食品科学技术

简述cDNA文库构建步骤。

题目

简述cDNA文库构建步骤。

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相似问题和答案

第1题:

以下关于cDNA文库和基因组文库的关系说法正确的是()

A、cDNA文库比基因组文库大

B、cDNA文库比基因组文库小

C、cDNA文库和基因组文库一样大

D、二者大小随机,不能比较


参考答案:B

第2题:

构建基因组DNA文库时,首先需分离细胞的

A.染色体DNA

B.线粒体DNA

C.mRNA

D.cDNA


正确答案:A

第3题:

将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增,即可获得

A、rDNA文库

B、cDNA文库

C、mDNA文库

D、tDNA文库

E、dDNA文库


参考答案:B

第4题:

重组DNA技术中,目的基因的获取方法不包括()

  • A、通过PCR合成
  • B、化学直接合成
  • C、构建cDNA文库
  • D、构建基因组文库
  • E、从基因组DNA中直接提取

正确答案:E

第5题:

关于cDNA文库的叙述,哪些是正确的


A.仅代表构建文库取材细胞当时表达的成套基因
B.同一种细胞在发育的不同阶段构建的文库,它们包含的基因不尽相同
C.正常肝细胞与肝癌细胞构建的cDNA文库,两者包含的基因不尽相同
D. cDNA文库中不包含内含子序列及基因的调控序列

答案:A,B,C,D
解析:

第6题:

构建cDNA文库时,首先需分离细胞的

A.

B.

C.

D.


正确答案:C
解析:基因文库可分为基因组DNA文库和cDNA文库。①基因组DNA文库是指包含某一生物细胞全部基因组DNA序列的克隆群体,它以DNA片段的形式贮存着某一生物的全部基因组DNA信息。基因组DNA文库的构建是将纯化的细胞基因组DNA(染色体DNA)用适当的限制性内切酶消化,获得一定大小的DNA片段,将这些片段克隆到噬菌体载体中,从而获得一群含有不同DNA片段的噬菌体。②cDNA文库是包含某一组织细胞在一定条件下所表达的全部mRNA经反转录而合成的cDNA序列的克隆群体,它以cDNA片段形式贮存着该组织细胞的基因表达信息。cDNA文库的构建是将组织细胞的mRNA经过反转录合成cDNA,后者被克隆进入质粒或噬菌体载体,转化宿主细胞后获得的克隆群体。

第7题:

构建cDNA文库时,首先需分离细胞的

A.染色体DNA

B.线粒体DNA

C.mRNA

D.cDNA


正确答案:C
解析:基因文库可分为基因组DNA文库和cDNA文库。①基因组DNA文库是指包含某一生物细胞全部基因组DNA序列的克隆群体,它以DNA片段的形式贮存着某一生物的全部基因组DNA信息。基因组DNA文库的构建是将纯化的细胞基因组DNA(染色体DNA)用适当的限制性内切酶消化,获得一定大小的DNA片段,将这些片段克隆到噬菌体载体中,从而获得一群含有不同DNA片段的噬菌体。②cDNA文库是包含某一组织细胞在一定条件下所表达的全部mRNA经反转录而合成的cDNA序列的克隆群体,它以cDNA片段形式贮存着该组织细胞的基因表达信息。cDNA文库的构建是将组织细胞的mRNA经过反转录合成cDNA,后者被克隆进入质粒或噬菌体载体,转化宿主细胞后获得的克隆群体。

第8题:

基因文库有cDNA文库和()


参考答案:基因组文库

第9题:

构建一个理想的cDNA文库需要考虑的因素有哪些?


正确答案: A.cDNA文库的质量
(1)文库的代表性:是指文库中包含的重组cDNA分子是否能完整地反映出来源细胞中表达的全部信息(即mRNA种类),是体现文库质量的最重要指标。
(2)重组cDNA片段的序列完整性:5’端非翻译区,中间的编码序列和3’端非翻译区,文库中重组cDNA片段尽可能完整的反应出天然基因的结构,cDNA是否完整,对文库使用价值的影响并不是绝对的 完整性这一指标要根据研究目的及筛选方法来灵活考虑,使细胞中表达出的mRNA在构建的cDNA文库中尽可能含有相应其各部分序列的重叠cDNA片段是其中一种折中的做法。
B.文库筛选可选择的具体方法,决定文库筛选方法的主要因素是
1.构建文库的克隆载体系统;
2.相应的宿主细胞系统。
最理想的情况是对于具体构建出的一个cDNA文库,应能够使用多种筛选方法,有效地分离鉴定出目的基因,从而使研究者能够在已有研究条件上,在文库筛选的具体方法上有灵活的选择余地。

第10题:

简述cDNA的扣除文库的构建。


正确答案: 将两种不同组织来源的mRNA进行比较,用扣除杂交排除相同部分,即共同表达的那部分mRNA,选出有差异的、特异表达的mRNA,构建成的cDNA文库。
构建过程:从两种不同类型的细胞T、D分别提取mRNA,T细胞mRNA逆转录合成单链的cDNA,向T细胞cDNA中过量加入D细胞总mRNA。
两者有共同序列的mRNA和cDNA形成mRNA-cDNA杂合分子,余下单链cDNA代表了仅仅存在于T细胞表达的基因信息。