医学

填空题在大肠杆菌中,外源基因表达产物的主要形式为()和()。

题目
填空题
在大肠杆菌中,外源基因表达产物的主要形式为()和()。
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第1题:

以大肠杆菌为目的基因表达系统的表达产物,产物位置是什么?


参考答案:胞内、周质、胞外。

第2题:

影响外源基因在大肠杆菌中高效表达的因素有哪些?


答案:
解析:
(1)启动子的强弱(2分);(2)基因的剂量(2分);(3)影响RNA转录和翻译效率的因素:SD序列mRNA(2分);(4)外源基因密码子的选择(2分);(5)表达产物的大小和稳定性(2分,以上五点均需进-步展开)。

第3题:

以大肠杆菌为目的基因的表达体系,下列正确的是:()

A、表达产物为糖基化蛋白质

B、容易培养,产物提纯简单

C、表达产物存在的部位是在菌体内

D、表达产物为天然产物


参考答案:B

第4题:

转基因植物中外源基因的存在问题:外源基因在后代中的遗传多样性和外源基因在后代中表达的()。


正确答案:不确定性

第5题:

试述外源基因表达产物的检测方法。


正确答案: (一)特异性mRNA的检测
N.orthern杂交,即RNA-DNA杂交分析,是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。与Southern杂交类似,检测目的RNA的存在与否及含量。
(二)报告基因的酶法检测
(1)报告基因:其表达产物及其功能在未转化的植物细胞中并不存在;其表达产物便于检测。
(2)目前动物基因工程中使用的报告基因一般是编码酶的基因,主要有:β-葡萄糖苷酸酶基因(GUS基因)、氯霉素乙酰转移酶基因(CAT基因)、胸苷激酶基因(cA)、二氢叶酸还原酶基因(DHFR)等。
(三)免疫学检测
(1)免疫沉淀法
(2)酶联免疫吸附法(ELISA)
E.LISA是一种利用免疫学原理检测抗原、抗体的技术。它与经典的以同位素标记为基础的液-液抗原-抗体反应体系不同之处是建立了固-液抗原-抗体反应体系,并采用酶标记。
抗原或抗体能结合到固相载体的表面仍保持其活性;抗原或抗体与酶交联成酶标抗原或抗体后,仍分别保持其免疫活性和酶活性。酶标抗原或抗体与相应抗体或抗原反应后,结合在免疫复合物上的酶遇到相应的底物时,可以催化底物的水解、氧化或还原,从而产生有色物质。颜色反应的深浅与相应抗体或抗原量相关。
(3)Western印迹法
(4)固相放射免疫(RIA)法
RIA法是一种定量测定外源表达蛋白的方法。该法具有很高的灵敏度,可检测出1pg的靶蛋白。
(四)表达产物的生物学活性检测
当外源基因的表达产物是一种酶蛋白时,可根据酶的催化反应来确定外源基因的表达与否和表达的程度。常见的有:淀粉酶、碱性磷酸酶、脂肪酶等。

第6题:

不适合在大肠杆菌中表达的外源基因是

A.真核cDNA

B.真核基因组DNA

C.质粒DNA

D.M13噬菌体DNA


正确答案:B

第7题:

基因文库中的所有基因

A.都可以在大肠杆菌中正确表达
B.不能用真核细胞表达
C.只有cDNA文库中的基因可用大肠杆菌表达
D.只有基因组文库中的基因可用大肠杆菌表达

答案:C
解析:

第8题:

真核基因在大肠杆菌中以什么形式表达?


参考答案:融合蛋白。

第9题:

下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应关系中,错误的是()

  • A、大肠杆菌-繁殖迅速
  • B、枯草杆菌-分泌机制健全
  • C、链霉菌-遗传稳定
  • D、酵母菌-表达产物具有真核性

正确答案:C

第10题:

在大肠杆菌中,外源基因表达产物的主要形式为()和()。


正确答案:可溶性蛋白;不溶性蛋白