食品科学技术
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相似问题和答案
第1题：
试述凝胶层析的基本原理。
正确答案: ⑴凝胶是一种多微孔的多孔径网状支持物组成进行分子过滤的分子筛；
⑵物质分子在层析柱中的运动有重力的垂直方向运动和无定向扩散的布郎运动；
⑶大分子物质不能进入微孔在凝胶空隙间快速流出层析柱；
⑷小分子能够进入微孔，因而在凝胶中许多孔中穿行，因通过的距离长，后流出层析柱；
⑸分子直径越小能够进入的孔越多，流出层析柱越慢；
⑹根据分子筛这一原理可依据物质分子直径的大小按照由大到小的顺序流出层析柱而得到分离。
第2题：
简述凝胶过滤层析的优缺点。
正确答案: 优点：凝胶属于惰性载体，不带电荷，吸附力弱，操作条件比较温和，温度范围广，不需要有机溶剂，分离效果好
缺点：样品被不断稀释，上样量不能太大，否则分辨率变差
第3题：
凝胶过滤法主要用于蛋白和核酸分离，又称为分子筛层析法，其常用介质是
A、聚丙烯酰胺
B、琼脂糖
C、琼脂糖-聚丙烯酰胺
D、葡聚糖
E、琼脂糖-葡聚糖
参考答案：D
第4题：
简述凝胶层析分离的定义及原理
正确答案: 定义：凝胶层析又称为凝胶过滤，分子排阻层析，分子筛层析等。指以各种多孔凝胶为固定相，利用流动相中所含各种组分的相对分子质量不同而达到物质分离的一种层析技术。
原理：凝胶层析柱中装有多孔凝胶，当含有各种组分的混合溶液流经凝胶层析柱时，大分子物质由于分子直径大，不能进入凝胶的微孔，只能分布于凝胶颗粒的间隙中，以较快的速度流过凝胶柱。较小的分子能进入凝胶的微孔内，不断地进出于一个个颗粒的微孔内外，这就使小分子物质向下移动的速度比大分子的速度慢，从而使混合溶液中各组分按照相对分子质量由大到小的顺序先后流出层析柱，而达到分离的目的。
第5题：
纯化抗原常用的葡聚糖法适用于（）
- A、密度梯度离心
- B、凝胶过滤
- C、亲和层析
- D、离子交换层析
- E、沉淀
正确答案:C
第6题：
用葡聚糖凝胶柱层析分离时，最先洗脱下来的是（）
- A、大黄酸葡萄糖甙
- B、大黄素
- C、番泻甙
- D、大黄酸
- E、芦荟甙
正确答案:C
第7题：
纯化抗原常用的葡聚糖法（sepharose）适用于（）
- A、凝胶过滤
- B、离子交换层析
- C、亲和层析
- D、密度梯度离心
- E、沉淀
正确答案:C
第8题：
纯化抗原常用的葡聚糖法(Sepharose)适用于( )
A．凝胶过滤
B．离子交换层析
C．亲和层析
D．密度梯度离心
E．沉淀
正确答案：C
第9题：
很少用于黄酮类成分分离的方法是（）
- A、氧化铝层析
- B、聚酰胺层析
- C、硅胶层析
- D、PH梯度萃取法
- E、葡聚糖凝胶层析
正确答案:A
第10题：
简述凝胶层析、亲和层析、离子交换层析的原理和操作要点？
正确答案:离子交换层析原理：根据待分离物质带电性质不同的分离纯化方法。
操作：a上样：上样体积不十分严格。b洗脱：增加溶液的离子强度c梯度洗脱法：改变溶液的pHd再生：用0.5mol/LNaOH和0.5mol/LNaCl混合溶液或0.5mol/LHCl处理。凝胶层析原理：利用某些凝胶对于不同分子大小的组分阻滞作用的不同。大分子物质不能进入凝胶孔内，在凝胶颗粒之间的空隙向下移动，并最先被洗脱出来；小分子物质可自由出入凝胶孔，流程长而后流出层析柱。
操作：a凝胶的选择和处理，根据相对分子质量范围选择相应型号的凝胶介质。将干胶悬浮于5-10倍的蒸馏水中，充分溶胀，抽气，装柱。b柱的选择：采用L/D比值高的柱子，可提高分辨率，但影响流速。c加样：体积不能过多，不超过凝胶床体积的5％，脱盐时可在10％左右。d洗脱：洗脱液与平衡时用的buffer一致。洗速不可过快，保持恒速。e胶的保存：洗脱完毕后，凝胶柱已恢复到上柱前的状态，不必再生处理。
亲和层析原理：利用生物大分子间特异的亲和力来纯化生物大分子.体通过适当的化学反应共价的连接到载体上，待纯化的物质可被配体吸附，杂质则不被吸附，从层析柱流出，变换洗脱条件，即可将分离的物质洗脱下来，实现分离提纯。