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常用目的基因制备的方法及原理是哪些?

题目

常用目的基因制备的方法及原理是哪些?

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相似问题和答案

第1题:

隔热耐火材料的制备方法及原理有哪些?(列举3种)


正确答案: (1)通过添加可燃物或易挥发物形成气孔:在制砖的泥料中加入容易烧尽的可燃物,如炭末、锯木屑等,使制品在烧成后具有一定的气孔。
优点:孔径尺寸、气孔率、气孔形貌可控。
缺点:气孔分布很难均匀,可燃物烧不尽时容易出现黑芯,环境污染。
(2)发泡法
1.泡沫法:在制砖的泥料中加入泡沫剂,如松香皂等,并以机械方法使之起泡,经烧成后获得多孔的制品。
2.化学法:在泥料中加入碳酸盐和酸、苛性碱和铝或金属和酸等,借化学反应产生气体,使制品获得气孔。
优点:可制备各种孔径大小和形状的多孔陶瓷,既可以获得开孔材料,也可以获得闭孔材料,特别适合制备闭孔材料。
缺点:工艺条件难以控制和对原料的要求较高。
(3)挤压法在制砖的泥料中加入造孔剂,经挤压成型,烧成后获得多孔的制品。
优点:可以根据需要对孔形状和孔大小进行精确设计。
缺点:不能形成复杂孔道结构和孔尺寸较小的材料
(4)颗粒堆积形成气孔结构:凭借骨料颗粒按一定堆积方式堆积而成,颗粒靠粘结剂或自身粘合成型,颗粒间的孔隙形成相互贯通的微孔。
优点:通过控制颗粒尺寸,能控制孔径大小。
缺点:对颗粒尺寸范围要求严格,不能形成闭气孔。
(5)原位分解合成技术:利用原料矿物在一定温度分解出气体的特性,将此原料和其它原料混合均匀,加热到一定温度,即会在试样内部留下气孔,分解后的产物与其它原料原位反应,生成所需的多孔结构。
(6)多孔材料法用天然的硅藻土或人造的粘土泡沫熟料、氧化铝或氧化锆空心球等多孔原料制取轻质耐火砖。或者将纤维制成定形制品。

第2题:

什么是基因诊断?基因诊断中常用的方法有哪些?试简述其中一种方法的原理。


正确答案: 基因诊断是指用分子生物学的技术对引起疾病的原因——遗传基因、致病微生物和寄生虫,以及某些恶性肿瘤在基因水平上进行病原学和细胞遗传基因的检测和分析。基因诊断中常用的方法有核酸分子杂交、PCR、DNA芯片技术、限制酶酶谱分析和DNA序列测定等。
核酸分子杂交是基因诊断的最基本的方法之一。它的基本原理是:互补的核酸单链能够在一定条件下结合成双链,即能够进行杂交。它不仅能在DNA和DNA之间进行,也能在DNA和RNA之间进行。因此,当用一段已知基因的核酸序列作探针,与变性后的单链基因组DNA接触时,如果两者的碱基完全配对,它们即互补地结合成双链,从而表明被测基因组DNA中含有已知的基因序列。

第3题:

包合物常用的制备方法有哪些?


正确答案:包合物常用的制备方法有饱和水溶液法、研磨法、冷冻干燥法、喷雾干燥法、超声法等。

第4题:

简述基因诊断的常用技术方法和原理。


正确答案:所谓基因诊断,就是以DNA或RNA为诊断材料,通过检查基因的存在、缺失或表达异常,对人体的状态或疾病作出诊断的方法和过程。
基因诊断通常分为对基因突变的诊断、多态性分析和基因表达异常的诊断。常用技术有:1.核酸分子杂交(具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下按碱基互补配对原则形成双链的过程。其基本原理是:具有互补序列的两条单链核酸分子在一定条件下(适当温度、离子强度等),按碱基互补配对原则,重新形成双链。)
①Southern印迹法;②Northern印迹法;③斑点杂交;④原位杂交
2.聚合酶链式反应(在模板、引物、4种dNTP和耐热DNA聚合酶存在的条件下,利用DNA半保留复制和其在不同温度下变性复性的特性,人为控制温度——高温变性,低温复性,室温延伸,循环多次后,特异性扩增位于两段已知序列之间的DNA区段)
3.单链构象多态性检测(DNA经变性形成单链后,在中性条件下单链DNA会因其分子内碱基之间的相互作用,形成一定的分子构象,相同长度的单链DNA,如果碱基序列不同,形成的构象就不同)
4.限制酶酶谱分析(基因突变可能导致基因上某一限制酶识别位点的丢失或相对位置发生改变,以此酶消化待测DNA和野生型对照DNA,通过比较二者的酶切片段的长度,数量上的差异可判断待测DNA的突变情况)
5.DNA序列测定
6.DNA芯片技术 它们共同的原理为是检测DNA或RNA的结构变化与否,量的多少及表达功能是否正常,以确定被检查者是否存在基因水平的异常变化,以此作为疾病确证的依据
互补链,选中间有三个氢键连接的碱基组合,寄生生物与宿主之间的关系,关于某种遗传病的两道逻辑推理题。还有两题忘了。概念题有四个,答案依次为合成代谢、叶绿素、光合作用第三阶段的电子载体(自己去找)、三羧酸循环。实验设计题一为:关于21三体综合症(唐氏综合症)的早期检查的一个设计(与游离的胎儿DNA在母体血液中有关);题二为NaOH引起某实验失败的验证的设计;题三为甲基化去甲基化T%含量与构建文库是片段大小成反比的这种实验现象的解释;题四说说基因组学与本学科的展望。

第5题:

试述基因芯片的工作原理及制备。


正确答案:基因芯片技术是建立在基因探针和杂交测序技术上的一种高效、快速的核酸序列分析手段。它将大量探针分子固定于支持物上,然后与标记的样品进行杂交,通过检测杂交信号的强度及分布来进行分析。在一块1cm2大小的基因芯片上,根据需要可固定数以千计甚至万计的基因,以此形成一个密集的基因方阵,实现对千万个基因的同步检测。基因芯片技术主要包括四个主要步骤:芯片制备、样品制备、杂交反应和信号检测以及结果分析。

第6题:

目的基因的制备?


正确答案: 制取目的基因有三种方法:
一是采用生物学方法。原核生物中常用鸟枪法或散弹射击法,点是操作简便,缺点是工作量大,具有一定的盲目性。另一种生物学方法是采用分子杂交手段;
二是采用化学合成法。它是以单核苷酸为原料,在体外用化学方法按照已知基因的碱基顺序,先合成DNA短片段,再依次连接而成完整的目的基因链;
三是基因文库法。又称为DNA文库,它是指用克隆方法将一种生物全部基因组以重组体的方式长期保持在适当的宿主中;
四是利用PCR扩增法。PCR技术是一种用于体外扩增位于两端已知序列之间的DNA区段的分子生物学技术。
原核生物基因的分离多采用前法,而真核细胞基因的分离则采用后两种方法。

第7题:

把目的基因导入受体细胞常用的方法?


正确答案: ①运用如质粒、大肠杆菌λ噬菌体、Ti质粒等载体;
②利用微弹射击法;
③电击法;
④PEG(聚乙二醇)介导法。

第8题:

简述获得目的基因常用的几种方法。


参考答案:(1)直接从染色体DNA中分离:仅适用于原核生物、叶绿体和线粒体基因的分离,较少采用。
(2)人工合成:根据已知多肽链的氨基酸顺序,利用遗传密码表推定其核苷酸顺序再进行人工合成。适应于编码小分子多肽的基因。
(3)从mRNA合成cDNA:采用一定的方法钓取特定基因的mRNA,再通过逆转录酶催化合成其互补DNA(cDNA),除去RNA链后,再用DNA聚合酶合成其互补DNA链,从而得到双链DNA。这一方法通常可得到可表达的完整基因。
(4)利用PCR合成:如已知目的基因两端的序列,则可采用聚合酶链反应(polymerasechain reaction,PCR)技术,在体外合成目的基因。
(5)从基因文库中筛选:首先建立基因组或cDNA文库,利用探针从文库中筛选目的克隆。

第9题:

常用的癌基因诊断方法有哪些?


正确答案: ①基因点突变的检测;
②基因扩增的检测;
③表达异常的检测;
④重排、缺失及多态性的检测;
⑤原位杂交。

第10题:

常用的工业催化剂的制备方法有哪些?各自的有缺点及适用场合是什么?


正确答案: (1)沉淀法:常用方法,可制备多组分催化剂影响因素:1)沉淀剂、金属盐的性质2)沉淀反应条件:沉淀剂与金属盐的浓度、pH、温度、加料顺序、搅拌速度、沉淀物的生成速度、沉淀时间、洗涤与干燥方法等(2)浸渍法:制备负载型催化剂的常用方法过量溶液浸渍法、等体积浸渍、多次浸渍、蒸汽相浸渍
(3)热分解法(or固相反应法):采用可加热分解的盐类:硝酸盐、碳酸盐、草酸盐等1)原料的影响(碱土金属的硝酸盐只能得到亚硝酸盐)2)热分解条件对分解产物的影响:分解温度↑与分解时间↑→粒度↑(4)熔融法(5)还原法:多用于金属氧化物的制备