疾病预防控制人员业务知识竞赛
问答题简述采用鸡胚进行流感病毒分离培养的操作步骤。
题目
参考答案和解析
①选9～11日龄鸡胚，用验蛋器检查后，弃去死胚及发育不好的鸡胚，在照卵灯上画出气室及胚胎位置。
②鸡胚气室朝上，75%酒精消毒后，在气室端近胚胎处用钻孔器钻一个小孔，用无菌尖吸管向小孔内加1滴无菌液体石蜡，使胚胎更清晰。
③用1ml注射器吸取处理过的标本，以10～20角度插入鸡胚颚下胸前，在羊膜腔内接种0.2ml，再将针头稍后退，于尿囊腔内接种0.2ml，每份标本接种3个鸡胚。
④接种后用胶布封口，放34℃温箱孵育72h。
2）收获：
①收获前将鸡胚放4℃冰箱过夜。
②70%酒精消毒鸡胚气室部分，用镊子去掉气室部的蛋壳。
③用眼科镊子小心撕破壳膜及尿囊腔，将鸡胚轻轻推向一侧。
④用毛细管吸取尿囊液，装入小试管内。
⑤将羊膜提起呈伞状，将毛细管插入，吸取羊水。
⑥在有机板上每个鸡胚的尿囊液和羊水各加2滴及等量1%鸡血球，摇匀，室温放置45分钟后看结果。出现凝集为阳性，用血凝试验测定效价，如滴度低或阴性则混合每份标本的收集液，盲传二代，仍为阴性可报告结果为阴性。
相似问题和答案
第1题：
从患者咽漱液中分离流感病毒最好接种于
A、小鼠腹腔
B、鸡胚羊膜腔
C、鸡胚尿囊腔
D、人胚羊膜细胞
E、Hela细胞
第2题：
从流感病人的咽漱液中分离流感病毒，最好将标本接种于
A、小鼠腹腔
B、鸡胚羊膜腔
C、鸡胚尿囊腔
D、人胚羊膜细胞
E、Hela细胞
第3题：
病毒的分离培养不能采用下列哪项方法？( )
A、细胞培养
B、鸡胚培养
C、无生命人工培养基
D、动物培养
E、器官培养
第4题：
从咽漱液中分离流感病毒常接种于（）
- A、Hela细胞
- B、豚鼠
- C、鸡胚和狗肾传代细胞
- D、鸡胚和Hela细胞
正确答案:B
第5题：
下列适用于流感病毒分离的方法是( )。
A、鸡胚和MDCK细胞培养
B、组织培养
C、厌氧培养
D、C02培养
E、动物接种
第6题：
从咽漱液中分离流感病毒最常接种于( )
A、小鼠腹腔
B、鸡胚羊膜腔和尿囊腔
C、鸡胚尿囊腔
D、人胚羊膜细胞
E、Hela细胞
第7题：
A、细胞培养技术
B、鸡胚培养技术
C、动物接种
D、生化鉴定
第8题：
分离鉴定流感病毒最常用的方法是
A、小鼠接种
B、兔接种
C、鸡胚接种
D、细胞培养
E、组织器官接种
第9题：
常用鸡胚分离培养（）
- A、风疹病毒
- B、流感病毒
- C、乙型脑炎病毒
- D、脊髓灰质炎病毒
- E、ECHO病毒
正确答案:B
第10题：
简述用细胞培养进行流感病毒分离培养的操作步骤。
正确答案: 1）细胞传代：细胞按常规方法消化后，稀释，分装T25小瓶，37℃温箱培养。
2）标本接种：长成单层的细胞瓶，倒掉营养液，用Hank，s洗3遍，每瓶接种标本1ml，34℃吸附1小时，加入维持液（含胰酶、不含小牛血清）6ml，每份标本接种2瓶，同时做正常细胞对照。
3）标本培养：接种标本的细胞瓶，放34℃培养7天，隔日镜下观察一次。
4）标本收获：细胞颗粒增多，变圆，最后脱落，也可呈网状。出现细胞病变者用豚鼠血球进行血凝素测定，细胞病变明显时收获，无病变及血凝阴性的标本盲传，仍为阴性时报告阴性。