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问答题说明 Southern 杂交的原理和方法。

题目
问答题
说明 Southern 杂交的原理和方法。
参考答案和解析
正确答案： 1975年Southern 建立起来的一种杂交方法，属固相—液相杂交。该法的主要特点是利用毛细现象将 DNA转移到固体支持物上，称为 Southern 转移或 Southern 印迹(Southem blotting)。它首先用合适的限制性内切核酸酶将 DNA切割，进行电泳分离后，利用干燥的吸水纸产生毛细作用，使液体经过凝胶，从而使 DNA片段由液流携带从凝胶转移并结合在固体支持物表面。
解析： 暂无解析
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第1题：

目前mRNA的分子生物学测定方法主要包括 ( )

A、Southern印迹杂交法

B、Northern印迹杂交法

C、RT-PCR法

D、原位杂交

E、原位PCR


参考答案：BCD

第2题：

下面各项技术中，没有利用核酸分子杂交原理的是( )。

A、Southern印迹

B、Northern印迹

C、Western印迹

D、斑点印迹

E、基因芯片


参考答案：C

第3题：

RFLP可以用如下方法检测()。

A.Southern印迹杂交和Northern印迹杂交

B.Southern印迹杂交和PCR后酶切

C.PCR后酶切和斑点杂交

D.Southern印迹杂交和原位杂交

E.PCR后酶切和原位杂交


标准答案：B

第4题：

简述Southern印迹杂交。


本题答案：是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。
其基本原理是：
具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。
由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性，综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果，便可绘制出DNA分子的限制图谱。
Southern印迹杂交是研究DNA图谱的基本技术，在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。Southern印迹杂交的基本方法是将DNA标本用限制性内切酶消化后，经琼脂糖凝胶电泳分离各酶解片段，然后经碱变性，Tris缓冲液中和和高盐下通过毛吸作用将DNA从凝胶中转印至硝酸纤维素膜上、烘干固定后即可用于杂交。凝胶中DNA片段的相对位置在DNA片段转移到滤膜的过程中继续保持着，附着在滤膜上的DNA与32P标记的探针杂交，利用放射自显影术确立探针互补的每一条DNA带的位置，从而可以确定在众多消化产物中含某一特定序列的DNA片段的位置和大小。(琼脂糖凝胶电泳→硝酸纤维素膜吸印)。

第5题：

检测经凝胶电泳分离后转移到膜上的RNA，常用的方法为 ( )

A、菌落印迹杂交

B、斑点杂交

C、原位杂交

D、Southern印迹杂交

E、Northern印迹杂交


参考答案：E

第6题：

用下列方法进行重组体的筛选，哪项说明外源基因进行了表达 ( )

A、Southern印迹杂交

B、Northern印迹杂交

C、原位菌落杂交

D、Western印迹

E、基因芯片技术


参考答案：D

第7题：

下面哪项技术不是利用核酸分子杂交的原理

A、Southern印迹

B、Northern印迹

C、Western印迹

D、斑点印迹

E、基因芯片


参考答案：C

第8题：

特定标记的核酸探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，并对其实行检测的方法称为( )。

A、原位杂交

B、狭槽杂交

C、斑点杂交

D、Southern杂交

E、Northern杂交


正确答案：A

第9题：

直接检测细胞或组织中的DNA或RNA，常用的方法为 ( )

A、菌落印迹杂交

B、斑点杂交

C、原位杂交

D、Southern印迹杂交

E、Northern印迹杂交


参考答案：C

第10题：

Southern印记杂交是( )

A、检测DNA的方法

B、检测RNA的方法

C、检测蛋白的方法

D、检测酶的方法


参考答案：A

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