工学
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相似问题和答案
第1题：
在菌种分离过程中常采用（）分离法，草菇、平菇、香菇、双孢菇多取（）组织进行分离。
正确答案:组织；菌肉
第2题：
大学实验教学过程要素有（）。
- A、学生
- B、实验教学物质条件
- C、实验教学计划
- D、实验指导教师
正确答案:A,B,D
第3题：
从实验教学运行的全过程来考察，采用的教学策略主要有：启发讲授教学策略、演示实验教学策略、边讲边实验教学策略，学生实验教学策略和学生独立实验教学策略。()
参考答案：正确
第4题：
联系实验教学举例说明菌种分离的一般过程。
正确答案:菌种分离的一般过程：土样的采取，预处理，培养，菌落的选择，产品的鉴定。以枯草芽胞杆菌的分离为例：
带菌土壤的热处理：称取1g带菌土壤湿润后放入80℃烘箱处理30min。
配制分离选择培养基，灭菌备用。
稀释制备菌液：取5支灭菌带帽15ml离心管，各加入无菌水9ml备用；将热处理过的土壤放入无菌50ml烧杯中，加入无菌水50ml，搅拌后静置片刻，上层液体为微生物悬液，按下法稀释微生物悬液：在第一支试管中加入1ml微生物悬液，混合均匀后再取1ml到第二支试管中混合，从第二支试管中再取1ml到第三支试管中，以此类推。
配制斜面培养基，灭菌备用。
涂布培养：取10-3、10-4、10-5、10-6稀释菌液各0.2ml，采用涂布和混合法形成8个平板，倒置后在37℃培养24-48小时，观察水解圈的形成，在无菌条件下将水解圈最大的菌落（水解圈/菌落最大者）转接种于斜面试管中在37℃培养。
第5题：
发酵工业获得符合要求的菌种的途径主要有（）.
- A、从自然界分离筛选
- B、从菌种保藏机构获得
- C、从生产过程中的已有菌种中筛选发生正突变的优良菌种
- D、从土壤中获得
正确答案:A,B,C
第6题：
从菌种出发，将细菌增殖到所需的数量，这一过程在细菌学上一般称为（）。
- A、生产
- B、繁殖
- C、分离
- D、培养
- E、鉴定
正确答案:D
第7题：
写出用组织分离法获得菌种的过程。
正确答案:（一）种菇的选择：选择优良品系，无病虫害个体的菌蕾作分离材料。
（二）分离过程：取菌蕾，表面消毒后，用无菌水冲洗数次，在无菌条件下取菌柄与菌盖中间的一小块组织，放置于平板上培养。25℃，3—5天可见白色绒毛状菌丝，说明分离成功。
①选种菇：外观典型、大小适中、无病虫害、八成熟、第1~2茬的子实体
②种菇消毒：用燃烧的酒精棉球迅速擦拭
③取接组织：纵剖（撕）菇体；尖头镊取柄盖交界处绿豆粒大的组织；放入新斜面中部
第8题：
在菌种分离过程中多采用（）法，对菌肉肥厚的子实体多采用（）组织进行分离进行接种。
正确答案:组织分离；菌内
第9题：
菌种分离的一般过程：（）、（）、（）、目的菌的筛选。
正确答案:采样；富集；分离
第10题：
何谓差别杂交和扣除杂交？举例说明用以分离基因的过程。
正确答案:差别杂交（differential hybridization）又叫差别筛选（differentual screening），适用于分离经特殊处理而被诱发表达的mRNA之cDNA克隆。为了增加这种方法的有效性，后来又发展出了扣除杂交技术。扣除杂交（subtractive hybridization）又叫扣除cDNA克隆（subtractive cDNA cloning），它是通过构建扣除文库（subtractive library）得以实现的。
差别杂交的技术基础需要有两种不同的细胞群体：在一个细胞群体中目的基因正常表达，在另一个细胞群体中目的基因不表达。在这种情况下便可制备到两种不同mRNA提取物。其一是含有一定比例的目的基因mRNA种的总mRNA群体，其二是不含有目的基因mRNA种的总mRNA群体。通过这两种总mRNA（或是它们的cRNA拷贝）为探针的平行杂交，对由表达目的的基因的细胞总mRNA构建的克隆库进行筛选。当使用存在目的基因的mRNA探针时，所有包含着重组体的菌落都呈阳性反应，在X光底片上呈现黑色斑点；而使用不存在目的基因的mRNA探针时，除了含有目的基因的菌落外，其余的所有菌落都呈阳性反应，在X光底片上呈现黑色斑点。比较这两种底片并对照原平板，便可以挑选出含目的基因的菌落，供作进一步研究使用。 扣除杂交是用一般细胞的mRNA与特殊细胞的cDNA杂交，先扣除一般共有的cDNA，再交剩下特异的cDNA进行克隆。
下面以T 细胞受体（T-cell receptor，TCR；有时亦称之为T细胞抗原受体）编码工因的分离为例子，说明扣除杂交筛选法的基本原理与简要过程。TCR基因只能在T细胞中表达，而不能在B细胞中表达。从T细胞mRNA制备来的单链cDNA，同大大超量的B细胞的mRNA在有利于发生DNA-RNA杂交的条件下保温，所有的能够在T和B两类细胞中同时表达的T细胞基因的cDNA分子（约占98%），都能与B细胞的mRNA退火形成DNA-RNA杂交分子，而不能在B细胞中表达的、T细胞特有的cDNA（约占2%），由于B细胞中没有相应的mRNA，仍然处于单链的状态。将此种杂交混合物通过羟基磷灰石柱（hydroxylapatite column），于是DNA-RNA杂交杂分便结合在柱上，而游离的单链cDNA则过柱流出。如此回收入到的T细胞特异的cDNA被转变为双链cDNA之后，与适当的λ噬菌体载体重组并转染给大肠杆菌寄主细胞，这样便得到了T细胞持cDNA高度富集的扣除文库。然后再按照同样方法制备扣除的cDNA探针，即被B细胞mRNA杂交扣除了的T细胞特异的cDNA探针，筛选文库，结果成功地分离到了T细胞的TCR基因。