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比较一下常用的细胞破碎方法。

题目

比较一下常用的细胞破碎方法。

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相似问题和答案

第1题:

爆破破碎的金属与常规爆破的岩土介质相比较有何特点,宜采用何种炸药?常用的金属破碎解体方法有哪两种,适用于何种金属型材?


正确答案:金属材料与岩土介质相比较,具有密度大、波阻抗大和抗拉强度高的特点。因此,为了提高它的爆破破碎效果,宜尽量选用密度大和爆速高的炸药。破碎解体金属,通常采用裸露药包爆破切割法和炮孔爆破破碎法。前者多用于厚度小于15em的金属板、金属管、型钢和直径不大的钢索;后者多用于厚度大于15~m的铸铁块、钢块和钢锭,对于体积较大的金属块体也可事先采用炮孔爆破切割法将其切割成若干段(块),然后再用炮孔法爆破破碎解体。

第2题:

细胞破碎的原因是什么?常用的细胞破碎的方法有哪三种?


正确答案:细胞破碎的原因:目标产物存在于胞内。
常用的细胞破碎的方法有:珠磨法、高压匀浆法、超声破碎法。

第3题:

常用于细胞破碎方法可分为哪些类型?简述细胞破碎的目的意义。


正确答案:细胞的破碎方法可分为:机械法,包括
(1)捣碎法
(2)研磨法
(3)匀浆法
物理法,包括
(1)反复冻融法
(2)超声波处理法
(3)压榨法
化学与生物化学方法,包括
(1)酶解法
(2)化学法
目的意义:除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶之外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体不同部位的组织,其组织破碎的难易不一,使用的方法也不相同。

第4题:

简述常用的细胞破碎方法


正确答案: 直接测定法:适当稀释,血球计数板计数;
目标产物测定法;
测定导电率。

第5题:

酶类药物的提取过程中,需要对生物组织和细胞进行破碎,常用的破碎方法包括:()、()、()。


正确答案:磨切法;压力法;反复冻融法

第6题:

基因工程药物多为胞内产物,分离提取时需破碎细胞。化学破碎法是常用的方法,但()不是化学破碎细胞的方法。

  • A、渗透冲击
  • B、增溶法
  • C、脂溶法
  • D、酶溶法

正确答案:D

第7题:

细胞破碎常用的破碎方法有哪些?


正确答案: 机械法:珠磨法(固体剪切作用)、高压匀浆法(液体剪切作用)、超声破碎法(液体剪切作用)、X-press法(固体剪切作用)。
非机械法:酶溶法(酶分解作用)、化学渗透法(改变细胞膜的渗透性)、渗透压法(渗透压剧烈改变)、冻结融化法(反复冻结-融化)、干燥法(改变细胞膜渗透性)

第8题:

爆破破碎的金属与常规爆破的岩土介质相比较有何特特点,宜采用何种炸药?常用的金属破碎解体方法有哪两种,适用于何种金属型材?


正确答案: 金属材料与岩土介质相比较,具有密度大、波阻抗大和抗拉强度高的特点。因此,为了提高它的爆破破碎效果,宜尽量选用密度大和爆速高的炸药。
破碎解体金属,通常采用裸露药包爆破切割法和炮孔爆破破碎法。前者多用于厚度小于15cm的金属板、金属管、型钢和直径不大的钢锁;后者多用于厚度大于15cm的铸铁块、钢块和钢锭,对于体积较大的金属块体也可事先采用炮孔爆破切割法将其切割成若干段(块),然后再用炮孔法爆破破碎解体。

第9题:

常用细胞破碎方法有_____________、______________、______________、____________、__________________。


正确答案:反复冻融法;超声波碎法;自溶法;酶处理法;表面活性剂处理法

第10题:

请举两个机械破碎细胞的方法,并从设备、作用机理、温控、优缺点等方面进行比较。


正确答案: 一、高压匀浆法
(1)设备:高压匀浆器:由高压泵和匀浆阀组成。
(2)作用机理:高压泵将电机的旋转运动转变成匀浆阀柱杆的直线运动,从高压室(几十兆帕)压出细胞悬浮液,经过碰撞环的撞击后改变方向从出口管喷出,使细胞经历较高的流速下的剪切碰撞发生较大的变形,从而达到破碎细胞的目的。也就是细胞经历了高流速下的剪切、碰撞、高压到常压。细胞悬浮也经历一次高压匀浆后。只有一部分细胞破碎,不能达到100%的细胞破碎率。
(3)温控和能耗
如何控制浓度:匀浆过程中产生的热会导致蛋白质和酶的失活。温度在35以下,失活问题可以忽略。因此低温操作是必须的。高压匀浆一般需多级操作,每次循环前往往进行级间冷却。
能耗:能耗主要来自提供动力(如压力)消耗的能量和控制低温操作耗费的能量。提高压力可以增加细胞的破碎率,但是同时增加了能耗。将破碎过程中产生的热量移走也需要付出代价。
(4)存在的问题
①不适合团块状或丝状真菌(导致堵塞)以及较小的革兰氏阳性菌,
②质地坚硬者如包涵体易损伤匀浆阀,也不适用(但是也有很多人在实验室中用此方法来研究含有包涵体的大肠杆菌的破碎。)
③温度高易失活,能耗大,
④一次操作不能达到100%的细胞破碎率。因此需一次操作后回收破碎液进行第二次,第三次或更多次。
二、高速珠磨法
(1)设备:珠磨机。
(2)作用机理:
细胞和级细的研磨剂(一般为无铅玻璃珠)在搅拌桨作用下充分混合,珠子之间及珠子与细胞之间相互剪切、碰撞,促使细胞壁破裂,释放内含物。
在珠液分离器的协助下,珠子滞留在破碎室内,浆液流出。从而实现连续操作。
(3)温控和能耗:
控制温度:采用夹套冷却的方式实现温控,效果较好,能耗:能耗与细胞破碎率成正比。珠磨机提高细胞破碎率需要增加装珠量或延长破碎时间或提高转速。这些操作不仅导致电能消耗的增加,而且产生了较多的热量。为了控制温度,需增加制冷费。
(4)优点和缺点:
优点:
①所有细胞都适用,包涵体也可以。因为包涵体质地坚硬,可以充当研磨剂。
②兼具破碎和冷却的双重功能,减少失活的可能性。
③适当条件下,一次操作就能达到较高的破碎率。
缺点:
参数多,转速,珠子的直径和用量,细胞浓度等等。确定起来比较困难,一般凭经验估计。