工学
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相似问题和答案
第1题：
下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是（）
A可用包埋法制备固定化酵母细胞
B反应产物对固定化酶的活性没有影响
C葡萄糖异构酶固定前后专一性不同
D固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应
A
略
第2题：
固定化细胞与固定化酶相比的优点？
正确答案: 固定化细胞与固定化酶相比有如下优点：
不需破碎细胞而直接利用胞内酶，制备成本低；酶在细胞内较稳定，细胞固定化后酶活力损失少；尤其是M细胞内的多酶系统，用固定化细胞技术更易实现。
第3题：
如何评价固定的效果?
正确答案：1.固定牢靠，有效，松紧适宜。2.局部血液循环良好，无肢端肿胀、疼痛、青紫，脉搏搏动正常。3.局部感觉正常，无发麻及感觉异常。
第4题：
简述固定化对酶性质的影响（固定化酶的性质）。
正确答案:（1）稳定性大多数酶固定化后，稳定性都增强，操作寿命和保存寿命也延长。
（2）固定化酶的最适温度和最适pH固定化后，大多数酶的热稳定性提高，所以最适温度也随之提高。酶固定化后，对底物作用的最适pH和酶活力－pH曲线常常会发生偏移。带负电荷的载体固定化的酶的最适pH向碱性偏移，带正电荷的载体固定化的酶的最适pH向酸性偏移。
（3）固定化酶的动力学特征固定化酶的表观米氏常数Km随载体的带电性能变化。
（4）固定化酶的专一性酶固定化后，一般不会改变其专一性。但也有少数情况酶固定化后专一性会发生改变。
第5题：
如何制定固定化酶？
正确答案: 1、载体结合法：共价结合法，离子吸附法，物理吸附法。
2、胶连法：双功能试剂。
3、包埋法：聚合物包埋法，微胶囊包埋法。
第6题：
简述固定化酶、固定化细胞制备方法及特点。
正确答案: 固定化酶与固定化细胞都是以酶的应用为目的，所以两者的制备法基本相同，均包括下面的四种方法：
包埋法、吸附法、共价偶联、非共价结合法
一、
包埋法的优点：反应条件温和，很少改变酶结构但是又较牢固的固定化方法。
包埋法的缺点：只有小分子底物和产物可以通过高聚物网架扩散，对那些底物和产物是大分子的酶并不适合。
二、
吸附法的优点：操作简单，可供选择的载体类型多，吸附过程可同时达到纯化和固化的目的，固定化酶使用失活后可以重新活化和再生。
吸附法的缺点：酶和载体的结合力不强，易脱落， 会导致催化活力的丧失和沾污反应产物。
三、
共价偶联法的优点：得到的固定化酶结合牢固，稳定性好，利于连续使用。
共价偶联法的缺点：载体活化的操作复杂，反应条件激烈，同时共价结合会影响到酶的空间构象，从而对酶的催化活性产生影响。
四、
非共价结合法的优点：载体是酶蛋白本身，结合力强，能提高非常高的酶浓度
非共价结合法的优点：难制备，不能再生，固定化费用高。
第7题：
固定化酶的评价指标不包括（）
- A、相对酶活力
- B、固定化酶的含量
- C、酶的活力回收率
- D、固定化酶的半衰期
正确答案:B
第8题：
固定化酶及固定化酶的特点。
参考答案：酶类可粗分为天然酶和修饰酶，固定化酶属于修饰酶，修饰酶类还包括经过化学修饰的酶和用分子生物学方法在分子水平上进行改良的酶等。固定化酶最大特点是既具有生物催化剂的功能，又具有固相催化剂的特性。
固相酶还具有以下优点：①可多次使用，而且在多数情况下，酶的稳定性提高。如固定化的葡萄糖异构酶可以在60~65℃条件下连续使用超过1000h;
②反应后，酶与底物和产物易于分开，产物中无残留酶，易于纯化，产品质量高;
③反应条件易于控制，可实现转化反应的连续化和自动控制;
④酶的利用效率高，单位酶催化的底物量增加，用酶量减少;
⑤比水溶性酶更适合于多酶反应。
固相酶还具有以下优点：①可多次使用，而且在多数情况下，酶的稳定性提高。如固定化的葡萄糖异构酶可以在60~65℃条件下连续使用超过1000h;
②反应后，酶与底物和产物易于分开，产物中无残留酶，易于纯化，产品质量高;
③反应条件易于控制，可实现转化反应的连续化和自动控制;
④酶的利用效率高，单位酶催化的底物量增加，用酶量减少;
⑤比水溶性酶更适合于多酶反应。
第9题：
何谓固定化酶？固定化酶的特性与游离酶的比较有哪些改变？
正确答案:固定化酶是指固定在一定载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶。
固定化酶既保持了酶的催化功能，又克服了游离酶的不足之处，具有提高酶的催化效率，增强稳定性，可反复或连续使用以及易于和反应产物分开等显著优点。固定化酶与游离酶比较，其催化特性主要有下列变化：
（1）固定化酶的稳定性一般比游离酶的稳定性好，主要表现在：对热稳定性提高，可以耐受较高的温度；保存稳定性好，可以在一定条件下保存较长时间；对蛋白酶的抵抗性增强，不易被蛋白酶水解；对变性剂耐受性提高，在尿素、有机溶剂和盐酸胍等蛋白质变性剂的作用下，仍可保留较高的酶活力等。
（2）固定化酶的最适作用温度一般与游离酶差不多，活化能也变化不大，但也有些固定化酶的最适温度与游离酶比较会有较明显的变化。
（3）酶经过固定化后，其作用的最适pH往往会发生一些变化。
（4）固定化酶的底物特异性与游离酶比较可能有些不同，其变化与底物相对分子质量的大小有一定关系。对于那些作用于低分子底物的酶，固定化前后的底物特异性没有明显改变。而对于那些可作用于大分子底物，又可作用于小分子底物的酶而言，固定化酶的底物特异性往往会发生变化。
第10题：
如何评价一个酶固定化过程的优劣？
正确答案:固定化酶的评价指标
1.固定化酶的活力：基本与游离酶相似，但固定化酶一般用重量或单位表面积来表示，如μmol/（min.mg）或μmol/（min.cm2）
A.振荡测定法：称取一定量的固定化酶，加入一定量的底物溶液，一边振荡或搅拌，一边进行催化反应，取出一定量的反应液进行酶活力测定。
B.酶柱测定法：将一定量的固定化酶装进具有恒温装置的反应柱中，让底物溶液以一定的流速流过酶柱，收集流出的反应液，测定其中产物的生成量或底物的消耗量
C.连续测定法：利用连续分光光度法等测定方法可以对固定化酶反应液进行连续测定，从而测定固定化酶的酶活力。
2.偶联效率：以载体结合蛋白量（或酶活）占总蛋白量（或总酶活）的百分比。
3.活力回收：固定化酶所显示活力占总溶液酶活力的百分数。
4.相对活力：经固定化后固定化酶所显示活力占被固定的等蛋白量溶液酶活力的百分比。
5.固定化酶的半衰期：在连续测定条件下，固定化酶的活力下降为最初活力一半所经历的时间。可以用实测法或公式推算法。