临床医学检验临床免疫

单选题下列哪些载体常用于构建基因文库( )A 质粒 B 粘粒 C 反转录病毒 D Prion E 大肠杆菌

题目
单选题
下列哪些载体常用于构建基因文库( )
A

质粒 

B

粘粒 

C

反转录病毒 

D

Prion 

E

大肠杆菌 

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第1题:

常用来构建文库使用的载体系统有哪些?各有什么特点?


正确答案:1.噬菌体载体系统:构建的库容量最大(适于全长cDNA的克隆),转染效率最高,有较好的质量控制指标(通过对转染细胞的表现鉴定,如蓝白斑分析),适合于cDNA文库的长期保持。
缺点:采用的文库筛选方法有限,文库中许多的cDNA片段在宿主细胞中常常无法获得功能性表达。
2.质粒载体系统:体外操作方便,在载体本身的设计上有很大的可塑性,可对cDNA文库进行功能性筛选缺点,插入片段的载体容量小,因此文库中含有全长cDNA的克隆比例少;文库的库容量较小,质粒文库需要以活的转化菌形式保存和扩增,保存条件严格,不适于长期保存。
3.噬菌粒载体系统:功能性筛选,缺点同“质粒载体”,cDNA文库功能筛选的重要方法
4.哺乳类细胞表达载体:侵染的细胞增广;对细胞侵染率高;转染进宿主细胞的重组病毒基因能高频地整合到宿主细胞基因组中。

第2题:

干扰素表达载体的构建过程中,将表达载体导入()中,筛选得到()。


正确答案:假单胞杆菌干扰素;工程菌

第3题:

下列哪些载体常用于构建基因文库 ( )

A、质粒

B、粘粒

C、反转录病毒

D、Prion

E、大肠杆菌


参考答案:B

第4题:

基因文库


正确答案: 也叫DNA文库,指从生物组织细胞提取出全部DNA(核、质)或染色体DNA,酶切或物理剪切成一定大小的DNA片断后,随机地连接到基因载体上,然后转移到适当的宿主(受体)细胞中,通过细胞增殖而构成各个片段的无性繁殖系(克隆)的集合体。

第5题:

质粒载体人工构建的目的是什么?


正确答案: 天然质粒往往存在着这样或那样的缺陷,因此不适合用作基因工程的载体必须对之进行改造构建。
(1)加入合适的选择标记基因,如两个以上,易于用作选择。
(2)增加或减少合适的酶切位点,便于重组。
(3)缩短长度,切去不必要的片段,提高导入效率,增加装载量。
(4)改变复制子,变严紧为松弛,变少拷贝为多拷贝,人工构建的方法就是重组,拼拼接接。

第6题:

用于载体的DNA应具有哪些基本特性?


正确答案:①在宿住细胞中能独立复制,即本身为复制子;
②载体DNA分子中有一段不影响其复制的非必需区域,允许外源基因插入后随载载体DNA分子一同进行复制或扩增;
③基因组中有1~2个筛选标记,赋于寄主细胞新的特性,便于重组子的筛选;
④分子量小,可多次复制(拷贝),易于操作。

第7题:

基因文库的构建对重组子的筛选举出3种方法并简述过程。


正确答案: 抗生素抗性筛选、抗性的插入失活、兰-白斑筛选或PCR筛选、差式筛选、DNA探针
多数克隆载体均带有抗生素抗性基因(抗氨苄青霉素、四环素)。当质粒转入大肠杆菌中后,该菌便获得抗性,没有转入的不具有抗性。但不能区分是否已重组。
在含有两个抗性基因的载体中,如果外源DNA片段插入其中一个基因并导致该基因失活,就可用两个分别含不同药物的平板对照筛选阳性重组子。如pUC质粒含LacZ基因(编码β半乳糖苷酶)该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色,从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后,LacZ基因不能表达,菌株呈白色,以此来筛选重组细菌。

第8题:

下列哪些可以构建载体

A.质粒

B.噬菌体

C.病毒

D.酵母人工染色体


正确答案:ABCD

第9题:

获得目的基因的一种战略是从基因文库中筛选,下列程序中用于创建基因文库的是()。

  • A、PCR法与化学合成法
  • B、逆转录法和PCR法
  • C、鸟枪法和逆转录法
  • D、化学合成法和鸟枪法

正确答案:C

第10题:

什么是基因文库?cDNA文库是用于哪类生物细胞的基因制备?


正确答案:基因工程中,将某种生物全部基因组的遗传信息,贮存在可以长期保存的稳定重组体中,以备需要时能够随时应用它分离所需要的目的基因,这种保存基因组遗传信息的材料,称为基因组文库。cDNA文库法是从真核生物细胞中分离目的基因的常用方法。