农学
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相似问题和答案
第1题：
简述革兰氏染色方法及其机理
正确答案: 革兰氏阳性细菌由于细胞壁较厚、肽聚糖含量较高和其分子交联度较紧密，在用乙醇洗脱时，肽聚糖网孔会因脱水而明显收缩，再加上它基本上不含类脂，故乙醇处理不能在壁上溶出缝隙，因此，结晶紫与碘复合物仍能牢牢阻留在其细胞壁内，使其呈现紫色。反之，革兰氏阴性细菌因其壁薄、肽聚糖含量低和交联松散，故遇乙醇后，肽聚糖网孔不易收缩，加上它的类脂含量高，所以当乙醇把类脂溶解后，在细胞壁上就会出现较大的缝隙，这样，结晶紫与碘的复合物就极易被溶出细胞壁，因此，通过乙醇脱色后，细胞又呈无色。这时，再经番红等红色染料进行复染，就使革兰氏阴性细菌出现红色，而革兰氏阳性菌则仍呈紫色。
第2题：
简述细菌革兰氏染色的方法和步骤。
正确答案: ①结晶紫②革兰氏碘夜③95%酒精④沙黄复染液.
第3题：
说明革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁结构的差异,并解释革兰氏染色的机理。
参考答案：(1)革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁主要结构成分的差异：革兰氏阳性菌的细胞壁较厚，达15~80mm。其化学成分主要是肽聚糖，站细胞壁总成分的40%~95%，形成15~50层的聚合体。此外，还有磷壁酸、多糖和蛋白质等。革兰氏阴性菌细胞壁较薄，其结构和成分较复杂，由外膜与周质间隙组成，无磷壁酸。外膜由脂多糖、磷脂、外膜蛋白质和脂蛋白等组成，脂多糖位于最外层，其中的类脂A是革兰氏阴性菌内毒素的主要成分。周质间隙是革兰氏阴性菌细胞壁外膜与细胞膜之间狭窄的空隙，其中含有一薄层肽聚糖以及蛋白酶、核酸酶、肽聚糖合成酶、结合蛋白和受体蛋白等多种周质蛋白。(2)革兰氏染色机理：1.革兰氏染色法，(1)草酸铵结晶紫染色：在已干燥、固定好的抹片上，滴加草酸铵结晶紫染色液，经1~2min，水洗。这时细菌都染成紫色。(2)碘溶液助染：加碘溶液于抹片上，作用1~3min,水洗。这时细菌都呈更深的紫色。(3)95%酒精脱色：加95%酒精于抹片上，可见标本中一些紫色染料脱出、直至紫色染料不在脱出(时间因细菌抹片厚薄不同而异，大约30s至1min)，水洗。这时有的细菌原染上的紫色被脱去，呈无色;有的细菌原染上的紫色脱不了，仍保持紫色。(4)复染：加碱性复红液(或沙黄液或稀释石碳酸复红液)复染10~30s，水洗。这时已脱色的细菌复染成红色，未脱色的细菌呈蓝紫色。(5)油镜观察：将染好的片用滤纸盖上吸干或烘干，油镜观察，呈蓝紫色的细菌为革兰氏阳性菌，呈红色的为革兰氏阴性菌。2.革兰氏染色原理：G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经石炭酸复红或沙黄复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色。
第4题：
细菌革兰氏染色的机理及染色的现象？
正确答案: 机理：细胞壁组成成分有差异。
现象：阳性菌——紫色；阴性菌——红色。
第5题：
简述革兰氏染色机理？
正确答案: 通过结晶紫液初染和碘液媒染后，在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。G+细菌由于其细胞壁较厚，肽聚糖网层次多和铰链致密，故遇脱色溶剂乙醇处理时，因失去水而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色。
反之，G-细菌因其细胞壁薄，外膜层类脂含量高，肽聚糖层薄和铰链度差，遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘的复合物的溶出，因此细胞褪成无色，这时再经红色染料复染，就使G-细菌呈现红色，而G+细菌仍保留最初的紫色。
第6题：
试以枯草芽孢杆菌为例，简述采用革兰氏染色法染色的结果、原理及其主要操作步骤。
正确答案: 结果：G+，菌体呈蓝紫色。
原理：G+细菌细胞壁中肽聚糖含量高，而脂类物质含量低，且肽聚糖层网状结构紧密、牢固、多层。当用乙醇处理时，脂类物质溶解而使得肽聚糖层网状结构中的孔径变小，细胞壁通透性降低，结晶紫-碘的复合物保留于细胞中而不易脱色，故菌体仍呈结晶紫-碘复合物的颜色（蓝紫色）。
主要操作步骤：涂片：将培养一定时间的菌种均匀涂布于载玻片上，干燥、固定。染色：结晶紫碘液95％乙醇沙黄。（初染）（媒染）（脱色）（复染）油镜观察。
第7题：
请简述革兰氏染色的机理。
正确答案: （1）G+、G-主要由其CW化学成分的差异而引起对乙醇的通透性，抗脱色能力的差异。主要有肽聚糖的厚度和结构所决定。
（2）G+的CW：肽聚糖层厚，脂质含量低。乙醇脱色时CW脱水，孔径减少，透性降低，不易脱色，呈初染得蓝紫色。
（3）G-的CW：肽聚糖层薄，脂质含量高。乙醇脱色时，类脂被乙醇溶解，透性升高，细胞被复染显红色。
第8题：
简述革兰氏染色方法？
正确答案: （1）在已干燥固定好的抹片上，滴加草酸铵结晶紫染色液数滴，染色1-2分钟，水洗
（2）滴加革兰氏碘液媒染1-3分钟，水洗。
（3）滴加95%酒精脱色，约30秒-1分钟，水洗。
（4）滴加石炭酸复红染色液复染1-2分钟，水洗。
（5）吸干或烘干，镜检。革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
第9题：
革兰氏染色的机理是什么？
正确答案:G+ 菌：细胞壁厚，肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色时，肽聚糖因脱水而孔径缩小，故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内，细胞不能被酒精脱色，仍呈紫色。Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，因其含脂量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，酒精将细胞脱色，细胞无色，沙黄复染后呈红色。
第10题：
请简述革兰氏染色的机制及其重要性。
正确答案: 革兰氏染色是丹麦医生革兰于1884年发明的对细菌染色的方法。
初染，媒染剂，脱色，复染。细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异，主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。
经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物，乙醇能使它溶解，所以染色的前二步结果是一样的，但在G＋细胞中，乙醇还能使厚的肽聚糖层脱水，导致孔隙变小，由于结晶紫和碘的复合物分子太大，不能通过细胞壁，保持着紫色。在G—细胞中，乙醇处理不但破坏了胞壁外膜，还可能损伤肽聚糖层和细胞质膜，于是被乙醇溶解的结晶紫和碘的复合物从细胞中渗漏出来，当再用衬托的染色液复染时，显现红色。
红色染料虽然也能进入已染成紫色的G+细胞，但被紫色盖没，红色显示不出来。对于鉴别细菌和临床上选择抗菌药物进行治疗均有重要意义。