菌类园艺工
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相似问题和答案
第1题：
采用组织分离法分离菌种时，取组织的最佳部位是菌柄与菌盖交界的菌盖内组织。
正确答案:正确
第2题：
生物分离工程的一般步骤是什么？各步骤中的单元操作主要有哪些？
正确答案: 1）发酵液的预处理与固-液分离，主要操作有：加热、调节PH、沉降、过滤、错流过滤、均质化研磨、溶胞、萃取；
2）初步纯化，主要步骤：沉淀、吸附、萃取、超滤；
3）高度纯化，主要步骤：层析、离子交换、亲和、疏水、吸附、电泳；
4）成品加工，主要步骤：无菌过滤、超滤、冷冻干燥、喷雾干燥、结晶。
第3题：
大肠菌群测定的一般步骤是初发酵－分离－染色－复发酵。
正确答案:正确
第4题：
下列不适宜用组织分离法分离菌种的食用菌为（）。
- A、平菇
- B、金针菇
- C、黑木耳
- D、香菇
正确答案:C
第5题：
简述带式冷却机的主要操作步骤（非联锁工作制时）。
正确答案: （1）开机前对冷却机和各部分设备进行检查；
（2）启动成品皮带机；
（3）启动冷却风机；
（4）带冷机运转速度的快慢由变频调速器来控制；
（5）停机时，首先旋动变频调速器至零位，设备停转后，将转换开关置于“断位”。若将工作制转换开关打到联锁位置，按“启动”按钮即可启动带式冷却机。
第6题：
简答凝胶色谱柱分离主要步骤及操作。
正确答案: （1）凝胶的预处理
市售凝胶必须经过充分溶涨后才能使用，在烧杯中将干燥凝胶加水或缓冲液，搅拌、静置、倾去上层混悬液、除去过细的粒子。如此反复多次，直至上层澄清为止。
（2）层析柱的选择
层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径。分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度。
（3）凝胶柱的装填
进胶过程必须连续、均匀，不要中断，并在不断搅拌下使胶均匀沉降。
（4）样品处理和加样
分离蛋白质样品的体积为凝胶床的1-4％一般约0.5-2ml，在蛋白质溶液除盐时，样品可达凝胶床的20-30％；分级分离样品体积要小，使样品层尽可能窄，洗脱出的峰形较好。加样时尽量减少样品的稀释及凝胶床面的搅动。
（5）洗脱与收集
整个洗脱过程中始终保持一定的操作压。流速不宜太快且要稳定。
第7题：
请按实验要求，用组织分离法进行平菇的菌种分离，写出操作步骤和应注意的问题？
正确答案:1、分离步骤：
①、选种菇：选择优良的种菇作为分离材料，要求外观典型、大小适中、无病虫害、八成熟、1~2茬的子实体。
②、种菇消毒：用无菌水冲洗后，用75%的酒精棉球迅速擦拭表面消毒。
③、取接组织：取消毒过的刀片从菌柄或菌盖中部纵切、撕开，挑取菌盖与菌柄交界处的一小块组织（火柴头大小），接种到PDA斜面培养基中部。
3-5天后，接种块上产生白色绒毛状菌丝。
④、培养：25-28摄氏度培养3-5天后，接种块上产生白色绒毛状菌丝时，在接种箱或净化工作台上，用接种针将菌丝移接到斜面试管内，培养满了即为平菇母种。
２、注意事项：
①、种菇选择大小适中、无病虫害、八成熟、1~2茬的子实体。
②、种菇消毒消毒要彻底。
③、取接组织动作要快，组织块宜小不宜大。
④、培养温度严格控制。
第8题：
简述用细胞培养进行流感病毒分离培养的操作步骤。
正确答案: 1）细胞传代：细胞按常规方法消化后，稀释，分装T25小瓶，37℃温箱培养。
2）标本接种：长成单层的细胞瓶，倒掉营养液，用Hank，s洗3遍，每瓶接种标本1ml，34℃吸附1小时，加入维持液（含胰酶、不含小牛血清）6ml，每份标本接种2瓶，同时做正常细胞对照。
3）标本培养：接种标本的细胞瓶，放34℃培养7天，隔日镜下观察一次。
4）标本收获：细胞颗粒增多，变圆，最后脱落，也可呈网状。出现细胞病变者用豚鼠血球进行血凝素测定，细胞病变明显时收获，无病变及血凝阴性的标本盲传，仍为阴性时报告阴性。
第9题：
什么叫组织分离法？写出组织分离法的步骤。
正确答案: 组织分离法：指通过菇体组织分离纯种的方法。
优点：操作简便、取材广泛、不易变异，保持原菌种优良种性。
方法：①选择种菇（出菇早、无病虫害、柄短、肉厚、大小适中、5~6分成熟）②组织分离选择种菇→表面消毒（75%酒精或0.1%升汞）→撕成两半→取菌柄菌盖交界处→小块菌肉→移入PDA→培养→观察→转管→纯种。
上述分离物在25℃下，经3~5d可看到分离物表面长出白色绒毛状菌丝，每隔1~2d检查1次，随时淘汰霉菌、细菌污染的培养物，培养10d~15d，再作1次转管即得到纯种。
第10题：
简述采用鸡胚进行流感病毒分离培养的操作步骤。
正确答案: 1）标本接种：
①选9～11日龄鸡胚，用验蛋器检查后，弃去死胚及发育不好的鸡胚，在照卵灯上画出气室及胚胎位置。
②鸡胚气室朝上，75%酒精消毒后，在气室端近胚胎处用钻孔器钻一个小孔，用无菌尖吸管向小孔内加1滴无菌液体石蜡，使胚胎更清晰。
③用1ml注射器吸取处理过的标本，以10～20角度插入鸡胚颚下胸前，在羊膜腔内接种0.2ml，再将针头稍后退，于尿囊腔内接种0.2ml，每份标本接种3个鸡胚。
④接种后用胶布封口，放34℃温箱孵育72h。
2）收获：
①收获前将鸡胚放4℃冰箱过夜。
②70%酒精消毒鸡胚气室部分，用镊子去掉气室部的蛋壳。
③用眼科镊子小心撕破壳膜及尿囊腔，将鸡胚轻轻推向一侧。
④用毛细管吸取尿囊液，装入小试管内。
⑤将羊膜提起呈伞状，将毛细管插入，吸取羊水。
⑥在有机板上每个鸡胚的尿囊液和羊水各加2滴及等量1%鸡血球，摇匀，室温放置45分钟后看结果。出现凝集为阳性，用血凝试验测定效价，如滴度低或阴性则混合每份标本的收集液，盲传二代，仍为阴性可报告结果为阴性。