法学

问答题简述斑点杂交(PCR-SSO分型方法)。

题目
问答题
简述斑点杂交(PCR-SSO分型方法)。
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相似问题和答案

第1题:

对扩增的ssDNA进行多态性分析的HIA分型方法是

A、PCR-RFLP

B、PCR-SSCP

C、PCR-SSOP

D、SBT

E、PCR-SSO


参考答案:B

第2题:

简述同工酶的分型方法。


本题答案:1)同工酶的多态性采用凝胶电泳方法进行分型。
区带电泳:
利用酶蛋白分子的大小和所携带电荷数量(酶蛋白的电荷密度的差异)→Rf。
等电聚焦技术:
根据酶蛋白分子的等电点不同,在pH梯度介质中,酶蛋白分子聚焦在相应的等电点pH位置上,形成狭窄而清晰的区带。
2)凝胶介质上酶区带的显现及鉴定。
直接底物显色法:
常用于测定水解酶,无色底物被酶催化反应转变成有色产物。
荧光染色法:
酶催化下,非荧光底物生成高度荧光的产物或使荧光底物转化成非荧光产物(负荧光染色)。
电子转移染料染色:
酶催化下,同时NAD+或NADP+还原成NADH或NADPH,同时提供电子。染料还原成暗蓝紫色的不溶性甲月替。

第3题:

简述Gc分型原理、方法及法医学应用评价。


参考答案:Gc:
维生素D结合蛋白DPB,也成型特异性成分,电泳属a2球蛋白,主要生物学功能是结合和转运维生素D。
分型原理:
1)免疫电泳
2)PAG圆盘电泳
3)等电聚焦技术
4)DNA分型
Gc法医学应用评价
1)个人识别率为0.799
2)非父排除率为34.8%
3)室温保存4个月的血痕可检出Gc型
4)4℃条件下保存6个月的尿液可检出Gc型
5)在血痕检测中,优于Hp

第4题:

反向斑点杂交


正确答案:是将ASO探针固定在尼龙膜上,用扩增的DNA样品与膜上探针杂交。由于ASO探针长度有限(一般为15~20个碱基),为使探针序列不受固定过程的影响,当ASO合成后,用末端转移酶在其3′端加一上段多聚核苷酸(dT)尾(一般为400个左右),这种带尾的ASO点在膜上后,经紫外光照射,其多聚dT即可与尼龙膜表面的氨基发生作用而结合在膜条上。因点杂交技术是将扩增的DNA样品固定在尼龙膜上,探针游离,而此技术与之相反,所以着这技术叫做反向打点杂交技术。

第5题:

HLA分型方法()。

A.血清学分型

B.DNA分型

C.交叉分型

D.分辨分型


答案:AB

解析:HLA分型方法主要包括血清学分型和DNA分型。血清学分型技术侧重于分析HA抗原的特异性,DNA分型方法则侧重于分析基因本身的多态性。

第6题:

特定蛋白常用的测定方法是

A、免疫电泳

B、ELISA

C、化学发光

D、散射比浊

E、斑点杂交


参考答案:D

第7题:

简述斑点杂交(PCR-SSO分型方法)。


本题答案:将PCR扩增片段制成斑点,用等位基因特异性寡核苷酸探针(ASO)杂交,通过探针放射自显影结果进行HLA分型。
反向斑点杂交(RDB)
把探针预先固定在膜上,标记PCR引物。

第8题:

免疫球蛋白定量测定常用的方法是

A、免疫电泳

B、ELISA

C、化学发光

D、免疫比浊

E、斑点杂交


参考答案:D

第9题:

简述Ⅰ型错误,Ⅱ型错误及其控制方法。


正确答案: (1)I型错误:零假设为真而被拒绝所犯的错误。
(2)II型错误:保留了不真实的零假设所犯的错误。
(3)I型错误的控制由检验者选择检验的水平来控制。
(4)II型错误的控制:一是合理安排拒绝区域的位置;二是增大样本容量。

第10题:

斑点杂交


正确答案:是将样品点在支持膜上进行分子杂交的技术。如将核酸点在能与核酸结合的膜(如硝酸纤维素膜、尼龙膜、聚偏氟乙烯膜等)上,经处理(如80℃烘烤、紫外光照等)使核酸固定在膜上,然后与标记探针进行分子杂交,用放射自显影或非放射性显色检测。可作定性或半定量分析。