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问答题有人用限制性内切核酸酶 EcoRl 分别切割松弛型质粒 ColEl 和严紧型质粒 pSCl01（各有一个切点），然后重组连接形成一个杂种质粒 pSCl34，请推测这种质粒有什么特性和用途。
题目
问答题
有人用限制性内切核酸酶 EcoRl 分别切割松弛型质粒 ColEl 和严紧型质粒 pSCl01（各有一个切点），然后重组连接形成一个杂种质粒 pSCl34，请推测这种质粒有什么特性和用途。
参考答案和解析
正确答案：
由于ColEl不能在缺失DNA聚合酶I的细菌中复制，所以在这种细胞中就使用pSCl01的复制起点。而质粒pSCl01不能在不合成蛋白质的细胞中复制，在这种情况下则使用ColEl的复制起点。一般情况下优先使用ColEl的复制起点。这种质粒由于具有两个复制起点，可以根据需要，选用不同的宿主菌，表达特定的外源基因。
解析：
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相似问题和答案
第1题：
下列有关质粒分子生物学的叙述，错误的是（）
- A、质粒是共价环状的双链DNA分子
- B、天然质粒一般不含有限制性内切酶的识别序列
- C、质粒在宿主细胞内能独立于染色体DNA自主复制
- D、松弛复制型的质粒可用氯霉素扩增
- E、质粒并非其宿主细胞生长所必需
正确答案:B
第2题：
CoLE1质粒载体是松弛型复制控制的（）。
正确答案:多拷贝质粒
第3题：
下面关于松弛型质粒(relaxedplasmid)性质的描述中，不正确的是 ( )
A、质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制的制约，因而有较多的拷贝数
B、在复制过程中，多使用DNA聚合酶I
C、可以在氯霉素作用下进行扩增
D、通常带有抗药性标记
E、同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子
参考答案：C
第4题：
质粒有（）和松弛型两种类型，在克隆基因中常用的是松弛型，在表达研究中常用的是严紧型。
正确答案:严紧型
第5题：
为了构建重组质粒pZHZ2，可利用限制酶E、F切割目的基因和质粒pZHZ1，然后用相应的酶连接下列叙述中错误的是（）
- A、基因工程的核心就是构建重组DNA分子
- B、质粒pZHZ2上存在RNA聚合酶结合的位点
- C、重组质粒pZHZ2只能被限制酶G、H切开
- D、质粒pZHZ1、pZHZ2复制时一定会用到DNA聚合酶
正确答案:C
第6题：
质粒单酶切点的基因连接如何降低本底和防止自我环化和提高连接效率？
正确答案: 目的基因片断与载体由相同的单一限制性核酸内切酶（如EcoRI）消化酶切后，两者的两端均具有相同的粘性末端，称为单酶切点的粘性末端，又称全同源性粘性末端。
高背景：载体经单一限制性核酸内切酶切割后，载体分子易于自我环化，既不利于目的基因的重组连接，大大降低阳性克隆效率，又可使非重组性载体造成高背景。为了防止载体的自我环化，通常用碱性磷酸酶去除载体粘性末端的5P以抑制DNA的自我环化。在连接反应中，具有5’-P，的目的基因DNA片断可有效地与去磷酸化质粒DNA载体通过粘性末端发生互补连接，尽管产生的重组DNA分子于连接点含有两个缺口的开环分子，尽管在转化时其转化效率高于线性低于闭和环，但转化大肠杆菌后，在菌体内其缺口可获得修复。
双向插入：经单一限制核酸内切酶（如EcoRI）切割的目的基因和载体，因二者的性末端是相同的，因此在连接反应中，目的基因可发生双向插入，载体对目的基因表达是有方向的，而目的基因可双向与之相连，这种连接若以克隆目的基因片段为目的没有影响，若以表达为目的，我们就要对插入的片段进行方向鉴定，因目的基因由起始密码子向终止密码子方向表达是定向转录的，一旦启动子与目的基因编码顺序方向相反就不能正确转录目的基因的mRNA。若构建表达DNA重组体选用双酶切切割目的基因和载体，可使目的基因与载体的连接发生定向连接重组，以便定向克隆。
第7题：
下列关于载体的叙述中，错误的是（）
- A、与目的基因结合后，实质上就是一个重组DNA分子
- B、对某种限制酶而言，最好只有一个切点，但还要有其他多种限制酶的切点
- C、目前常用的有质粒、噬菌体和动、植物病毒等
- D、具有某些标记基因，便于对其进行切割
正确答案:D
第8题：
ColEl是惟一用作基因工程载体的自然质粒，这种质粒（）
- A、是松弛复制型
- B、具有，四环素抗性
- C、能被氯霉素扩增
- D、能产生肠杆菌素
正确答案:A,D
第9题：
严谨型质粒
正确答案:细菌内复制受到严格控制的质粒，在细菌细胞内只能形成少量拷贝的质粒。
第10题：
基因工程菌中重组质粒的丢失机制是（）
- A、重组质粒渗透至细胞外
- B、重组质粒被细胞内核酸酶降解
- C、重组质粒在细胞分裂时不均匀分配
- D、重组质粒杀死受体细胞
- E、重组质粒刺激受体细胞提高其通透性
正确答案:C