临床医学检验临床化学
单选题下列各项中，影响PCR反应特异性的因素不包括（）A Mg2+浓度B 模板纯度C 引物长度D 退火温度E 变性时间
题目
单选题
下列各项中，影响PCR反应特异性的因素不包括（）
A
Mg2+浓度
B
模板纯度
C
引物长度
D
退火温度
E
变性时间
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相似问题和答案
第1题：
下列关于组成PCR反应体系的基本成分的叙述中不正确的是( )
A.模板DNA
B.特异性引物
C.
D.四种dNTP
B.特异性引物
C.
D.四种dNTP
答案：C
解析：
第2题：
下列各项中，能够影响需求的因素不包括（ ）。
A.消费者偏好
B.价格
C.风俗习惯
D.预期
B.价格
C.风俗习惯
D.预期
答案：C
解析：
本题考查的是需求、供给与均衡价格。能够影响需求的因素有偏好、收入、价格、替代品价格、互补品价格、预期。+（生产技术和生产成本）影响供给因素。
第3题：
以下关于梅毒螺旋体核酸检测－聚合酶链反应(PCR)的认识,错误的是()。
A、PCR检测TP DNA，特异性很强，敏感性很高
B、当前诊断梅毒的PCR仍存在引物的非特异性、对血清(全血)、CSF等敏感度低
C、PCR检测可作为判愈检测
D、PCR方法易受标本中的组织和细胞碎片等物质抑制
E、当皮损开始愈合分泌物减少，血清学试验阳性反应时，采用PCR方法不合适
正确答案：C
第4题：
影响PCR反应的因素有哪些？
正确答案:PCR反应体系包含DNA模板、寡核苷酸引物、DNA聚合酶、dNTP及含有必需离子的反应缓冲液，这些因素都对PCR反应产生影响。
第5题：
实时荧光定量PCR的优点包括（）。
- A、实时监控PCR反应的进程
- B、特异性高于普通PCR
- C、灵敏度高
- D、在单管中实现扩增和检测分析
正确答案:A,B,C,D
第6题：
有关PCR的描述，错误的是（ ）。
A.是一种酶促反应
B.引物决定特异性
C.模板的数量和纯度是影响PCR的重要因素
D.延伸时间越长，产物量越大
E.扩增对象是DNA
B.引物决定特异性
C.模板的数量和纯度是影响PCR的重要因素
D.延伸时间越长，产物量越大
E.扩增对象是DNA
答案：D
解析：
PCR为聚合酶链式反应，是一种酶促反应，模板即扩增对象是DNA，引物的特异性决定反应的特异性，在反应过程中，模板的数量和纯度影响PCR反应。随着延伸时间的增加，产物量增加，但在后期由于原料耗尽，会进入平台期，产物量不再增加。
第7题：
PCR反应的特异性与（）直接相关。
- A、模版的质量
- B、DNA聚合酶的质量
- C、引物的特异性
- D、退火温度
正确答案:A,B,C,D
第8题：
PCR反应体系中不包括的成分是
A、引物
B、模板
C、DNA聚合酶
D、dNTP
E、DNA酶
参考答案：E
第9题：
荧光定量PCR结果中样品的Ct值受下列哪些因素的影响（）。
- A、阈值设定
- B、模版的起始浓度
- C、PCR反应的循环数
- D、引物的扩增效率
正确答案:A,B,D
第10题：
提高PCR反应的特异性一般可以使用哪几种方法？
正确答案: A.引物设计：引物长度、碱基配对是否严格、GC%含量、退火温度、引物浓度与纯度、稳定性、是否为简并性引物等；
B.使用热启动：在变性完成之后再加入DNA聚合酶（或聚合酶才有活性），这样可以提高特异性，因为DNA聚合酶在低温时也有活性，可能引起非特异的扩增；
C.镁离子浓度：不同的模板和引物有不同的镁离子浓度，应进行预实验进行探索；较高的镁离子浓度会提高产量，同时降低特异性；dNTP浓度较高时应适当提高镁离子浓度；
D.促进PCR的添加剂：降低DNA熔解温度，从而有助于引物退火并辅助DNA聚合酶延伸通过二级结构区，可提高特异性和产率；
E.使用巢式PCR：降低扩增多个靶位点的可能性，提高特异性。