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易错PCR的技术目的和策略有哪些？（调整dNTP浓度、增加Mg2+浓度、添加Mn2+等）
题目
易错PCR的技术目的和策略有哪些？（调整dNTP浓度、增加Mg2+浓度、添加Mn2+等）
参考答案和解析
正确答案:易错PCR是一种迅速、简便的在DNA序列中进行随机突变的方法，主要特点是能够控制它的突变频率。用PCR扩增目的基因时，通过使用低保真度的TaqDNA聚合酶或改变PCR常规的反应条件，如调整dNTP浓度、增加Mg2+浓度、添加Mn2+等，引起碱基以某一频率进行随机错配而引入多点突变，构建突变体库，然后选择或筛选出所需的突变体。
目的：将一轮PCR扩增得到的有用突变基因作为下一轮的模板进行PCR扩增，连续反复进行随机诱变，结果使每一轮获得的小突变可以积累大部分的有益突变。
目的：将一轮PCR扩增得到的有用突变基因作为下一轮的模板进行PCR扩增，连续反复进行随机诱变，结果使每一轮获得的小突变可以积累大部分的有益突变。
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相似问题和答案
第1题：
以下关于PCR的说法错误的是（）
- A、PCR反应必须要有模板、引物、dNTP和DNA聚合酶
- B、应用PCR技术可以进行定点突变
- C、PCR的引物必须完全和模板互补配对
- D、PCR反应中，仅介于两引物间的DNA片段得到大量扩增
正确答案:C
第2题：
PCR反应中，下列哪种物质不是必需的？（）
- A、引物
- B、Taq酶
- C、Mg2+
- D、矿物油
- E、dNTP
正确答案:D
第3题：
PCR反应中，下列哪种物质不是必需的
A.引物
B.Taq酶
C.Mg2+
D.矿物油
E.dNTP
正确答案：D
第4题：
PCR实验的特异性主要取决于（）
- A、DNA聚合酶的种类
- B、反应体系中模板DNA的量
- C、引物序列的结构和长度
- D、四种dNTP的浓度
- E、循环周期的次数
正确答案:C
第5题：
PCR反应中，下列哪种物质不是必需的（）
- A、引物
- B、DNA聚合酶
- C、Mg2+
- D、矿物油医学全.在线.网.站.提供
- E、dNTP
正确答案:D
第6题：
PCR反应中对于加入的dNTP有什么要求？
正确答案: 1.dNTP应具有一定浓度：50-200μmol/L，不得低于10-15。浓度过高会抑制Taq酶活性，较低浓度可降低错误掺入；高浓度dNTPs易产生错误掺入，而浓度过低会导致产量过低；
2.标准PCR中包含四种等摩尔浓度的脱氧核苷三磷酸，否则会诱导聚合酶错误掺入而降低产率、提前终止反应；
3.不能反复冻融，否则会降解。
第7题：
Mg2+在PCR反应中的作用，错误的是（ ）
- A、提高TaqDNA聚合酶活性
- B、稳定PCR反应体系
- C、当dNTP的浓度为200nmol/L时，MgCl2浓度一般为1.5mmol/L较合适
- D、在PCR中发挥作用的是结合Mg2+
- E、Mg2+浓度过低使酶活力升高，还会使酶催化非特异性扩增
正确答案:D,E
第8题：
PCR聚合酶链式反应体系的基本成分由耐热的DNA聚合酶、引物、 dNTP、 Mg2+、缓冲液、模板组成。
正确答案:正确
第9题：
下列哪项因素是PCR技术所不需要的？（）
- A、设计PCR特异性引物
- B、必须有dNTP做底物
- C、提供DNA模板
- D、RNA聚合酶的催化
- E、三步周期循环扩增
正确答案:D
第10题：
PCR反应平台期的影响因素有（）。
- A、引物及dNTP底物浓度降低
- B、产物过多
- C、酶与模板比例下降
- D、dNTP用完
- E、反应时间过长
正确答案:A,C