预防疾控微生物检验技术(医学高级)
核酸探针技术是最早运用到临床实践中的分子生物学技术，其原理是选择某一组病原体特异的基因序列，进行克隆、合成，然后用作探针，探针与临床标本中的靶DNA或靶RNA杂交，核酸探针与靶核酸互补序列的结合有高度特异性，可在种或高于或低于种的水平鉴定病原体。常用核酸探针杂交方式中反应速度最快的是（）A、固相－液相杂交B、原位杂交C、液相－液相杂交D、液相－固相杂交E、荧光原位杂交
题目
核酸探针技术是最早运用到临床实践中的分子生物学技术，其原理是选择某一组病原体特异的基因序列，进行克隆、合成，然后用作探针，探针与临床标本中的靶DNA或靶RNA杂交，核酸探针与靶核酸互补序列的结合有高度特异性，可在种或高于或低于种的水平鉴定病原体。常用核酸探针杂交方式中反应速度最快的是（）
- A、固相－液相杂交
- B、原位杂交
- C、液相－液相杂交
- D、液相－固相杂交
- E、荧光原位杂交
相似问题和答案
第1题：
病毒的分子生物学鉴定包括病毒核酸和蛋白质测定，蛋白质测定可使用
A、免疫测定技术、电泳技术和质谱技术等
B、免疫测定技术、探针技术和质谱技术等
C、免疫测定技术、电泳技术和聚合酶链反应技术等
D、免疫测定技术、电泳技术和杂交技术等
E、免疫测定技术、电泳技术和探针技术等
第2题：
PCR技术的本质是
A、核酸杂交技术
B、核酸重组技术
C、核酸扩增技术
D、核酸变性技术
E、核酸连接技术
第3题：
A.核酸分子杂交技术
B.DNA测序技术
C.PCR技术
D.DNA重组技术
E.以上全是
第4题：
核酸原位杂交是（）
- A、核酸分子杂交技术与组织细胞化学和免疫组织化学结合起来的一种杂交方法
- B、基本原理及探针的标记方法与传统核酸分子杂交技术相同
- C、不能确定与探针互补的核酸序列在细胞内的空间位置
- D、不需要将核酸从细胞中提取出来
正确答案:A,B,D
第5题：
核酸探针常用的酶促标记技术有哪几种？
正确答案:缺口平移、DNA快速末端标记、用T4多核苷酸激酶(PNK)标记DNA5’末端、随机引物延伸(DNA聚合酶或反转录酶)、聚合酶链式反应(PCR，用于大规模检测和非放射性标记)。
第6题：
分子生物学实验中常用到的PCR技术，其全称是( )。
A、酶联免疫检测
B、免疫印记技术。
C、放射免疫技术
D、多聚酶链扩增反应
E、探针杂交
第7题：
B.免疫测定技术、电泳技术和探针技术
C.免疫测定技术、探针技术和杂交技术
D.免疫测定技术、电泳技术和质谱技术
E.质谱测定技术、电泳技术和杂交技术
第8题：
核酸探针技术是最早运用到临床实践中的分子生物学技术，其原理是选择某一组病原体特异的基因序列，进行克隆、合成，然后用作探针，探针与临床标本中的靶DNA或靶RNA杂交，核酸探针与靶核酸互补序列的结合有高度特异性，可在种或高于或低于种的水平鉴定病原体。影响探针杂交特异性的主要因素是A、温度
B、特异性探针
C、载体
D、标志物
E、核酸片段大小
常用核酸探针杂交方式中反应速度最快的是A、固相－液相杂交
B、原位杂交
C、液相－液相杂交
D、液相－固相杂交
E、荧光原位杂交
问题 2 答案：C
第9题：
分子生物学技术主要包括（）、核酸杂交、寡核苷酸指纹图谱、（）等。
正确答案:聚合酶链式反应即PCR；限制性片段长度多态性
第10题：
简述Taqman探针技术的原理。
正确答案: Taqman探针法是高度特异性的定量PCR技术，其核心是利用Taq酶的5’→3’外切核酸酶活性，切断探针，产生荧光信号，由于探针与模板是特异性结合，所以荧光信号的强弱就代表了模板的数量。在TaqMan探针法的定量PCR反应体系中，包括一对PCR引物和一条探针。探针只与模板特异性的结合，其结合位点在两条引物之间。探针的5’端标记有报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团，当探针完整的时候，报告基因所发出的荧光能量被淬灭集团吸收，仪器检测不到信号。随着PCR的进行，Taq酶在链延伸过程中遇到与模板结合的探针，其5’→3’外切核酸酶活性就会将探针切断，报告基团远离淬灭基团，其能量不被吸收，即产生荧光信号。所以，每经过一个PCR循环，荧光信号也和目的片段一样，有一个同步指数增长的过程。信号强度就代表了模板DNA的拷贝数。
根据其3，端标记的荧光猝灭基团的不同分为：普通的Taqman探针和TaqmanMGB探针。