工学
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相似问题和答案
第1题：
分离结构异构体，最适当的选择是（）。
- A、吸附色谱
- B、反相离子对色谱
- C、亲和色谱
- D、空间排阻色谱
正确答案:A
第2题：
从亲和沉淀的机理和分离操作的角度出发，简述亲和沉淀纯化技术的优点。
正确答案: 从亲和沉淀的机理和分离操作的角度可以看出，亲和沉淀纯化技术具有如下优点：
1）配基与目标分子的亲和结合作用在自由溶液中进行，无扩散传质阻力，亲和结合速度快；
2）亲和配基裸露在溶液之中，可更有效的结合目标分子，即亲和沉淀的配基利用率高；
3）利用成熟的离心或过滤技术回收沉淀，易于规模放大；
4）亲和沉析法可用于高粘度或含微粒的料液中目标产物的纯化，因此可在分离操作的较初期采用，有利于减少分离操作步骤，降低成本。
同时，在分离过程的早期阶段除去对目标产物有毒的杂质（如蛋白酶），有利于提高目标产物质量和收率。
第3题：
分离生物大分子常用到的色谱包括
A．离子交换色谱
B．亲和色谱
C．排阻色谱
D．吸附色谱
正确答案：ACD
第4题：
亲和色谱的应用有哪些方面？
正确答案: 1.t-PA的纯化—酶的抑制剂为亲和配基
2.干扰素的纯化—免疫亲和色谱
3.脱氢酶的纯化—色素亲和色谱
4.淀粉酶抑制剂的纯化—固定化金属离子亲和色谱
5.基因重组融合蛋白的纯化
第5题：
除亲和色谱外，其他亲和分离技术有哪些？
正确答案: 亲和错流过滤、亲和双水相分配、亲和反胶团萃取、亲和沉淀。
第6题：
色谱按分离原理分（）。
- A、吸附色谱
- B、凝胶色谱
- C、分配色谱
- D、离子交换色谱
- E、生物亲和色谱
正确答案:C,D
第7题：
亲和力大小除由亲和对本身的（）决定外，还受许多因素的影响，其中包括亲和吸附剂（）、（）、（）、（）、（）等。
正确答案:解离常数；微环境；载体空间位阻；载体孔径；配基和配体的浓度；配基结构
第8题：
各种色谱分离（共价、聚焦色层分离、凝胶过滤、亲和）的机理是什么？
正确答案:（1）共价作用色层分离法：是利用溶质分子与层析剂凝胶之间的共价吸附作用将目的产物与其他溶质分子分离开来的一种层析方法。首先要制备层析剂，具有共价反应活性的二硫键层析剂可用葡聚糖凝胶或琼脂糖胶作材料制得，有谷胱甘型二硫键层析剂和巯基丙基型二硫键层析剂等。
（2）聚焦色层分离法：利用蛋白质分子或其他两性分子等电点的不同，在一个稳定的、连续的、线性的pH梯度中进行蛋白质的分离纯化。两性物质如蛋白质等混合物上好样后，用洗脱缓冲液淋洗，蛋白质随其下移至各自的等电点聚焦，移动速度明显减缓，最后按等电点顺序流出柱外。
（3）凝胶色谱：以凝胶为固定相，根据各物质分子大小不同而进行分离的色谱技术，因而又称为分子筛色谱、空间排阻色谱或尺寸排阻色谱。凝胶是一种不带电荷的具有三维空间的多孔网状结构的物质，凝胶每个颗粒的微细结构如一个筛子。
（4）亲和色谱作为色谱分离的一个分支，对生物大分子化合物的分离纯化具有特别重要的意义。众所周知，生物体中许多大分子化合物具有与其结构相对应的专一分子可逆结合的特性。把与目的产物有特异亲和力的生物分子固定化后作为固定相，当含有目的产物的混合物（流动相）流经此固定相时，即可把目的产物从混合物中分离出来。
第9题：
亲和色谱的配基有哪些？
正确答案: ①酶的抑制剂
②抗体
③A蛋白
④凝集素
⑤辅酶和磷酸腺苷
⑥色素配基
⑦过渡金属离子
⑧组氨酸
⑨肝素
第10题：
何谓亲和色层分离法？亲和力的本质是什么？亲和色层中常用的亲和关系有哪几种？
正确答案: （1）利用生物分子间的这种特异性结合作用的原理进行生物物质分离纯化的技术称为亲和纯化技术（Affinitypurification）。亲和层析是利用偶联亲和配基的亲和吸附介质为固定相亲和吸附目标产物，使目标产物得到分离纯
化的液相层析法。
（2）亲和力的本质：
1.静电作用：亲和作用分子对的结合部位上带有相反电荷时，产生静电引力。在中性pH下，蛋白质分子上酸性氨基酸残基可带负电荷，碱性氨基酸残基可带正电荷。此外N末端氨基酸的-氨基带正电，C末端氨基酸的羧基带负电。
2.氢键：如果亲和作用分子对的一方分子中含有氧原子或氮原子，结合部位之间可以产生氢键作用，即形成O···H－O或O···H－N。氢键的产生与否受结合部位之间位置关系的严格制约。
3.疏水性相互作用：如果亲和作用分子对的一方分子上含有芳香环或烃基链等疏水基，另一方的结合部位上也含有疏水区，则两者之间可发生疏水性相互作用。
4.配位键：如果亲和作用分子对均与同一金属原子配位，则两者之间可通过金属配位键间接结合。
5.弱共价键：弱共价键是指结合力较弱的可逆共价键。当亲和作用分子对之间满足形成弱共价键的条件时可能形成弱共价键。
具有亲和作用的分子对之间具有“钥匙”和“锁孔”的空间结构关系。
（3）亲和色层中常用的亲和体系：
特异性
亲和作用体系高特异性
抗原----单克隆抗体
荷尔蒙----受体蛋白
核酸----互补碱基链段、核酸结合蛋白
酶----底物、产物、抑制剂群特异性
免疫球蛋白----A蛋白、G蛋白
酶----辅酶
凝集素----糖、糖蛋白、细胞、细胞表面受体
酶、蛋白质----肝素
酶、蛋白质----活性色素（染料）
酶、蛋白质----过度金属离子
酶、蛋白质----氨基酸（组氨酸等）