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说明PCR的基本原理、PCR体系的基本组成及其作用。

题目

说明PCR的基本原理、PCR体系的基本组成及其作用。

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相似问题和答案

第1题:

对于极微量的靶序列的扩增可以采用的PCR技术是

A、通用引物-PCR方法(general primermediated PCR,CJP-PCR)

B、多重PCR(multiplex PCR)

C、套式PCR(nestcd primers-polymerasc chain reaction,NP-PCR)

D、AP-PCR方法(arbitrarily primcd PCR)

E、原位PCR技术(in situ PCR,ISPCR)


参考答案:C

第2题:

简述PCR循环测序的基本原理。


本题答案:PCR技术能够快速、特异性地扩增靶DNA,应用PCR技术测定DNA序列分为两个步骤:先利用PCR扩增靶序列片段,制备测序模板,然后再利用PCR直接测定序列。PCR测序采用了热循环高效合成DNA的特性并结合双脱氧核苷酸终止法,使引物链终止的延伸产物数量在热循环过程中得到增加,因此称为循环测序。
每个测序循环包括:
①PCR扩增制备的模板DNA变性成单链形式;
②标记引物与其中的一条链上的互补序列退火;
③退火后的引物在耐热DNA聚合酶催化下发生链延伸终止反应。
本次循环产生的模板链与延伸终止链形成的双链的产物,在下一轮测序循环中,再次被变性,释放出模板链,作为又一轮引发反应的模板,同时积累下一轮循环产生的链终止产物。
上述循环步骤重复20~40次,使链终止产物以线性方式获得扩增。

第3题:

对于极微量的靶序列的扩增可以采用的PCR技术是

A、通用引物-PCR方法(general primer-media-ted PCR,GP-PCR)

B、多重PCR(multiplex PCR)

C、套式PCR(nested primers-polymerase chain reaction,NP-PCR)

D、AP-PCR方法(arbitrarily primed PCR)

E、原位PCR技术(in situ PCR,ISPCR)


参考答案:C

第4题:

在固定容积的PCR反应体系中,加入越多的模版,PCR反应的效果就会越好。()


正确答案:错误

第5题:

下列关于组成PCR反应体系的基本成分的叙述中不正确的是( )

A.模板DNA
B.特异性引物
C.
D.四种dNTP

答案:C
解析:

第6题:

简述标准的PCR反应体系。


参考答案:


第7题:

简述PCR基本原理。


本题答案:PCR技术是模拟生物体内DNA的半保留复制,在体外合成DNA链的方法,在模板、DNA、引物、dNTP、Taq酶存在的条件下经过:
“高温变性→低温退火→中温延伸”三步循环,获得大量扩增片段。

第8题:

对于极微量的靶序列的扩增可以采用下列哪种PCR技术?( )

A、AP-PCR方法(arbitrarily primed PCR)

B、通用引物-PCR方法(general primer-mediated PCR,GP-PCR)

C、套式PCR(nested primers-polymerase chainreaction,NP-PCR)

D、多重PCR(multiplex PCR)

E、原位PCR技术(in situ PCR,ISPCR)


参考答案:C

第9题:

PCR聚合酶链式反应体系的基本成分由耐热的DNA聚合酶、引物、 dNTP、 Mg2+、缓冲液、模板组成。


正确答案:正确

第10题:

简述PCR原理及其基本反应步骤。


正确答案:PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:
①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板互补的DNA链。