临床医学检验

多选题有关煮沸裂解法提取质粒DNA的叙述中，正确的是（　）A该法是一种条件比较剧烈的方法B煮沸不能完全灭活核酸内酶AC适用于大多数E.coli菌株D不适用于表达endA的菌株E只能用于小质粒DNA(＜15kb)的小量制备

题目
多选题
有关煮沸裂解法提取质粒DNA的叙述中，正确的是（　）
A

该法是一种条件比较剧烈的方法

B

煮沸不能完全灭活核酸内酶A

C

适用于大多数E.coli菌株

D

不适用于表达endA的菌株

E

只能用于小质粒DNA(＜15kb)的小量制备

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第1题：

煮沸裂解法制备质粒时配制所用溶菌酶溶液的溶剂是( )。

A、TE

B、TAE

C、TBE

D、TrisCl

E、冰醋酸


正确答案：D

第2题：

在碱裂解法提取质粒时，用于沉淀质粒DNA的试剂是

A.SDS

B.EDTA

C.75%乙醇

D.异丙醇

E.无水乙醇


参考答案：E

第3题：

有关煮沸裂解法提取质粒DNA的叙述中，正确的是 ( )

A、该法是一种条件比较剧烈的方法

B、煮沸不能完全灭活核酸内酶A

C、适用于大多数E.coli菌株

D、不适用于表达endA的菌株

E、只能用于小质粒DNA(＜15kb)的小量制备


参考答案：ABCDE

第4题：

目前使用较为广泛的质粒DNA小量提取的方法是（）

  • A、牙签少量制备法
  • B、小量一步提取法
  • C、SDS裂解法
  • D、碱裂解法
  • E、煮沸裂解法

正确答案:D

第5题：

下列有关质粒的叙述，正确的是（）

  • A、质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器
  • B、质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子
  • C、质粒只有在侵入宿主细胞后在宿主细胞内复制
  • D、细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行

正确答案:B

第6题：

常采用质粒DNA小量提取的方法是 ( )

A、碱裂解法

B、SDS裂解法

C、煮沸裂解法

D、酚抽提法

E、牙签少量制备法


参考答案：A

第7题：

下列对细菌质粒生物学特性叙述正确的是

A:质粒DNA复制为自主复制
B:质粒DNA复制为非自主复制
C:质粒是细菌生命活动不可缺少的物质
D:细菌内结构相似的质粒都能稳定共存
E:质粒DNA不能复制

答案：A
解析：

第8题：

在碱裂解法提取质粒时，沉淀质粒DNA的试剂是

A.SDS

B.EDTA

C.异丙醇

D.75%乙醇

E.无水乙醇


参考答案：E

第9题：

有关煮沸裂解法提取质粒DNA的正确叙述是（）

  • A、该法是一种条件比较温和的物理方法
  • B、煮沸能完全灭活核酸内酶A
  • C、不适用于大多数Ecoli菌株
  • D、适用于HB101菌株
  • E、适用于<15kb的质粒DNA制备

正确答案:E

第10题：

试述举2种质粒DNA提取的方法及应用。


正确答案: 质粒DNA提取的方法包括碱裂解法、煮沸裂解法和SDS裂解法。
碱裂解法：在NaOH存在的强碱性（pH12.0～14.0）的条件下，用强阳离子去垢剂SDS破坏细胞壁和裂解细胞，并使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA发生变性，释放出质粒DNA。它是一种适用范围很广的方法，能从所有的大肠杆菌（E.coli）菌株中分离出质粒DNA，制备量可大可小。
煮沸裂解法：是将细菌悬浮于含Triton X-100和溶菌酶的缓冲液中，Triton X-100和溶菌酶能破坏细胞壁，再用沸水浴裂解细胞，使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA发生变性。对CCC质粒DNA因结构紧密不会解链，当温度下降后，CCC质粒DNA可重新回复其超螺旋结构，通过离心去除变性的蛋白质和染色体DNA，然后回收上清液中的质粒DNA。本法只能用于小质粒DNA（小于15kb）的小量或大量制备，适用于大多数从大肠杆菌（E.coli）菌株中分离出质粒DNA。
S.DS裂解法：它是将细菌悬浮于等渗的蔗糖溶液中，用溶菌酶和EDTA处理以破坏细胞壁，再用SDS裂解去壁细菌，从而温和地释放出质粒DNA到等渗溶液中，然后用酚/氯仿抽提。适用于大质粒DNA的提取。

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