自然科学相关工程与技术
相似问题和答案
第1题：
重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括：分（目的基因的分离）、切（限制性内切酶切割目的基因和载体）、接（目的基因和载体连接）、转（连接产物导入受体细胞）、筛（筛选阳性重组子）。将重组DNA导入大肠埃希菌最常用方法是A、磷酸钙共沉淀法
B、脂质体法
C、显微注射法
D、噬菌体感染
E、氯化钙法
重组DNA技术中最常用的筛选方法是A、标志补救筛选
B、插入表达筛选
C、抗性筛选
D、限制性内切酶酶切图谱分析
E、核酸分子杂交筛选
问题 2 答案：C
第2题：
如何提高用杂交筛选法进行重组噬菌斑的筛选的结果的可靠性？
正确答案:将硝酸纤维素膜覆盖在琼脂平板表面，使之与噬菌斑直接接触，噬菌斑中大量没有被包装的游离DNA及噬菌体颗粒便一起转移到膜上。可从同一噬菌斑平板上连续印几张同样的硝酸纤维素膜，进行重复实验，而且可以使用两种或数种不同的探针筛选同一套重组子，提高结果的可靠性。
第3题：
根据重组DNA的结构特征进行筛选重组子时，下列说法错误的是 ( )
A、限制性内切酶图谱分析
B、重组DNA快速裂解
C、核酸分子杂交
D、核酸分子测序
E、PCR
第4题：
可以用核酸杂交筛选法进行（）的筛选。
正确答案:重组噬菌斑
第5题：
重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括：分（目的基因的分离）、切（限制性内切酶切割目的基因和载体）、接（目的基因和载体连接）、转（连接产物导入受体细胞）、筛（筛选阳性重组子）。重组DNA技术中最常用的筛选方法是（）
- A、标志补救筛选
- B、插入表达筛选
- C、抗性筛选
- D、限制性内切酶酶切图谱分析
- E、核酸分子杂交筛选
正确答案:C
第6题：
遗传基因工程的主要内容包括
A．载体和目的基因的分离
B．限制性内切酶的切割，并把载体和目的基因合成重组
C．DNA重组体的转化表达
D．DNA重组体的扩增、筛选与鉴定
解析：DNA克隆就是应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质——同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA与载体DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分子——复制子，继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子细胞，再进行扩增、提取获得大量同——DNA分子，即DNA克隆。实现基因克隆所采用的方法及相关的工作统称重组DNA技术，又称基因丁程。一个完整的DNA克隆过程应包括：目的基因的获取，基因载体的选择与构建，目的基因与载体的拼接，重组DNA分子导入宿主细胞，筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞(转化子)。
第7题：
如何筛选与鉴定重组体？
正确答案: 鉴定
（1）报告基因的检测法
（2）目的基因分子杂交检测方法
筛选：
在利用载体间接转化外源基因或直接转化处理之后，大部分受体细胞是没有被转化的，这就需要采用特定的方法将转化细胞与未转化细胞区分开来。为了淘汰未转化的细胞，人们试验了各种不同的基因作为转化的报告基因（reporter gene），包括一些显性的选择标记基因，以及可用特定方法检测其蛋白质产物的基因。其中GUS基因和NPTII基因能耐受氨基末端融合、检测简单，是目前应用最多的报告基因。在植物基因工程中双子叶植物如番茄、辣椒、马铃薯的转化及部分单子叶植物的转化用NPTII基因所抗的卡那霉素（kanamycin）来筛选。
第8题：
PCR技术的本质是
A、核酸杂交技术
B、核酸重组技术
C、核酸扩增技术
D、核酸变性技术
E、核酸连接技术
第9题：
基因文库的构建对重组子的筛选举出3种方法并简述过程。
正确答案: 抗生素抗性筛选、抗性的插入失活、兰-白斑筛选或PCR筛选、差式筛选、DNA探针
多数克隆载体均带有抗生素抗性基因（抗氨苄青霉素、四环素）。当质粒转入大肠杆菌中后，该菌便获得抗性，没有转入的不具有抗性。但不能区分是否已重组。
在含有两个抗性基因的载体中，如果外源DNA片段插入其中一个基因并导致该基因失活，就可用两个分别含不同药物的平板对照筛选阳性重组子。如pUC质粒含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷）产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛选重组细菌。
第10题：
简述利用蓝白斑筛选重组子的原理。
正确答案:β—半乳糖苷酶基因编码1021个氨基酸，基因产物装配为四聚体后才有酶活性。该蛋白质可分为两部分：α肽段和β肽段。前者负责四聚体装配，后者具β—半乳糖苷酶活性；只有当两者都存在时，才会表现出酶活性，可催化X-Gal水解为兰色产物，该作用称之为α-互补作用。这两个部分可独立存在， 分别由两个基因编码。为α肽段编码的基因称之为lacZα（编码145 AAs），lacZα编码区5‘-端可容许很大的变化（如加入多克隆位点）而不影响酶活性。当外源DNA分子插入多克隆位点后，会破坏α肽段的编码。所以重组DNA转化α肽段编码区缺失的E.coli，涂布在含X-Gal的平板上会产生白色菌落，而非重组子产生蓝色菌落。