理学
相似问题和答案
第1题：
从动植物细胞匀浆中提取基因组DNA时，常用EDTA、氯仿 - 异戊醇混合液和95％乙醇试剂。请根据蛋白质和核酸的理化性质回答：
(1)该实验中这些试剂各起什么作用?
(2)举出一种可以鉴定所提取基因组的DNA中是否残留有RNA 的方法。
(1) 试剂的作用
①EDTA可螯合金属离子，抑制DNA酶的活性。
②氯仿 - 异戊醇混合液使蛋白质变性沉淀，并能去除脂类物质。
③95％乙醇可使DNA沉淀。
(2) 鉴别方法
①采用地衣酚试剂检测RNA分子中的核糖。如果反应液呈绿色，说明残留有RNA。
②采用紫外吸收法检测A260／A280的比值。如果比值大于1．8，说明残留有RNA。
③采用琼脂糖凝胶电泳法检测是否有小分子量的RNA条带存在。
第2题：
（126—130题共用备选答案）
A．透析与超滤法
B．盐析
C．超速离心
D．凝胶过滤
E．电泳
126.通过去除蛋白质颗粒表面的水化膜和电荷使蛋白质沉淀的方法是
127.利用蛋白质大分子的性质，分离的方法是
128.根据蛋白质分子量大小、密度及形状的分离方法是
129.利用蛋白质的带电性质以及分子量大小及形状的分离方法是
130.利用蛋白质分子大小不同的层析分离方法是
第3题：
利用蛋白质大分子的性质，分离的方法是（ ）
第4题：
常用的蛋白质分离纯化方法有哪几种？各自的原理是什么？
正确答案: 1、沉淀：向蛋白质水溶液中加入浓的无机盐溶液，可使蛋白质的溶解度降低，而从溶液中析出。
2、电泳：蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的，在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同，有薄膜电泳、凝胶电泳等。
3、透析：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。
4、层析：A.离子交换层析，利用蛋白质的两性游离性质，在某一特定pH时，各蛋白质的电荷量及性质不同，故可以通过离子交换层析得以分离。如阴离子交换层析，含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来。B.分子筛，又称凝胶过滤。小分子蛋白质进入孔内，滞留时间长，大分子蛋白质不能进入孔内而径直流出。
5、超速离心：既可以用来分离纯化蛋白质，也可以用作测定蛋白质的分子量。不同蛋白质因其密度与形态各不相同而分开。
第5题：
请详细说明蛋白质的主要性质。
正确答案: ①两性及等电点；
②胶体性质；
③沉淀作用；
④蛋白质变性；
⑤与金属离子的配位性
第6题：
利用蛋白质的带电性质以及分子量大小及形状的分离方法是（ ）
第7题：
电泳和等电聚焦都是根据蛋白质的电荷不同，即酸碱性质不同的两种分离蛋白质混合物的方法。
正确答案:正确
第8题：
根据蛋白质分子量大小、密度及形状的分离方法是（ ）
第9题：
蛋白质双向电泳（2-DE）是根据蛋白质（）和（）的不同来分离蛋白质的技术。
正确答案:分子量大小；等电点
第10题：
根据溶解度不同，蛋白质有几种分离纯化方法。
正确答案: 利用蛋白质溶解度的差异是分离蛋白质的常用方法之一。影响蛋白质溶解度的主要因素有溶液的pH值、离子强度、溶剂的介电常数和温度等。
1）等电点沉淀蛋白质在等电点时溶解度最小。单纯使用此法不易使蛋白质沉淀完全，常与其他方法配合使用。
2）盐析沉淀中性盐对蛋白质胶体的稳定性有显著的影响。一定浓度的中性盐可破坏蛋白质胶体的稳定因素而使蛋白质盐析沉淀。盐析沉淀的蛋白质一般保持着天然构象而不变性。有时不同的盐浓度可有效地使蛋白质分级沉淀。通常单价离子的中性盐（NaCl）比二价离子的中性盐[（NH4）2SO4]对蛋白质溶解度的影响要小。
3）低温有机溶剂沉淀法在一定量的有机溶剂中，蛋白质分子间极性基团的静电引力增加，而水化作用降低，促使蛋白质聚集沉淀。此法沉淀蛋白质的选择性较高，且不需脱盐，但温度高时可引起蛋白质变性，故应注意低温条件。一般在0～40℃之间，多数球状蛋白的溶解度随温度的升高而增加；40～50℃以上，多数蛋白质不稳定，并开始变性。因此对蛋白质的沉淀一般要求低温条件。