兽医实验室考试

PCR引物长度一般为15～30个核苷酸。过短影响PCR的特异性，过长会提高相应退火温度，使延伸温度超过TaqDNA聚合酶最适温度74℃,影响产物的生成。

题目

PCR引物长度一般为15～30个核苷酸。过短影响PCR的特异性，过长会提高相应退火温度，使延伸温度超过TaqDNA聚合酶最适温度74℃,影响产物的生成。

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第1题：

关于PCR技术的扩展，下列叙述错误的是

A、多重PCR是在一次反应中加入多种引物，同时扩增一份DNA样品中的不同序列

B、筑巢法PCR可以大大提高PCR的效率，但PCR特异性降低

C、利用反向PCR，可以扩增已知序列区间以外的序列

D、利用不对称PCR，可以获得大量单链DNA

E、共享引物PCR是利用3条引物来扩增两种不同的DNA序列，这种PCR常用于细菌学鉴定，确定同一种细菌的不同种类


参考答案：B

第2题：

巢式PCR与普通PCR不同的是

A、普通PCR比巢式PCR特异性高

B、酶不同

C、底物不同

D、模板不同

E、前者用2对引物，后者用1对引物


参考答案：E

第3题：

PCR引物退火温度一般为

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正确答案：E
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第4题：

HIA基因分型法最常用的方法有

A.PCR扩增产物直接测序
B.DDGE
C.PCR-SSCP
D.DNA-RFLP
E.PCR-序列特异性引物(sequene specific primer，SSP)分型法

答案：E
解析：

第5题：

用序列特异性寡核苷酸探针杂交对PCR产物进行分析的HLA分型法是 ( )

A、PCR-RFLP

B、PCR-SSOP

C、SBT

D、PCR-SSCP

E、MLC


参考答案：B

第6题：

关于PCR引物设计的原理，下列叙述正确的是

A、待扩增片段的序列是已知的，在片段两侧确定引物顺序

B、引物长度一般为15～30个核苷酸，但也可多至50个左右

C、引物中的碱基应随机分布，G＋C的含量宜在45%～55%

D、引物内部不应形成二级结构，避免在链内存在互补的序列

E、可以在引物的3′末端引入特定的酶切位点


参考答案：ABCD

第7题：

检测RNA病毒的分子生物学方法是

A、反转录PCR(RT-PCR)

B、套式PCR(Nested PCR)

C、多重PCR(Multiplex PCR)

D、任意引物PCR(Arbitrarily Primed PCR)

E、限制性片段长度多态性（RFLP）分析


参考答案：A

第8题：

PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，其特异性决定因素为( )。

A、模板

B、引物

C、DNTP

D、镁离子

E、退火温度


参考答案：B

第9题：

PCR-SSP序列特异性引物PCR(名词解释)


本题答案：是根据等位基因的序列，设计具有序列特异性的引物，对样本进行DNA分型。该方法是以引物决定分型特异性。有以下优点：特异性强、重复性好、结果易于判定。

第10题：

PCR-SSP序列特异性引物PCR


正确答案: 是根据等位基因的序列，设计具有序列特异性的引物，对样本进行DNA分型。该方法是以引物决定分型特异性。有以下优点：特异性强、重复性好、结果易于判定。

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