军队文职招聘考试

易错PCR技术

题目

易错PCR技术

如果没有搜索结果,请直接 联系老师 获取答案。
如果没有搜索结果,请直接 联系老师 获取答案。
相似问题和答案

第1题:

用于基因突变检测的技术是 ( )

A、荧光定量PCR技术

B、PCR-RFLP技术

C、PCR微卫星检测技术

D、原位杂交技术

E、cDNA表达芯片技术


参考答案:B

第2题:

对于极微量的靶序列的扩增可以采用的PCR技术是()

  • A、通用引物-PCR方法(general primermediated  PCR,CJP-PCR)
  • B、多重PCR(multiplexPCR)
  • C、套式PCR(nestcdprimers-polymerasc  chain reaction,NP-PCR)
  • D、AP-PCR方法(arbitrarily primcdPCR)
  • E、原位PCR技术(in situPCR,ISPCR)

正确答案:C

第3题:

对于极微量的靶序列的扩增可以采用的PCR技术是

A、通用引物-PCR方法(general primer-media-ted PCR,GP-PCR)

B、多重PCR(multiplex PCR)

C、套式PCR(nested primers-polymerase chain reaction,NP-PCR)

D、AP-PCR方法(arbitrarily primed PCR)

E、原位PCR技术(in situ PCR,ISPCR)


参考答案:C

第4题:

易错PCR


正确答案:是在采用Taq酶进行PCR扩增目的基因时,通过调整反应条件,改变Taq酶的突变频率,从而向目的基因中以一定的频率随机引入突变,构建突变库,然后选择或筛选需要的突变体。

第5题:

简述易错PCR技术与常规PCR技术的异同点。


正确答案:易错PCR技术是从酶的单一基因出发,在改变反应条件的情况下进行聚合酶链反应(PCR),使扩增得到的基因出现碱基配对错误,而引起基因突变的技术过程。
易错PCR技术与常规PCR技术有很多相同之处,都是用DNA聚合酶为催化剂,使用四种脱氧核苷三磷酸为底物,都要添加镁离子,其操作过程也相同,都经过双链DNA的变性、引物与单链DNA退火结合、引物延伸三个步骤。
(1)双链DNA的变性(解链):将待扩增的模板DNA升温至85~95℃,使DNA双链之间的氢键断开,解离为单链DNA。
(2)引物与单链DNA退火结合:单链DNA在温度逐步降低至50~70℃时,会与其碱基互补的引物结合形成双链,引物是经过设计后人工合成的与模板DNA某一片段互补的寡核苷酸链,长度为15~30个碱基。
(3)引物延伸:引物结合后,将温度升高至70~75℃,在DNA聚合酶的作用下,以引物为起点,以四种脱氧核苷三磷酸为底物,以目标DNA链为模板,按照碱基配对原则,由5′-端向3′-端的方向延伸,而进行DNA复制。以上三个步骤反复进行,一般经过30次循环,即可使目的基因扩增几百万倍。
易错PCR技术与常规PCR技术的主要不同点在于反应条件有所不同。
(1)在易错PCR中镁离子浓度较高:常规PCR扩增时,镁离子浓度为0.5~2.5mmol/L,进行易错PCR时,在原有基础上提高镁离子的浓度,以稳定非互补的碱基对。
(2)在易错PCR中可以添加一定浓度的锰离子,以降低聚合酶对模板的特异性,而常规PCR不用添加锰离子。
(3)在易错PCR中四种底物(dATP、dTTP、dCTP、dGTP)的浓度比改版,即采用浓度不平衡的各种底物,是DNA聚合酶在催化基因扩增时,碱基配对错误的出现频率增加,而容易引起基因突变。

第6题:

能够进行细胞内定位的DNA扩增技术是()。

A、反向PCR技术

B、原位PCR技术

C、实时PCR技术

D、多重PCR技术


答案:B

第7题:

何谓易错PCR技术?简述易错PCR技术进行体外基因突变的主要过程


正确答案:指从酶的单一基因出发,在改变反应条件的情况下进行PCR,使扩增得到的基因出现碱基配对错误,从而引起基因突变的技术过程。
过程:双链DNA的变性、引物与单链DNA退火结合、引物延伸。

第8题:

对于极微量的靶序列的扩增可以采用下列哪种PCR技术?( )

A、AP-PCR方法(arbitrarily primed PCR)

B、通用引物-PCR方法(general primer-mediated PCR,GP-PCR)

C、套式PCR(nested primers-polymerase chainreaction,NP-PCR)

D、多重PCR(multiplex PCR)

E、原位PCR技术(in situ PCR,ISPCR)


参考答案:C

第9题:

关于聚合酶链反应(PCR)的叙述错误的是()

  • A、PCR技术是一种体外DNA扩增技术
  • B、PCR技术能够快速特异地扩增任何目的基,因或DNA
  • C、PCR方法进行的基因扩增过程类似于体内
  • D、PCR方法需要特定的引物
  • E、PCR技术需要在恒温环境进行

正确答案:E

第10题:

连续易错PCR


正确答案:将一轮PCR扩增得到的有用突变基因作为下一轮的模板进行PCR扩增,连续反复进行随机诱变使每一轮获得的小突变可以积累大部分的有益突变。