病理技术

单选题下列关于探针标记方法的叙述正确的是()A 酶促标记法是最常用的标记方法,产生比化学标记法高的敏感性B 酶促标记法简便、快速、标记均匀C 末端标记的探针比均匀标记的探针有更高的活性D 末端标记的探针常用于杂交分析E 均匀标记的探针主要用于DNA的测序

题目
单选题
下列关于探针标记方法的叙述正确的是()
A

酶促标记法是最常用的标记方法,产生比化学标记法高的敏感性

B

酶促标记法简便、快速、标记均匀

C

末端标记的探针比均匀标记的探针有更高的活性

D

末端标记的探针常用于杂交分析

E

均匀标记的探针主要用于DNA的测序

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第1题:

酶促法是目前实验室最常用的核酸探针标记方法,主要可以分为

A、缺口平移法

B、随机引物法

C、末端标记法

D、PCR标记法

E、反转录酶、RNA聚合酶标记法


参考答案:ABCDE

第2题:

用于细菌检测的核酸探针类型为

A、质粒DNA探针

B、标记靶体

C、标记配体

D、标记磁珠

E、未知核酸片段


参考答案:A

第3题:

在荧光原位杂交技术中,探针-荧光标记常用的方法是

A、搅拌标记法

B、透析标记法

C、戊二醛标记法

D、高碘酸钠标记法

E、缺口平移标记法


参考答案:E

第4题:

探针的标记法有哪些?


正确答案: 探针的标记法?
答:1、缺口平移法:此法是利用适当浓度的DNaseⅠ在DNA双链上随机切割单链,造成单链切口。切口处产生一个5末端和3末端,3末端就可以作为引物,在大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的催化下,以互补的DNA单链为摸板,依次将dNTP连接到切口的3末端的羟基上,合成新的DNA单链;同时DNA聚合酶Ⅰ的5→3的核酸外切酶活性在切口处将旧链从5末端逐步切除,新合成链不断延伸,从而使原DNA分子上的部分核苷酸残基被标记的核苷酸所取代。
2、随机引物法:随机引物是人工合成的长度为6个寡核苷酸残基的寡聚核苷酸片段的混合物。对于任何一个用作探针的DNA片段,随机引物混合物中都会有一些六核苷酸片段可以与之结合,起到DNA合成引物的作用。将这些引物与变性的DNA单链结合后,以4种dNTP(其中一种是标记物标记的dNTP)为底物,合成与探针DNA互补的切带有标记物的DNA探针。
3、PCR标记法:在PCR反应底物中,将一种dNTP换成标记物标记的dNTP,这样标记的dNTP就在PCR反应的同时掺入到新合成的DNA链上。
4、末端标记法:只是将DNA片段的一端进行标记。

第5题:

下列关于探针标记方法的叙述哪项正确?( )

A、末端标记的探针常用于杂交分析

B、酶促标记法是最常用的标记方法,产生比化学标记法高的敏感性

C、末端标记的探针比均匀标记的探针有更高的活性

D、酶促标记法简便、快速、标记均匀

E、均匀标记的探针主要用于DNA的测序


参考答案:B

第6题:

根据探针标记时的反应方式不同,核酸探针的标记方法可分为化学法和酶促法两种。其中酶促法是目前实验室最常用的核酸探针标记方法。主要用于寡核苷酸探针或序列较短的RNA和DNA探针的标记方法是A、随机引物法

B、缺口平移法

C、T4多核苷酸激酶标记DNA的5′末端

D、Klenow片段标记DNA的3′末端

E、PCR标记法

缺口平移法中利用的工具酶是A、大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ

B、大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅱ

C、大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅲ

D、Klenow片段

E、Taq酶


参考答案:问题 1 答案:C


问题 2 答案:A

第7题:

凝胶滞后实验的基本原理是 ( )

A、蛋白质与末端标记的核酸探针特异性结合

B、蛋白质与末端标记的蛋白质探针特异性结合

C、蛋白质与末端标记的单克隆抗体特异性结合

D、蛋白质与末端标记的某种酶特异性结合

E、蛋白质与末端标记的生物分子特异性结合


参考答案:A

第8题:

关于制备生物素化核酸探针,下述选项不正确的是

A、缺口移位法

B、光化学法

C、戊二醛法

D、末端标记法

E、常用光生物素和生物化dUTP作为标记核酸的活化生物素


参考答案:C

第9题:

核酸探针常用的酶促标记技术有哪几种?


正确答案:缺口平移、DNA快速末端标记、用T4多核苷酸激酶(PNK)标记DNA5’末端、随机引物延伸(DNA聚合酶或反转录酶)、聚合酶链式反应(PCR,用于大规模检测和非放射性标记)。

第10题:

下列标记探针的方法中最简单有效的方法是()。

  • A、代谢标记法
  • B、磷酸化法
  • C、切口平移法
  • D、体外转录法
  • E、引物延伸法

正确答案:D

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