医学

单选题构建基因组文库时需要()。A 核酸外切酶B DNA酶C RNA酶D RNA聚合酶E 限制性核酸内切酶

题目
单选题
构建基因组文库时需要()。
A

核酸外切酶

B

DNA酶

C

RNA酶

D

RNA聚合酶

E

限制性核酸内切酶

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第1题:

构建基因组DNA文库时,首先需分离细胞的( )。

A.染色体DNA
B.线粒体DNA
C.总mRNA
D.rRNA
E.tRNA

答案:A
解析:

第2题:

简述基因组文库构建的基本操作?


正确答案:①载体DNA的制备;
②基因组DNA的提取;
③基因组DNA的部分酶切、分离与回收;
④载体与外源片段的连接与转化或侵染宿主细胞;
⑤重组克隆的挑选和保存。

第3题:

以下关于cDNA文库和基因组文库的关系说法正确的是()

A、cDNA文库比基因组文库大

B、cDNA文库比基因组文库小

C、cDNA文库和基因组文库一样大

D、二者大小随机,不能比较


参考答案:B

第4题:

请设计试验,构建理想的小鼠基因组文库。


正确答案:一、分离纯化基因组DNA。用小鼠的肝脏来提取DNA:
①取适量的新鲜肝脏制备组织匀浆。
②加入细胞裂解液使细胞充分的裂解。
③加入蛋白酶K消化细胞,注意混匀但是不能太剧烈以免DNA断裂。
④加氯仿去除蛋白质。混匀后离心后,分三层上层是DNA,这一步吸取上层时最好用剪过的枪头避免吸入蛋白质等杂质。
⑤加入异丙醇出现絮状物,离心去除上清液,加入氯化钠溶解沉淀,加入RNA酶去除RNA。
⑥乙醇洗涤DNA沉淀,并用TE缓冲液溶解。
⑦琼脂糖电泳检测DNA的质量。
二、切割DNA成合适的片段以用于克隆。将DNA切割成大小为4~10kb的片段。
三、载体DNA的制备。用λ噬菌体载体。载体用Sau3A酶解,用氯化铯密度梯度离心。
四、基因组DNA与载体连接。连接反应中要考虑两个因素,即噬菌体两臂DNA插入片段的比例和反应混合液中DNA的浓度。
五、利用体外包装系统将多联体组装成完整的颗粒。
六、重组载体转化受体感受态细胞
七、扩增DNA文库。大肠杆菌的液体培养基的培养。
八、基因组文库的鉴定。

第5题:

构建基因组文库时需要()。

  • A、限制性核酸内切酶
  • B、核酸外切酶
  • C、RNA聚合酶
  • D、DNA酶

正确答案:A

第6题:

基因组文库和cDNA文库区别相比,基因组文库所含基因()

  • A、种类较多
  • B、无内含子
  • C、无启动子
  • D、在不同物种间不能交流

正确答案:A

第7题:

重组DNA技术中,目的基因的获取方法不包括()

  • A、通过PCR合成
  • B、化学直接合成
  • C、构建cDNA文库
  • D、构建基因组文库
  • E、从基因组DNA中直接提取

正确答案:E

第8题:

cDNA文库在理论上


A.就是基因组文库
B.与基因组文库序列不同
C.包含了某一细胞在某一时期表达的全部遗传信息
D.包含的DNA序列比基因组文库少

答案:B,C,D
解析:

第9题:

构建基因组文库最常用的的方法是()和()部分消化法。


正确答案:λ噬菌体载体;限制性内切核酸酶

第10题:

M13噬菌体适用于()。

  • A、构建基因组文库
  • B、构建cDNA文库
  • C、克隆较大的DNA片段
  • D、克隆单链外源DNA片段进行序列分析
  • E、以上都对

正确答案:D