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简述革兰氏染色的过程,并说明革兰氏染色机理,其中关键步骤是哪一步。为什么?

题目

简述革兰氏染色的过程,并说明革兰氏染色机理,其中关键步骤是哪一步。为什么?

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第1题:

简述细菌革兰氏染色法的染色过程和结果判断。(染色过程说明所用染料名称及染色时间)


正确答案: 革兰氏染色法染色过程
(1)初染:草酸铵结晶紫染1分钟,自来水冲洗。
(2)媒染:碘液覆盖涂面染1分钟,水洗。
(3)脱色:加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。
(4)蕃红梁色液(稀)染2-3min后,自来水冲洗。干燥,镜检红色为阴性,紫色为阳性。

第2题:

什么是革兰氏染色?简述染色过程。


正确答案:革兰氏染色:是一种鉴别不同类型细菌的染色方法过程:
(1)初染:碱性染料结晶紫初染。
(2)媒染:加碘液。提高染料与细胞间相互作用,使之结合更牢固。
(3)脱色:用酒精(丙酮)脱色,结晶紫保留子啊细胞
内,称之为革兰氏阳性菌,阴性细菌结晶紫被洗掉,细胞呈无色。
(4)复染:用沙黄染料进行复染,革兰氏阴性菌呈现淡红色,革兰氏阳性菌仍为深紫色。

第3题:

说明革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁结构的差异,并解释革兰氏染色的机理。


参考答案:(1)革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁主要结构成分的差异:革兰氏阳性菌的细胞壁较厚,达15~80mm。其化学成分主要是肽聚糖,站细胞壁总成分的40%~95%,形成15~50层的聚合体。此外,还有磷壁酸、多糖和蛋白质等。革兰氏阴性菌细胞壁较薄,其结构和成分较复杂,由外膜与周质间隙组成,无磷壁酸。外膜由脂多糖、磷脂、外膜蛋白质和脂蛋白等组成,脂多糖位于最外层,其中的类脂A是革兰氏阴性菌内毒素的主要成分。周质间隙是革兰氏阴性菌细胞壁外膜与细胞膜之间狭窄的空隙,其中含有一薄层肽聚糖以及蛋白酶、核酸酶、肽聚糖合成酶、结合蛋白和受体蛋白等多种周质蛋白。(2)革兰氏染色机理:1.革兰氏染色法,(1)草酸铵结晶紫染色:在已干燥、固定好的抹片上,滴加草酸铵结晶紫染色液,经1~2min,水洗。这时细菌都染成紫色。(2)碘溶液助染:加碘溶液于抹片上,作用1~3min,水洗。这时细菌都呈更深的紫色。(3)95%酒精脱色:加95%酒精于抹片上,可见标本中一些紫色染料脱出、直至紫色染料不在脱出(时间因细菌抹片厚薄不同而异,大约30s至1min),水洗。这时有的细菌原染上的紫色被脱去,呈无色;有的细菌原染上的紫色脱不了,仍保持紫色。(4)复染:加碱性复红液(或沙黄液或稀释石碳酸复红液)复染10~30s,水洗。这时已脱色的细菌复染成红色,未脱色的细菌呈蓝紫色。(5)油镜观察:将染好的片用滤纸盖上吸干或烘干,油镜观察,呈蓝紫色的细菌为革兰氏阳性菌,呈红色的为革兰氏阴性菌。2.革兰氏染色原理:G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质,而且肽聚糖层较薄、交联度低,故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质,增加了细胞壁的通透性,使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出,结果细菌就被脱色,再经石炭酸复红或沙黄复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高,类脂质含量少,经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小,通透性降低,因此细菌仍保留初染时的颜色。

第4题:

简述革兰氏染色机理?


正确答案: 通过结晶紫液初染和碘液媒染后,在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。G+细菌由于其细胞壁较厚,肽聚糖网层次多和铰链致密,故遇脱色溶剂乙醇处理时,因失去水而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇的处理不会溶出缝隙,因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内,使其保持紫色。
反之,G-细菌因其细胞壁薄,外膜层类脂含量高,肽聚糖层薄和铰链度差,遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘的复合物的溶出,因此细胞褪成无色,这时再经红色染料复染,就使G-细菌呈现红色,而G+细菌仍保留最初的紫色。

第5题:

简述革兰氏染色的过程和原理。


正确答案: 染色要点为:先用结晶紫染色,菌体呈紫色;再加碘液媒染,菌体呈紫色;然后用乙醇脱色,革兰氏阳性菌呈紫色,阴性菌为无色。最后用沙黄或番红复染,阳性菌呈紫色,阴性菌为红色。
原理:染色结果与细胞壁的结构和化学组成有关。革兰氏阳性菌细胞壁厚,肽聚糖含量高,网络结构紧密,含脂量低,在被酒精脱色后孔径变小,结晶紫-碘复合物不能被脱区去,故菌体为紫色;而革兰氏阴性菌与之相反,脱色后被复染为红色。

第6题:

简述革兰氏染色方法及其机理


正确答案: 革兰氏阳性细菌由于细胞壁较厚、肽聚糖含量较高和其分子交联度较紧密,在用乙醇洗脱时,肽聚糖网孔会因脱水而明显收缩,再加上它基本上不含类脂,故乙醇处理不能在壁上溶出缝隙,因此,结晶紫与碘复合物仍能牢牢阻留在其细胞壁内,使其呈现紫色。反之,革兰氏阴性细菌因其壁薄、肽聚糖含量低和交联松散,故遇乙醇后,肽聚糖网孔不易收缩,加上它的类脂含量高,所以当乙醇把类脂溶解后,在细胞壁上就会出现较大的缝隙,这样,结晶紫与碘的复合物就极易被溶出细胞壁,因此,通过乙醇脱色后,细胞又呈无色。这时,再经番红等红色染料进行复染,就使革兰氏阴性细菌出现红色,而革兰氏阳性菌则仍呈紫色。

第7题:

革兰氏染色法的关键步骤是什么?为什么?


正确答案: 95%酒精脱色是关键步骤,酒精具有脱色、溶脂、蛋白凝固的功能,革兰氏阳性菌胞壁主要是粘肽(蛋白)遇浓酒精凝固变性成厚壳,而阻止酒精内渗,故不能脱出前步的染色,故呈紫色;革兰氏阴性菌胞壁主要是脂类及多糖,遇浓酒精溶脂,胞壁遭破坏,酒精内渗,完全脱出前步的染色,复染后呈红色.

第8题:

革兰氏染色的关键步骤是酒精脱色。


正确答案:正确

第9题:

请简述革兰氏染色的机理。


正确答案: (1)G+、G-主要由其CW化学成分的差异而引起对乙醇的通透性,抗脱色能力的差异。主要有肽聚糖的厚度和结构所决定。
(2)G+的CW:肽聚糖层厚,脂质含量低。乙醇脱色时CW脱水,孔径减少,透性降低,不易脱色,呈初染得蓝紫色。
(3)G-的CW:肽聚糖层薄,脂质含量高。乙醇脱色时,类脂被乙醇溶解,透性升高,细胞被复染显红色。

第10题:

革兰氏染色的机理是什么?


正确答案:G+ 菌:细胞壁厚,肽聚糖含量高,交联度大,当乙醇脱色时,肽聚糖因脱水而孔径缩小,故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内,细胞不能被酒精脱色,仍呈紫色。Gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,因其含脂量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,酒精将细胞脱色,细胞无色,沙黄复染后呈红色。