淀
第7题：
简述有机溶剂沉析的原理。
正确答案: 1.降低了溶质的介电常数，使溶质之间的静电引力增加，从而出现聚集现象，导致沉淀。
2.由于有机溶剂的水合作用，降低了自由水的浓度，降低了亲水溶质表面水化层的厚度，降低了亲水性，导致脱水凝聚。
乙醇：沉析作用强，挥发性适中，无毒常用于蛋白质、核酸、多糖等生物大分子的沉析；
丙酮：沉析作用更强，用量省，但毒性大，应用范围不广；
特点：
（1）介电常数小，60%乙醇的介电常数是48，丙酮的介电常数是22
（2）容易获取
第8题：
有机溶剂沉淀法中使用的有机溶剂多为甲醛或丙酮。（ ）
正确答案:错误
第9题：
简述有机溶剂沉淀法的原理。
正确答案: ①有机溶剂，使溶液介电常数降低，蛋白质、核酸、多糖等带溶质间静电引力增大，从而相互吸引、聚集而沉淀。
②有机溶剂减小水的极性，使两性溶质在溶液中的溶解度降低。
③由于有机溶剂的水合作用，降低了自由水的浓度，从而降低了亲水溶质表面水化层的厚度和溶质的亲水性，导致脱水凝聚。
④极性有机溶剂破坏溶质的某种键（如氢键），使其空间结构发生变形，使原来包在内部的疏水基团结合形成疏水层。
第10题：
简要说明有机溶剂沉淀法的基本原理
正确答案: 降低水溶液的介电常数，增加蛋白质不同电荷之间的静电引力，使蛋白质产生沉淀；
有机溶剂与水作用使蛋白质的表面水化层厚度压缩，导致蛋白质脱水，蛋白质间的疏水作用增强，从而产生沉淀。