简述采集可疑食品的操作、贮藏和运输过程中的原则及注意要点。

参考答案：1．采样应注意：疾病发病后应尽快采集如下标本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔冲洗液等，以及急性期（病后1周内）和恢复期（病后3～4周）血清标本。实施气管插管的病人也应收集气管吸取物。标本应置于无菌病毒采样液中，并立即用冰块或冰排保存或置于4℃（冰箱），并马上送至全国流感监测网络实验室或"传染病监测技术平台"项目相关网络实验室进行甲型H1N1流感病毒的病原学检测。不具备检测能力的省份，应按照生物安全的有关规定，尽快将标本送中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所检测。2．标本的采集种类和要求临床标本的采集：(1)采集对象：所有甲型流感(H1N1)疑似病例均应采集上呼吸道标本进行H1N1病毒的相关检测。(2)采集种类：鼻咽拭子/吸取物或者鼻腔冲洗液/吸取物。如果不能收集这些标本，可合并鼻拭子与口咽拭子。气管插管的病人也应收集气管吸取物。标本应置于无菌病毒运输液(VTM)中，并立即用冰块或冰排保存或置于4℃（冰箱），并马上运送至实验室检测。3．采集可疑标本样品的操作、贮藏和运输过程中的注意要点(1)拭子：应使用头部为合成纤维的拭子（如聚酯纤维），用铝或塑料做杆。不推荐棉拭子和木杆。不能用海藻酸钙做的拭子收集标本。标本采集管应包含3ml病毒运输液。(2)采样管：外螺旋口，耐﹣70℃冻存。(3)采样液：含有蛋白质稳定剂，阻止细菌和真菌生长的抗生素，缓冲液（可使用Hank液或Eagle液等培养液加入抗生素和0.5%BSA）。(4)临床标本储存：所有呼吸道标本应保存在4℃，并尽快放置在﹣70℃。如果没有﹣70℃冰箱，标本应保存在4℃，但不应超过4天。(5)临床标本运输：应按照A类包装要求进行样品的包装，所有标本应标示清楚。疑似病例标本运送应包含的信息请参照禽流感标本运输。4．检测实验室工作人员生物安全防护个人防护装备要求(1)呼吸防护装备--检测合格的N95呼吸器或更高级别的防护装备；(2)鞋套；(3)前封式手术服；(4)双层手套；(5)眼部防护装备（护目镜或面罩）。5．检测实验室生物安全防护要求(1)采集疑似感染A(H1N1)型猪流感病毒的患者临床标本、进行标本处理、包装、诊断性检测及进行病毒分离的工作人员必须进行严格的安全防护。(2)所有的涉及病例标本的实验操作（包括样本的处理、包装及包装拆除）必须在生物安全柜内进行。(3)临床标本的实验活动（病毒分离除外）必须在BSL-2实验室内进行。(4)病毒分离、鉴定必须在BSL-3实验室内进行。

参考答案：HIV检测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。目前HIV实验室检测项目主要是HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+／CD8+T淋巴细胞测定。检测目的不同，所使用的样品的采集、处理以及运送有不同的要求。1．一般来讲采样应注意 采血量、采血类型、抗凝剂的添加种类、储存方法，同时做好完整采样记录。2．采集可疑血样的操作过程、贮藏和运输过程中的注意要点。(1)若进行HIV抗体、抗原检测，常用的样本是血清或血浆：1)血清样品采集和处理：用一次性注射器或真空采血管抽取3～5ml静脉血，室温放置1～2小时，待血液凝固、血块收缩后再离心，尽可能地吸出血清备用。2)血浆样品采集和处理：抗凝剂最常用的是KEDTA，用一次性注射器抽取3～5ml静脉血，转移至加有抗凝剂的试管，或直接用加有抗凝剂的真空采血管，反复轻摇，室温放置，血浆和血细胞会分层，尽可能地吸出血浆备用。3)送检要求：经HIV初筛实验室进行初筛检测后，若需上送的样品，只送血清或血浆，标本量要求达到1ml，最少不能低于0.7ml，不符合要求的标本将可能被拒收。标本用螺口的血清管装，在管外标记好病人姓名；每份标本需填写"HIV复检送检单"，表格内资料要填写齐全，送检时与标本分开放置。应采用WHO提出的三级包装系统：第一层容器：装样品，要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。随样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。第二层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理。第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。在第三层容器外面要贴标签（数量，收、发件人）。(2)若进行HIV核酸定性检测最常用的是血清、血浆或血细胞：1)血清样品采集和处理：同上述血清样品采集和处理。2)血浆和血细胞样品采集和处理：抗凝剂最常用的是K2 EDTA，采集的抗凝血应在4～8小时内分离PBMC和血浆，否则应在24～48小时内分离血浆和血细胞。3)样品的运送和保存：4℃冷冻送检采集的抗凝全血，采集后务必在24小时内送到目的实验室。分离出的血清、血浆、血细胞、PBMC均立即放入-80℃冰箱备用。样品的包装采用WHO提出的三级包装系统。(3)若进行HIV核酸定量（病毒载量）测定最常用的是血浆：1)抗凝剂的选择：不同病毒载量检测方法选用不同的抗凝剂，最通用的是K EDTA。2)血浆样品采集和处理：同上。3)样品的运送和保存：同上。(4)若进行CD4+和CD8+T淋巴细胞检测使用的样品是抗凝全血：1)抗凝剂的选择：最常用的是K EDTA。2)抗凝全血的采集：用一次性注射器抽取3～5ml静脉血，转移至加有抗凝剂的试管，或直接用加有抗凝剂的真空采血管，采血后立即握住试管两端颠倒混匀数次，将血液与抗凝剂充分混匀，以防止凝固，但用力不可太猛，避免溶血。3)样品的运送和保存：尽可能快地在24小时内将样品送至目的实验室。在室温下(18～23℃)保存和运送样品，避免过冷和过热，一般春、秋、冬季无需冷藏，天气太热时，需要用一个隔热的容器装样品，并且把这个容器放于另一个有冰袋和吸热物质的容器中。样品的包装采用WHO提出的三级包装系统。

参考答案：1．采样的对象、采样时间、采样种类要求(1)采集对象：禽流感病人，疑似病人，根据需要可采集人禽流感密切接触者。(2)采集标本的种类：疑似禽流感患者的咽、鼻拭子或含漱液、血清、粪便以及死亡病例的尸检肺组织、气管分泌物、其他脏器。(3)采集标本时间1)咽、鼻拭子或含漱液、粪便在发病后头3天内采集。2)急性期血清在发病后7天内采集，恢复期血清在发病后2～4周采集。3)尸检标本尸检时采集。2．可疑标本采样时注意事项(1)病毒分离标本：应采集发病后3天内相关标本进行分离病毒。标本采集后应立即放入适当的采样液中低温保存，常用的采样液为：普通肉汤，pH7.4～7.6的Hank液、Eagle液或水解乳蛋白液。在采样液中需加入抗生素，抗生素多用青、链霉素(1000U/ml)，庆大霉素(其终浓度为1mg/ml)和制霉菌素(终浓度为50μg/ml)。主要的采集样本的方法有以下几种：1)鼻拭子：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入4～5ml采样液中，尾部弃去。2)咽拭子：用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，同样将棉签头浸入4～5ml采样液中，尾部弃去。3)鼻咽抽取物：用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取黏液。先将收集器头部插入鼻腔，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出。收集抽取的黏液，并用采样液涮洗收集器3次。4)鼻洗液：患者取坐姿，头微后仰，用移液管将1～1.5ml洗液注入一侧鼻孔，嘱患者同时发K音以关闭咽腔。然后让患者低头使洗液流出，用平皿或烧杯收集洗液。重复此过程数次。洗两侧鼻孔最多可用10～15ml洗液。5)漱口液：用10ml洗液漱口。漱口时让患者头部微后仰，发"噢"声，让洗液咽部转动。然后，用平皿或烧杯收集洗液。注：取鼻洗液和漱口液时，需预先了解患者是否对抗生素有过敏史，如有则洗液和含漱液中不应含有抗生素。6)肺活检材料：肺活检组织在无菌条件下，用灭菌过的乳钵磨碎，用生理盐水配成20%悬液，2000转/分离心10分钟，取上清液加入上述提到的抗生素。7)粪便标本：采集10～20g粪便（或用塑料杆人造纤维头的肛拭子2支）放入含有10mlPBS或生理盐水无菌的50ml有螺旋盖的塑料瓶内，密封，4℃环境下立即送至有关实验室。(2)血清标本：血清标本应包括急性期和恢复期双份血清5～10ml。急性期血样应尽早采集，一般不晚于发病后7天。恢复期血样则在发病后2～4周采集。血液标本2000～2500转/分离心15分钟。收集血清，血清可在4℃存放1周，长期保存置﹣20℃。3．采集可疑标本样品的包装和运输过程中的注意要点(1)禽流感病例（包括疑似禽流感病例）标本必须放在大小适合的带螺旋盖且盖内有橡胶圈的塑料管里（一级容器），拧紧。(2)将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封；每袋装一份标本。(3)直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。(4)同时也将标本有关信息填在禽流感人体标本送检表中，连同一级容器封于塑料袋内。(5)将装标本的密封袋放入二级带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器内，拧紧盖，在容器上标明有关信息。(6)将二级容器摆放在专用运输箱内（或疫苗运输箱），放入冰排，然后以柔软物质填充，并密封。1)同一患者2份以上的密封标本，可以放在同一个二级容器内。2)二级容器要承受不少于95kPa的压力，内衬具吸水和缓冲能力的物质。3)若进行病毒分离，可将密封好的装有标本的一级容器直接放入液氮运输罐内运输。4)所有容器必须印有危险生物标注。5)标本需由专人（2人）运送，不得邮寄，最好使用专车。(7)标本的运送：采集的标本若不能在24小时内送达，则应尽快在﹣70℃以下保存。无﹣70℃条件的需在﹣20℃冰箱短时间暂存，并尽快联系递送标本。

参考答案：1．初步诊断食物中毒。诊断依据：(1)中毒病人在相近的时间内均食用过共同的可疑食品；(2)病人临床症状基本相同；(3)潜伏期短、发病集中等。2．采集可疑食品的操作、贮藏和运输过程中应注意：(1)可疑食品采集过程中应注意无菌操作；(2)样品贮藏和运输过程中应注意及时送检，不能及时送检时应冷藏保存。3．食物中毒调查报告的主要内容：(1)食物中毒发生经过；(2)临床和流行病学特点、治疗和病人预后情况；(3)分析和结论（引起中毒的食品，致病因素，中毒暴发的原因与条件，检验结果，最后诊断）；(4)控制和预防措施。4．个案调查表：(1)被调查者的一般情况（姓名、性别、年龄、住址等）；(2)发病情况（发病时间及主要症状等）及治疗情况；(3)发病前24～48小时内食物摄入情况；(4)临床及实验室检验结果；(5)调查时间、调查地点、调查人。5．应采集的样品：(1)剩余的瓶装消毒酸奶（学校发剩的、学生喝剩的及领到未喝的，工厂库存的同一批号的）；(2)病人的呕吐物、粪便、血液、尿液；(3)食品加工用具、容器的涂抹；(4)食品加工人员手涂抹。6．现场调查内容：(1)中毒病人和同一场所进餐者的个案调查；(2)对可疑中毒食品加工和贮存场所的现场卫生学调查。7．初步诊断：细菌性食物中毒。8．接到报告后，应采取的措施：(1)及时报告上级卫生行政部门；(2)对病人采取急救措施（解毒、排毒、对症治疗等）；(3)对可疑有毒食品采取控制处理措施（封存、追回、无害化处理等）；(4)对中毒场所的处理措施：根据食物中毒的性质，对中毒场所采取相应的措施。9．调查方案：(1)调查目的；(2)调查方法；(3)调查内容；(4)调查表格的设计。

参考答案：1．你认为采样应注意哪些问题？疾病发病后应尽快采集如下标本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔冲洗液等，以及急性期（病后1周内）和恢复期血清（病后3～4周）标本。实施气管插管的病人也应收集气管吸取物。标本应置于无菌病毒采样液中，并立即用冰块或冰排保存或置于4℃（冰箱），并马上送至全国流感监测网络实验室或"传染病监测技术平台"项目相关网络实验室进行甲型H1N1流感病毒的病原学检测。不具备检测能力的省份，应按照生物安全的有关规定，尽快将标本送中国疾病预防控制中心病毒病所检测。2．标本的采集种类和要求(1)采集对象：所有甲型流感(H1N1)疑似病例应该采集上呼吸道标本来进行H1N1病毒的相关检测。(2)采集种类：鼻咽拭子／吸取物或者鼻腔冲洗液／吸取物。如果不能收集这些标本，可合并鼻拭子与口咽拭子。气管插管的病人也应收集气管吸取物。标本应置于无菌病毒运输液(VTM)，并立即用冰块或冰排保存或置于4℃（冰箱），并马上运送至实验室。3．采集可疑标本样品的操作过程、贮藏和运输过程中的注意要点(1)拭子：应使用头部为合成纤维的拭子（例如，聚酯纤维），用铝或塑料做杆。不推荐棉拭子和木杆。不能用海藻酸钙做的拭子收集标本。标本采集管应包含3ml病毒运输液。(2)采样管：外螺旋口、耐-70℃冻存。(3)采样液：含有蛋白质稳定剂，阻止细菌和真菌生长的抗生素，缓冲液(可使用Hank或Eagle等培养液加入抗生素和0.5%BSA)。(4)临床标本储存：所有呼吸道标本应保存在4℃，并尽快放置在- 70℃。如果没有-70℃冰箱，标本应保存在4℃，但不应超过4天。(5)临床标本运输：应按照A类包装要求进行样品的包装，所有标本应标示清楚。疑似病例标本运送应包含的信息请参照禽流感标本运输。4．检测实验室工作人员生物安全防护个人防护装备要求。(1)呼吸防护装备--检测合格的N95呼吸器或更高级别的防护装备。(2)鞋套。(3)前封式手术服。(4)双层手套。(5)眼部防护装备（护目镜或面罩）。5．检测实验室生物安全防护要求(1)采集疑似感染A(HINl)型猪流感病毒的患者临床标本、进行标本处理、包装、诊断性检测及进行病毒分离的工作人员必须进行严格的安全防护。(2)所有的涉及病例标本的实验操作（包括样本的处理、包装及包装拆除）必须在生物安全柜内进行。(3)临床标本的实验活动（病毒分离除外）必须在BSL-2实验室内进行。(4)病毒分离、鉴定必须在BSL-3实验室内进行。