医学

问答题简述Southern印迹杂交的原理和方法。

题目
问答题
简述Southern印迹杂交的原理和方法。
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相似问题和答案

第1题:

T与B淋巴细胞淋巴瘤基因诊断方法中不正确的是( )。

A、反转录PCR

B、Southern印迹杂交

C、多聚酶链反应(PCR)扩增技术

D、Northern印迹杂交

E、Western印迹杂交


参考答案:E

第2题:

检测经凝胶电泳分离后转移到膜上的RNA,常用的方法为 ( )

A、菌落印迹杂交

B、斑点杂交

C、原位杂交

D、Southern印迹杂交

E、Northern印迹杂交


参考答案:E

第3题:

RFLP可以用如下方法检测()。

A.Southern印迹杂交和Northern印迹杂交

B.Southern印迹杂交和PCR后酶切

C.PCR后酶切和斑点杂交

D.Southern印迹杂交和原位杂交

E.PCR后酶切和原位杂交


标准答案:B

第4题:

简述Southern杂交的原理。


正确答案:将从组织中得到的DNA加热变性后,用琼脂糖电泳,再转膜于硝酸纤维素膜上,用标记有同位素的DNA探针进行杂交,放射自显影,从而对DNA进行鉴定。

第5题:

简述Southern印迹杂交。


本题答案:是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量。
其基本原理是:
具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。
由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性,综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果,便可绘制出DNA分子的限制图谱。
Southern印迹杂交是研究DNA图谱的基本技术,在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。Southern印迹杂交的基本方法是将DNA标本用限制性内切酶消化后,经琼脂糖凝胶电泳分离各酶解片段,然后经碱变性,Tris缓冲液中和和高盐下通过毛吸作用将DNA从凝胶中转印至硝酸纤维素膜上、烘干固定后即可用于杂交。凝胶中DNA片段的相对位置在DNA片段转移到滤膜的过程中继续保持着,附着在滤膜上的DNA与32P标记的探针杂交,利用放射自显影术确立探针互补的每一条DNA带的位置,从而可以确定在众多消化产物中含某一特定序列的DNA片段的位置和大小。(琼脂糖凝胶电泳→硝酸纤维素膜吸印)。

第6题:

用下列方法进行重组体的筛选,哪项说明外源基因进行了表达 ( )

A、Southern印迹杂交

B、Northern印迹杂交

C、原位菌落杂交

D、Western印迹

E、基因芯片技术


参考答案:D

第7题:

直接检测细胞或组织中的DNA或RNA,常用的方法为 ( )

A、菌落印迹杂交

B、斑点杂交

C、原位杂交

D、Southern印迹杂交

E、Northern印迹杂交


参考答案:C

第8题:

目前mRNA的分子生物学测定方法主要包括 ( )

A、Southern印迹杂交法

B、Northern印迹杂交法

C、RT-PCR法

D、原位杂交

E、原位PCR


参考答案:BCD

第9题:

用来鉴定DNA的技术是

A.Northern印迹杂交

B.亲和层析

C.Southern印迹杂交

D.Western印迹杂交

E.离子交换层析


参考答案:C

第10题:

固相杂交不包括()。

  • A、Northern印迹杂交
  • B、原位杂交
  • C、吸附杂交
  • D、Southern印迹杂交

正确答案:C