工学
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相似问题和答案
第1题：
PCR技术循环过程:()。
参考答案：变性、退火、延伸
第2题：
下面关于多聚酶链式反应（PCR）的叙述正确的是（）
- A、PCR过程中需要引物，是为了使DNA双链分开
- B、PCR的循环过程分为变性、复性和延伸三步
- C、PCR过程中DNA合成方向是3’到5’
- D、PCR过程中边解旋边复制
正确答案:B
第3题：
PCR即聚合酶链反应，由变性、退火、引物延伸三个基本反应组成的循环性过程。（）
参考答案：对
第4题：
PCR的中文全称是（），英文全称是（），基本过程包括（）、（）和（）三个阶段。
正确答案:聚合酶链式反应；Polymerase Chain Reaction；变性；退火；延伸
第5题：
说明PCR的基本原理、PCR体系的基本组成及其作用。
正确答案:该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下，依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板，借助一小段双链DNA来启动合成，通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合，形成部分双链。在适宜的温度和环境下，DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3´-OH末端，并以此为起始点，沿模板5´→3´方向延伸，合成一条新的DNA互补链。
PCR反应的基本成分包括：模板DNA（待扩增DNA）、引物、4种脱氧核苷酸（dNTPs）、DNA聚合酶和适宜的缓冲液。类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的高温变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的低温退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的适温延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性-退火-延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
第6题：
简述PCR及扩增基因的基本过程。
正确答案:P.CR扩增基因的基本过程类似于体内细胞分裂中的半保留复制：
1.高温变性加热使DNA解链成两股单链（变性）。
2.低温退火降温使这两股单链按碱基互补的原则分别与引物结合（引物是人工合成的寡核苷酸，一般约15－25个碱基）。
3.中温延伸在DNA聚合酶的作用下，使游离的单核苷酸沿着引物的3’端，按碱基配对的原则延伸，形成两条与模板DNA互补的新链。
重复上述过程，经过25-35个循环，可使所需基因放大几百万倍。
第7题：
PCR技术的过程包括（）。
正确答案:变性、退火、延伸
第8题：
简述PCR基本原理。
本题答案：PCR技术是模拟生物体内DNA的半保留复制，在体外合成DNA链的方法，在模板、DNA、引物、dNTP、Taq酶存在的条件下经过：
“高温变性→低温退火→中温延伸”三步循环，获得大量扩增片段。
“高温变性→低温退火→中温延伸”三步循环，获得大量扩增片段。
第9题：
试述PCR基本技术过程中引物设计的原则。
正确答案: （1）引物的长度一般15～30bp；
（2）引物扩增跨度：以500bp为宜，特定重要条件下可扩增长至10kb的片段；
（3）引物碱基：G+C含量以40%～60%为宜，A、T、G、C最好随机分布，避免5个以上的嘌吟或嘧啶核苷酸的成串排列；
（4）避免引物内部出现二级结构：避免两条引物间互补，特别是3′端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异性的扩增条物；
（5）引物3′端的碱基必须与模板严格配对，而且尽量不要为A，最好选择T，因为3′端末位为T时错配几率大大降低；
（6）产物有或能加上合适的酶切位点；
（7）被扩增的靶序列最好有适宜的酶切点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。
第10题：
简述PCR的基本过程。
正确答案:P.CR是polymerase chain reaction的英文缩写，是一种在体外特异扩增目的DNA片段的技术，以其显著的三大特点即特异性、高效率和忠实性，在生命科学研究中产生了巨大的影响。PCR技术全过程包括三个基本步骤，即：
1.加热变性，双链DNA解离成单链DNA；
2.退火：降温，引物与DNA单链互补配对，形成杂交链。
3.延伸：Taq DNA聚合酶催化引物沿着模板DNA延伸。
如此三步构成一次循环，每完成一个循环就基本上使目的DNA产物增加一倍，在经30～40次循环后，可以使特异性DNA的扩增率达到数百万倍（≥2×106）。