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填空题常用的蛋白质分离纯化方法有()、()、()、()、()、()、()、()等。

题目
填空题
常用的蛋白质分离纯化方法有()、()、()、()、()、()、()、()等。
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相似问题和答案

第1题:

盐析法可使蛋白质沉淀,但不引起变性,所以盐析法常用于蛋白质的分离纯化。


正确答案:正确

第2题:

常用的蛋白质分离纯化方法有()、()、()、()、()、()、()、()等。


正确答案:离心;透析;沉淀;层析;电泳;蛋白印迹;蛋白质芯片;质谱法

第3题:

分离纯化后蛋白质含量测定常用( )


正确答案:D

第4题:

根据溶解度不同,蛋白质有几种分离纯化方法。


正确答案: 利用蛋白质溶解度的差异是分离蛋白质的常用方法之一。影响蛋白质溶解度的主要因素有溶液的pH值、离子强度、溶剂的介电常数和温度等。
1)等电点沉淀蛋白质在等电点时溶解度最小。单纯使用此法不易使蛋白质沉淀完全,常与其他方法配合使用。
2)盐析沉淀中性盐对蛋白质胶体的稳定性有显著的影响。一定浓度的中性盐可破坏蛋白质胶体的稳定因素而使蛋白质盐析沉淀。盐析沉淀的蛋白质一般保持着天然构象而不变性。有时不同的盐浓度可有效地使蛋白质分级沉淀。通常单价离子的中性盐(NaCl)比二价离子的中性盐[(NH42SO4]对蛋白质溶解度的影响要小。
3)低温有机溶剂沉淀法在一定量的有机溶剂中,蛋白质分子间极性基团的静电引力增加,而水化作用降低,促使蛋白质聚集沉淀。此法沉淀蛋白质的选择性较高,且不需脱盐,但温度高时可引起蛋白质变性,故应注意低温条件。一般在0~40℃之间,多数球状蛋白的溶解度随温度的升高而增加;40~50℃以上,多数蛋白质不稳定,并开始变性。因此对蛋白质的沉淀一般要求低温条件。

第5题:

常用的蛋白质分离纯化方法有哪几种?各自的原理是什么?


正确答案: 1、沉淀:向蛋白质水溶液中加入浓的无机盐溶液,可使蛋白质的溶解度降低,而从溶液中析出。
2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。
3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。
4、层析:A.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离性质,在某一特定pH时,各蛋白质的电荷量及性质不同,故可以通过离子交换层析得以分离。如阴离子交换层析,含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来。B.分子筛,又称凝胶过滤。小分子蛋白质进入孔内,滞留时间长,大分子蛋白质不能进入孔内而径直流出。
5、超速离心:既可以用来分离纯化蛋白质,也可以用作测定蛋白质的分子量。不同蛋白质因其密度与形态各不相同而分开。

第6题:

分离纯化蛋白质的意义有哪些?


正确答案:
研究蛋白质的结构与功能:要求纯度高,不变性;
提取活性的酶或蛋白质:必须保持天然活性状态;
作为药物或食品添加剂:纯度要求一般。
一般步骤:材料的选择—原料的预处理—蛋白质的提取—从抽提液中沉淀蛋白质—纯化—蛋白质的结晶。超二级结构:又称模体,是指二级结构单元进一步聚集和组合在一起,形成规则的二级结构聚集体。其形成进一步降低了蛋白质分子的内能,使其更加稳定,它是蛋白质在二级结构基础上形成三级结构时经过的一个新的结构层次。

第7题:

分离纯化基因工程药物常用的色谱方法有哪些?它们的原理是什么?


正确答案: 分离纯化基因工程药物常用的色谱方法有:离子交换色谱,疏水色谱,亲和色谱和凝胶过滤色谱;
离子交换色谱,以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子和交换剂上的平衡离子进行可拟交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种色谱方法;
疏水色谱,利用蛋白质表面的疏水区域与固定相上疏水性基团相互作用力的差异对蛋白质组分进行分离的色谱方法;
亲和色谱:利用固定化配体与目的蛋白质之间非常特异的生物亲和力进行吸附,这种结合既是特异的又是可逆的,改变条件可以使这种结合解除的原理分离纯化蛋白质;
凝胶过滤色谱,是以多孔性凝胶填料为固定相,按分子大小对溶液中各组分进行分离的液相色谱方法。

第8题:

主要用于蛋白质分离纯化的方法是( )


正确答案:A

第9题:

简述蛋白质类药物的分离纯化方法?


正确答案: ①沉淀法
②按分子大小分离的方法
③按分子所带电荷进行分离的方法
④亲和层析法

第10题:

常用的微生物分离纯化方法有哪些?这些方法各有什么优缺?


正确答案: 常用的微生物分离纯化方法有:稀释混合倒平板法、稀释涂布平板法、平板划线分离法、稀释摇管法、液体培养基分离法、单细胞分离法、选择培养分离法等。其中前三种方法最为常用,不需要特殊的仪器设备,分离纯化效果好稀释混合倒平板法有两个缺点,一是会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间,缺乏溶氧而生长受影响,形成的菌落微小难于挑取;一是在倾入熔化琼脂培养基时,若温度控制过高,易烫死某些热敏感菌,过低则会引起琼脂太快凝固,不能充分混匀。在微生物学研究中,更常用的纯种分离方法是稀释涂布平板法。另一种简单快速有效的涂布平板法,为玻璃涂棒连续涂布分离法。平板划线分离法的特点是简便快速,但单个菌落并不一定是由单个细胞形成的,需再重复划线1~2次,并结合显微镜检测个体形态特征,才可获得真正的纯培养物。