临床医学检验临床免疫

单选题常采用质粒DNA小量提取的方法是()A 碱裂解法B SDS裂解法C 煮沸裂解法D 酚抽提法E 牙签少量制备法

题目
单选题
常采用质粒DNA小量提取的方法是()
A

碱裂解法

B

SDS裂解法

C

煮沸裂解法

D

酚抽提法

E

牙签少量制备法

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第1题:

常用于从转化菌中筛选DNA重组体的方法不包括

A、α互补筛选

B、插入失活筛选

C、杂交筛选

D、质粒的小量快速提取

E、DNA序列测定筛选


参考答案:D

第2题:

在碱裂解法提取质粒时,用于沉淀质粒DNA的试剂是

A.SDS

B.EDTA

C.75%乙醇

D.异丙醇

E.无水乙醇


参考答案:E

第3题:

有关煮沸裂解法提取质粒DNA的叙述中,正确的是 ( )

A、该法是一种条件比较剧烈的方法

B、煮沸不能完全灭活核酸内酶A

C、适用于大多数E.coli菌株

D、不适用于表达endA的菌株

E、只能用于小质粒DNA(<15kb)的小量制备


参考答案:ABCDE

第4题:

试述举2种质粒DNA提取的方法及应用。


正确答案: 质粒DNA提取的方法包括碱裂解法、煮沸裂解法和SDS裂解法。
碱裂解法:在NaOH存在的强碱性(pH12.0~14.0)的条件下,用强阳离子去垢剂SDS破坏细胞壁和裂解细胞,并使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA发生变性,释放出质粒DNA。它是一种适用范围很广的方法,能从所有的大肠杆菌(E.coli)菌株中分离出质粒DNA,制备量可大可小。
煮沸裂解法:是将细菌悬浮于含Triton X-100和溶菌酶的缓冲液中,Triton X-100和溶菌酶能破坏细胞壁,再用沸水浴裂解细胞,使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA发生变性。对CCC质粒DNA因结构紧密不会解链,当温度下降后,CCC质粒DNA可重新回复其超螺旋结构,通过离心去除变性的蛋白质和染色体DNA,然后回收上清液中的质粒DNA。本法只能用于小质粒DNA(小于15kb)的小量或大量制备,适用于大多数从大肠杆菌(E.coli)菌株中分离出质粒DNA。
S.DS裂解法:它是将细菌悬浮于等渗的蔗糖溶液中,用溶菌酶和EDTA处理以破坏细胞壁,再用SDS裂解去壁细菌,从而温和地释放出质粒DNA到等渗溶液中,然后用酚/氯仿抽提。适用于大质粒DNA的提取。

第5题:

有关煮沸裂解法提取质粒DNA的正确叙述是()

  • A、该法是一种条件比较温和的物理方法
  • B、煮沸能完全灭活核酸内酶A
  • C、不适用于大多数Ecoli菌株
  • D、适用于HB101菌株
  • E、适用于<15kb的质粒DNA制备

正确答案:E

第6题:

常采用质粒DNA小量提取的方法是 ( )

A、碱裂解法

B、SDS裂解法

C、煮沸裂解法

D、酚抽提法

E、牙签少量制备法


参考答案:A

第7题:

下列对细菌质粒生物学特性叙述正确的是

A:质粒DNA复制为自主复制
B:质粒DNA复制为非自主复制
C:质粒是细菌生命活动不可缺少的物质
D:细菌内结构相似的质粒都能稳定共存
E:质粒DNA不能复制

答案:A
解析:

第8题:

在碱裂解法提取质粒时,沉淀质粒DNA的试剂是

A.SDS

B.EDTA

C.异丙醇

D.75%乙醇

E.无水乙醇


参考答案:E

第9题:

目前使用较为广泛的质粒DNA小量提取的方法是()

  • A、牙签少量制备法
  • B、小量一步提取法
  • C、SDS裂解法
  • D、碱裂解法
  • E、煮沸裂解法

正确答案:D

第10题:

从细菌中分离质粒DNA的方法都包括的基本步骤是()。

  • A、培养细菌检测质粒
  • B、培养细菌使质粒扩增
  • C、收集和裂解细胞
  • D、分离和纯化质粒DNA
  • E、B+C+D

正确答案:E