工学

问答题评价固定化酶固定效果的参数有哪些?

题目
问答题
评价固定化酶固定效果的参数有哪些?
参考答案和解析
正确答案: 由于选用的固定化方法不同,固定化酶的活力和性质也有所不同,因此需要对不同的固定化方法进行评价。评价的指标主要有:
(1)固定化酶的比活
每克(毫克)干固定化酶所具有的酶活力单位。或:单位面积(cm2)的酶活力单位表示(酶膜、酶管、酶板)。
(2)操作半衰期
是衡量稳定性的指标。指在连续使用的条件下,固定化酶活力下降为最初活力一半所需要的时间(t1/2)。固定化酶的操作半衰期是影响其实际应用的重要因素。
(3)偶联效率=(加入的蛋白量-溶液中残留的蛋白量)/加入的总蛋白量×100%
(4)活力回收=(固定化酶活力/投入的总酶活力)×100%
(5)相对酶活力具有相同酶蛋白量的固定化酶活力与游离酶活力的比值。
(6)酶载量单位载体所固定的酶活力(或酶蛋白量)。
(7)酶的固定化效率与酶的活力回收率;酶的固定化效率:是指酶与载体结合的百分率。酶活力回收率:指固化酶的总活力与用于固化酶的总酶活力的百分率。
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相似问题和答案

第1题:

共价结合制备固定化酶的方法有哪些?


正确答案:重氮化、迭氮化、酸酐活化法、异硫氰酸酯法、双功能试剂臣应、澳化氰活化法、硫交换法、醛胺缩合法、四元缩合法、金属整合法、醚氯反应、异氰酸反应、烷基化反应及硅烷化反应等。

第2题:

与游离酶相比较,固定化酶的性质有哪些变化?


正确答案:(1)酶活性的影响:酶活性下降,反应速率下降;
(2)酶稳定性的影响:操作稳定性提高,贮存稳定性比游离酶大多数提高,热稳定性大多数提高但有些反而降低,对分解酶的稳定性提高,pH稳定性提高明显优于游离酶,对有机溶剂的稳定性提高;
(3)pH的变化:改变酶的空间构象,影响酶的催化基团的解离,影响酶的结合基团的解离,改变底物的解离状态(酶与底物不能结合或结合后不能生成产物);
(4)最适温度变化:随热稳定性的提高,最适温度随之提高,少数例外最适温度下降,活性或其他因素会改善;
(5)底物特异性变化:专一性会发生不同程度的变化,作用于小分子底物的酶特异性没有明显变化,既可作用于小分子底物又可作用于大分子底物的酶特异性往往会变化;
(6)米氏常数Km的变化,Km值随载体性质变化:Km升高,酶与底物的亲和力降低,带电载体与底物之间的静电作用会引起底物分子在扩散层和整个溶液之间不均一分布。

第3题:

简述固定化酶有哪些优点?


正确答案:(1)可以多次使用,而且在多数情况下,酶的稳定性提高。
(2)反应后,酶和底物和产物易于分开,产物中无残留酶,易于纯化,产品质量高。
(3)反应条件易于控制,可实现转化反应的连续化和自动控制。
(4)酶的利用效率高,单位酶催化的底物量增加,用酶量减少。
(5)比水溶性酶更适合于多酶反应。

第4题:

什么是固定化酶,它们用于生产有哪些优点.


正确答案:固定化酶:水溶性酶通过物理和化学的方法,使之与不溶性载体结合形成的一种不再溶解的酶。
优点:①极易将固定化酶与底物、产物分开,产物溶液中没有酶的残留,简化了提纯工艺;②可以再较长时间内反复使用,有利于工艺的连续化、管道化;③酶反应过程可以严格控制,有利于工艺自动化和微电脑化;④在绝大多数情况下提高了酶的稳定性;⑤较能适应于多酶反应;⑥酶的使用效率提高,产物得率提高,产品品质有保障,成本低.

第5题:

酶的固定化方法有哪些?各自的优缺点是什么?


正确答案:方法有:吸附法、共价结合法、交联法。
吸附法优点:操作简便,条件温和,吸附剂可反复使用。
缺点:酶和载体吸附力较弱,易解吸脱落;
共价结合法优点:酶与载体结合牢固,不会轻易脱落,可连续使用。
缺点:反应条件较激烈,易影响酶的空间构象而影响酶的催化活性。
交联法优点:操作简便,结合牢固,可长时间使用。
缺点:交联反应条件较激烈,酶分子的多个基团被交联,致使酶活力损失较大,且制成的固定化酶颗粒较小,机械强度也较低。

第6题:

固定化酶反应器有哪些?


正确答案: (1)搅拌罐型反应器;
(2)固定床型反应器;
(3)流化床型反应器;
(4)膜型反应器;
(5)鼓泡塔型反应器。

第7题:

酶的固定化方法有哪些?


正确答案: A.吸附法
(1)物理吸附法;
(2)离子吸附法;
B.化学结合法
(1)共价结合法;
(2)共价交联法;
C.包埋法
(1)凝胶网格型;
(2)微囊型。

第8题:

简述酶和细胞的固定化方法有哪些?各有哪些特点?


正确答案:(1)载体结合法:是将酶结合于不溶性载体上的一种固定化方法。可分为物理吸附法,离子结合法,共价结合法。
物理吸附法:优点在于操作简单,可选用不同的吸附剂,酶失活后载体仍可再生。缺点在于最适吸附酶量无规律可循,酶与载体之间的吸附剂不强,酶易于脱落。
离子结合法:操作简单,处理条件温和,酶的活性中心不易被破坏。但是酶和载体的结合力比较弱,会发生酶脱落的现象。
共价结合法:酶和载体的结合力牢固,不会发生酶脱落。但反应条件苛刻,操作复杂,酶的活性中心会遭到部分破坏。
(2)交联法:优点是交联后的酶活性较高,缺点是反应条件剧烈,酶的回收率低。
(3)包埋法:不需要改变酶的高级结构,酶的回收率较高。但包埋酶会导致酶的失活,包埋法只适合作用于小分子底物和产物的酶,对于那些作用于大分子底物和产物的酶是不合适的。

第9题:

固定化酶的评价指标不包括()

  • A、相对酶活力
  • B、固定化酶的含量
  • C、酶的活力回收率
  • D、固定化酶的半衰期

正确答案:B

第10题:

何谓固定化酶?固定化酶的特性与游离酶的比较有哪些改变?


正确答案:固定化酶是指固定在一定载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶。
固定化酶既保持了酶的催化功能,又克服了游离酶的不足之处,具有提高酶的催化效率,增强稳定性,可反复或连续使用以及易于和反应产物分开等显著优点。固定化酶与游离酶比较,其催化特性主要有下列变化:
(1)固定化酶的稳定性一般比游离酶的稳定性好,主要表现在:对热稳定性提高,可以耐受较高的温度;保存稳定性好,可以在一定条件下保存较长时间;对蛋白酶的抵抗性增强,不易被蛋白酶水解;对变性剂耐受性提高,在尿素、有机溶剂和盐酸胍等蛋白质变性剂的作用下,仍可保留较高的酶活力等。
(2)固定化酶的最适作用温度一般与游离酶差不多,活化能也变化不大,但也有些固定化酶的最适温度与游离酶比较会有较明显的变化。
(3)酶经过固定化后,其作用的最适pH往往会发生一些变化。
(4)固定化酶的底物特异性与游离酶比较可能有些不同,其变化与底物相对分子质量的大小有一定关系。对于那些作用于低分子底物的酶,固定化前后的底物特异性没有明显改变。而对于那些可作用于大分子底物,又可作用于小分子底物的酶而言,固定化酶的底物特异性往往会发生变化。